Senyawa bioaktif spons Kaliapsis sp. dari perairan Pulau Menjangan Taman Nasional Bali Barat

SETYOWATI, Erna Prawita, Promotor Prof. Dr. Umar Anggara Jenie, M.Sc.,Apt

2009 | Disertasi |

Sampai saat ini penyakit kanker masih menjadi salah satu penyebab kematian terbesar di dunia. Walaupun kemajuan pesat telah diperlihatkan dalam bidang diagnosis dan terapi tetapi kemungkinan sembuh dari penyakit ini masih perlu ditingkatkan. Masih belum adanya obat-obat antikanker yang memuaskan mendorong dilakukannya penelitian-penelitian terhadap senyawa bioaktif sebagai sumber alternatif dalam pengobatan kanker di antaranya senyawa bioaktif dari spons laut. Spons merupakan biota laut multiseluler, tak bertulang belakang dengan tubuh berpori. Expedisi Snellius (1984-1985) menunjukkan Indonesia sebagai pusat penyebaran spons di Indo West Pacific (Hooper dan Levi, 1994; Soest, 1990). Jenis dan aktivitas spons yang ada di daerah perairan Indonesia belum banyak diketahui. Kondisi ini memberikan peluang untuk memanfaatkan spons laut Indonesia untuk pencarian senyawa bioaktif baru dari spons laut Indonesia. Hasil pengujian awal terhadap ekstrak kasar spons-spons yang dikoleksi dari Pulau Menjangan Taman Nasional Bali Barat, menunjukkan bahwa ekstrak etanol spons Kaliapsis sp. mempunyai aktivitas toksik secara Brine Shrimp lethality Test (BSLT) dengan harga LC50 8,04 µg/mL sedangkan uji sitotoksik terhadap sel Myeloma mempunyai harga IC50 22,6 µg/mL, sehingga spons Kaliapsis sp. layak untuk dilanjutkan ke tahap isolasi dan identifikasi struktur senyawa bioaktifnya. Spons Kaliapsis sp. dimaserasi dengan pelarut kloroform dan metanol. Ekstrak kloroform yang merupakan ekstrak aktif difraksinasi dengan kromatografi cair hampa udara dengan fase gerak n-heksana, n-heksana-etil asetat, kloroform-metanol dan metanol. Masing-masing uji fraksi dipantau aktivitasnya dengan uji BSLT dan uji sitotoksik terhadap sel Myeloma. Senyawa aktif pada fraksi aktif dipisahkan dengan kromatografi lapis tipis preparatif dan dilakukan uji kemurnian. Hasil isolasi senyawa bioaktif spons Kaliapsis sp. diperoleh isolat 1 dan isolat 5M74. Isolat 1 bersifat sitotoksik terhadap sel Myeloma (IC50 0,18 µg/mL), sel HeLa (IC50 6,9 µg/mL), sel T47D (IC50 7,9 µg/mL) dan sel Raji (IC50 5,8 µg/mL). Hasil identifikasi struktur senyawa bioaktif berdasarkan data spektra (UV, IR, MS NMR) disimpulkan bahwa isolat 1 adalah 1-(tetrahydro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)furan2-yl)-5-methylpyrimidine-2,4(1H,3H)-dione. Isolat 5M74 bersifat sitotoksik terhadap sel Myeloma (IC50 10,3 µg/mL), sel HeLa (IC50 16,5 µg/mL), sel T47D (IC50 8,3 µg/mL) dan sel Raji (IC50 7,8 µg/mL ). Hasil identifikasi struktur senyawa aktif berdasarkan data spektra (UV, IR, MS NMR) disimpulkan bahwa isolat 5M74 adalah Theonellapeptolide Id Senyawa isolat 1 memacu apoptosis terhadap sel Myeloma, begitu juga dengan isolat 5M74 terhadap sel Raji.

At present, cancer is one of the second causal factor of human death on the world at the number of those of suffering increases annually. Although rapid development has been performed in the area of cancer diagnosis and therapy, unfortunately the possible of patient recovery is needs to be improved. Therefore, this will encourage many researchers to explore anticancer drugs not only from terestrial but also from marine especially from sponges. Sponge is multicelullar marine organism, invertebrate with porous body. Snellius expedition (1984-1985) showed that Indonesia as the center of distribution of sponges in Indo West Pacific (Hooper & Levi, 1994; Soest, 1990). Kinds and activity of sponges in Indonesian sea still unexplored. This conditions give an opportunity to explore Indonesian marine sponges to find new bioactive substances. Preliminary Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) and cytotoxic tests against Myeloma cells of the crude chloroform extract of sponges collected from Menjangan National Park West Bali showed that Kaliapsis sp. has a high toxicity compared to the methanol extract (BSLT/LC50 8,04 µg/mL and cytotoxic/IC50 22,6 µg/mL). Kaliapsis sp sponge was macerated by chloroform and methanol. The active chloroform extract was then fractionated by vacuum liquid chromatography on nhexane, n-hexane-ethyl acetate, chloroform-methanol and methanol as the mobile phases increasing polarity. Each fraction obtained was tested for its toxicity using BSLT method and cytotoxic test against Myeloma cells. The active fraction was then purified further using preparative thin layer chromatography. Result of isolation of bioactive compound from Kaliapsis sp. sponge yield two compounds (1 and 5M74). Compound 1 was toxic toward Myeloma cells (IC50 0,18 µg/mL), HeLa cells (IC50 6,9 µg/mL), T47D cells (IC50 7,9 µg/mL) and Raji cells (IC50 5,8 µg/mL). According to the spectroscopy data (UV, IR, MS NMR) be concluded that the compound 1 is 1-(tetrahydro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)furan2-yl)-5-methyl pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione. Compound 5M74 was toxic toward Myeloma cells (IC50 10,3 µg/mL), HeLa cells (IC50 16,5 µg/mL), T47D cells (IC50 8,3 µg/mL) and Raji cells (IC50 7,8 µg/mL). According to the spectroscopy data (UV, IR, MS NMR) be concluded that the compound 5M74 is Theonellapeptolide Id Compound 1 and 5M74 each was toxic toward Myeloma cells ( compound 1) and Raji cells (compound 5M74) by apoptosis

Kata Kunci : Spons Kaliapsis sp., Senyawa sitotoksik, Kaliapsis sp Sponge, Cytotoxic compound