Isolasi dan identifikasi senyawa antibakteri dari daun Eupatorium Odoratum Linn terhadap bakteri staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922

HASNAWATI, Prof. Dr. Subagus Wahyuono, M.Sc.,Apt

2010 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Indonesia merupakan wilayah tropis sehingga prevalensi penyakit infeksi yang disebabkan oleh mikroba sampai saat ini masih tetap tinggi. Di sisi lain penggunaan antibiotik secara intens dapat menimbulkan resistensi mikroba terhadap antibiotik yang ada. Daun E. odoratum secara tradisional digunakan untuk terapi penyakit infeksi kulit seperti bisul, kurap, dan kadas. Berdasarkan hal tersebut, maka daun E. odoratum memungkinkan memiliki aktivitas antibakteri. Penelitian ini dilakukan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa aktif antibakteri dari daun E. odoratum. Serbuk kering E. odoratum diekstraksi dengan menggunakan Soxhlet secara bertingkat menggunakan pelarut yang berbeda polaritasnya, dimulai dengan washbenzen dan diakhiri dengan metanol. Kedua ekstrak kental (washbenzen dan metanol) yang diperoleh diuji aktivitas antibakterinya menggunakan metode difusi agar. Ekstrak aktif difraksinasi menggunakan kromatografi vakum cair dengan fase gerak washbenzen, campuran washbenzen:etilasetat etilasetat dan metanol. Selanjutnya fraksi aktif difraksinasi kembali dengan menggunakan kromatografi vakum cair. Senyawa aktif pada fraksi aktif dimurnikan dengan kromatografi lapis tipis preparatif. Spektrum UV-Vis isolat (2.3) dalam kloroform menampakkan serapan λmax pada 291 nm, ini menunjukkan adanya senyawa aromatik. Spektrum inframerah isolat (2.3) (KBr) menunjukkan serapan pada 3410 cm-1 (OH), 2925 (CHalifatik), 2853 (CHalifatik), 1734 (C=O), 1639 (C=C), 1458 (CH2), 1384 (CH3), 1251 (epoksi), 1158 dan 1132 cm-1(C-O). Spektra LC-MS tidak dapat menunjukan signal ion molekul m/z, sehingga berat molekulnya belum dapat ditentukan. Spektra 1H-NMR (CDCl3) menunjukkan resonansi pada δ 1,26 ( 3H,s); 3,65 (3H,s); 3,82 (3H,s); 3,93 (3H,s); 4,53 (1H,d); 5,0 (1H,d); 5,7 (1H,d); 6,06 (1H,d); 6,14 (1H,d); 6,93 (1H,d); 7,05 (1H,dd); dan 7,16 (1H,d) ppm. Spektra ini diperkirakan mengindikasikan sebuah kalkon yang mengandung epoksi. Senyawa aktif antibakteri (2.3) pada loading terkecil 250 μg dari daun E. odoratum menunjukan aktivitas penghambatan terhadap S. aureus dan E. coli dengan diameter 9,5 dan 7,2 mm.

Indonesia is one of tropical countries, having a high prevalensi of microbial infection diseases. An intensive application of antibiotics causes microbial resistance. The leaves of Eupatorium odoratum L. have been used traditionally to cure abscess due to infectious diseases, leech bite and wound healing. It was suspected that the leaves contain antibacterial compounds. Therefore, the aim of this study is to isolate and identify of anti infective compounds from E. odoratum leaves. The dried powder of E. odoratum leaves is extracted by Soxhlet using washbenzene and followed by methanol. Both extracts (washbenzene and metanol) are tested to determine th eir antibacterial activity by using diffusion test. The active extract is fractionated by vacuum liquid chromatography using washbenzene, combination of washbenzene and ethyl acetate, ethyl acetate and methanol. The active fraction is further refractionated by vacuum liquid chromatography. The active compound (2.3) obtained from the active fraction is purified by using preparative thin layer chromatography. The UV-Vis spectrum of (2.3) (chloroform) showed λmax at 291 nm, this indicated the presence of aromatic group. The IR spectrum of the active compound (2.3) (KBr) displayed signals at 3410 cm-1 (-OH), 2925 (-CHalifatik), 2853 (-CHalifatik), 1734 (-C=O), 1639 (C=C), 1458 (CH2), 1384 (CH3), 1251 (epoksi), 1158 and 1132 cm-1 (C-O). LC-MS spectrum was not showed information. 1H-NMR spectrum (CDCl3) showed signals at δ 1.26 ( 3H,s); 3.65 (3H,s); 3.82 (3H,s); 3.93 (3H,s); 4.53 (1H,d); 5.0 (1H,d); 5.7 (1H,d); 6.06 (1H,d); 6.14 (1H,d); 6.93 (1H,d); 7.05 (1H,dd); dan 7.16 (1H,d) ppm. This spectrum is suspected to be an epoxide chalcone type of compound. The active compound (2.3) at minimum loading of 250 μg from E. odoratum leaves showed bacterial growth inhibition on S. aureus and E. coli at diameter 9.5 and 7.2 mm respectively.

Kata Kunci : Eupatorium odoratum L,Kalkon,Senyawa antibakteri, Eupatorium odoratum L., chalcone, antibacterial compound.