Hubungan ekspresi latent membrane protein-1 terhadap berbagai ekspresi molekul cluster of differentiation, sitokin, dan protease pada karsinoma nasofaring dan kaitannya degan status nodus, metastasis, dan ketahanan hidup

MURTONO, C, Promotor Prof. Dr. Soeripto, dr., Sp.PA

2008 | Disertasi |

Latar Belakang. Latent Membrane Protein 1 (LMP1) adalah satu produk onkogen yang diekspresi oleh KNF terkait EBV. LMP1 dilaporkan mempengaruhi invasi, metastasis, dan ketahanan hidup. Dilaporkan peran LMP1 terhadap respon imun melalui ekspresi MHC kelas I dan II, rekrutmen sel radang dan produksi sitokin. Sitokin IL4, IL6, dan IL10 dilaporkan berperan sebagai stimulator meskipun di tumor yang lain berperan sebagai inhibitor metastasis. Juga Matrix metalloprotease (MMP)2, MMP9 berperan penting dalam memacu metastasis. Tujuan penelitian adalah pertama, mengetahui peran ekspresi LMP1di jaringan terhadap ketahanan hidup yang secara sekuensial terjadi melalui hubungannya dengan molekul MHC kelas I dan II dan padatnya sel radang CD3, CD4, CD8, CD68,dan S100. Kedua, mengetahui pengaruh ekspresi LMP1 terhadap status N(nodus) dan M(metastasis) yang secara sekuensial terjadi melalui hubungannya dengan protein-protein sitokin dan protease di atas baik ekspresinya di dalam jaringan maupun kadar dalam serumnya. Kriteria eksklusif adalah tidak adanya EBV di jaringan tumor. Metode penelitian. RISH EBER digunakan untuk pemeriksaan adanya infeksi EBV. Pengukuran kadar protein dalam serum dilakukan dengan ELISA. Pemeriksaan adanya protein di jaringan menggunakan metoda immunohistokimiawi dengan memakai antibodi monoklonal yang sesuai. Korelasi jalur antara ekspresi LMP1 dengan ketahanan hidup melalui molekul MHC kelas I, dan II serta dengan kepadatan sel radang CD3, CD4, CD8, CD68, dan S100 ditentukan dengan path analysis menggunakan program LISREL 8.50.Nilai T>1,96 dinyatakan sebagai batas kemaknaan. Juga korelasi jalur antara ekspresi LMP-1 terhadap status N(nodus) dan M(metastasis) melalui ekspresi IL4, IL6, IL10,IFN-gamma, dan Granzyme B beserta ekspresi MMP-2, MMP-9, baik di dalam jaringan maupun dalam sample serumnya ditentukan dengan cara yang sama. Hasil penelitian. Hasil penelitian menunjukkan adanya korelasi yang signifikan antara ekspresi LMP1 dengan ekspresi MHC kelas I HLA2A (nilai T:2,28), beta 2-mikroglobulin (nilaiT:1,88), dan MHC kelas II HLA DR (nilaiT:3,00), juga antara MHC kelas I HLA2A dengan kepadatan sel CD3+ (nilai T:2,24), antara kepadatan sel CD8+ dengan ketahanan hidup (nilai T:2,01), dan antara ekspresi LMP1 dengan kepadatan sel S100+ (nilai T:2,08). Terdapat hubungan yang signifikan antara kadar IL6 dan IL10 (tetapi kadar IL4, IFN-gamma, dan Granzyme B tidak berhubungan) dengan kadar MMP9 (nilai T berturut-turut 1,97 dan 1,99); antara kadar MMP2, MMP9 dalam serum dengan status N (nilai T berturut-turut 3,45 dan 4,44) dan ekspresi MMP9 dengan status M (nilai T: 2,44). Kesimpulan. Sebagai kesimpulan adalah terdapat proses sekuensial antara LMP1, ekspresi MHC kelas I (HLA2A, beta 2-mikroglobulin) dan MHC kelas II HLA DR di jaringan tumor, kepadatan sel CD3+, dan dengan ketahanan hidup. Juga terdapat proses sekuensial antara ekspresi LMP1 dengan ketahanan hidup dan kepadatan sel S100+. Juga terdapat proses sekuensial antara kadar sitokin IL6 dan IL10 dengan kadar MMP9 dalam serum dan dengan metastasis sementara sitokin IL4, IL6, IFN-gamma, dan Granzyme B tidak terlibat dalam proses.

Background. Latent Membrane Protein (LMP1) is a product of oncogene, expressed by EBV associated NPC. LMP1 was reported to influence invasion, metastasis, and survival and has a role on the immune response through activation of MHC class I and II, recruitment of inflammatory cells, and productions of cytokines. The cytokines IL4, IL6, and IL10 were reported as metastasis stimulator in certain cancer but as inhibitor in other malignancies. Matrix metalloprotease (MMP)2 and MMP9 were reported to enhance of metastasis. The aimes of this study is first, to know the role of LMP1 expression on the survival that take place sequencially through its relation with the molecules MHC class I (HLA A10, HLA2A, beta 2-microglobuline) and II (HLA DR) and with the density of mononuclear cells CD3, CD4, CD8, CD68, S100 in the tumor tissue. The second, to know the influence of the LMP1expression on N (nodus) and M (metastasis) status that take place sequencially through its relation with IL4, IL6,IL10,IFN-gamma, and Granzyme B, and with MMP2, MMP9 either in the tissue or in the parallel serum sample. The exclusive criteria was the absence of EBV in the tumor tissue. Methods. RISH EBER was used to detect the EBV infection and ELISA method for determining the proteins level in the serum. To detect proteins in the tumor tissue immunohistochemistry method was used using relavant monoclonal antibodies. Path correlation between the expression of LMP1 with the survival through the MHC class I and II, and the density of inflammatory cells was determined by path analysis using the LISREL 8.50 program. T value >1,96 was declare as significance. The same method was used to determine path correlation between LMP1 expresion with N(nodus) and M(metastasis) status through the relation between LMP1 expression with those cytokines, IFN-gamma, Granzyme B and with proteases either in the tissue or in the serum level. Result. The result was there were significant correlations between the expression of LMP1 with the expressions of MHC class I HLA2A (T value:2,28), beta 2-microglobuline (T value:1,88) and MHC class II HLA DR(T value:3,00); also between the expression of MHC class I HLA2A with the density of CD3+ (T value:2,24) and between the density of CD8+ with the survival ( T value:2,01). The expresion of LMP1 in the tumor tissue was significantly correlated with the density of S100+ cells (T value:2,08). There was a significan correlation between the level of IL6 dan IL10 (but not the level of IL4, IFN-gamma, and Granzyme B) with the level of MMP9 ( T value resp.1,97 and 1,99); also between the level of MMP2, MMP9 with N status (T value resp 3,45 and 4,44) and the expresion MMP9 with the M status ( Tvalue: 2,44). Conclusion. The conclusion was there was a sequential process between LMP1 expresion, expression of MHC class I (HLA2A, beta 2-microglobulin) and MHC class II HLA DR in tumor tissue, the density of CD3+, and the survival. There was a direct correlation between LMP1 and the survival and S100 density. There was also a sequensial process between the level of IL6, IL10 with the MMP9 level and with the survival. The cytokines IL4, IL6, IFN-gamma,dan Granzyme B were not involved in the process.

Kata Kunci : LMP1, Ketahanan hidup, metatstasi, MMP, CD, Sitokin