Streptomyces penghasil antibiotik yang berasosiasi dengan rhizosfer vegetasi mangrove rhizopora mucronata dan rhizophora apiculata

KRISMAWATI, Hana, Langkah Sembiring, M.Sc., Ph.D

2010 | Tesis | S2 Biologi

Penelitian mengenai Streptomycetes penghasil antibiotik yang berasosiasi dengan rhizosfer beberapa spesies mangrove telah dilakukan. Pengambilan sampel dilakukan di hutan mangrove Karimun Jawa dan Teluk Awur Jepara. Selanjutnya dilakukan isolasi, karakterisasi dan identifikasi isolat yang termasuk dalam anggota genus Streptomyces. Isolasi selektif Streptomycetes dilakukan dengan media Starch Casein Agar (SCA) dan Raffinose Histidin Agar (RAF). Koloni Streptomycetes yang tumbuh diidentifikasi berdasarkan pengenalan karakteristik koloni. Koloni yang memiliki ciri Streptomycetes dipurifikasi dengan media Yeast Pepton Agar dan Beanett Agar. Selanjutnya dilakukan pengecatan Gram untuk memberikan klarifikasi bahawa isolat tersebut adalah Streptomycetes. Klasifikasi Streptomycetes menggunakan color grouping dilakukan dengan menumbuhkan Streptomycetes pada media oatmeal agar dan tyrosin agar. Potensi Streptomycetes dalam menghasilkan antibiotik ditentukan dengan melakukan uji penghambatan dengan bakteri uji Eschericia coli ATCC 35218 dan Staphyilococcus aureus ATCC 25923 dan deteksi gen PKS. Jenis antibiotik diidentifikasi dengan Thin Layer Chromatography (TLC). Keanekaragaman isolat yang mampu menghasilkan antibiotik ditentukan dengan pengamatan ornamentasi permukaan rantai spora dengan Scaning Electrone Microscope (SEM) dan pengamatan morfologi rantai spora dengan metode inclined cover slip. Hasil penelitian menunjukkan terdapat 123 isolat Streptomycetes. Hasil color gruping menunjukkan bahwa 123 terkelompok menjadi 3 grup yaitu Group A sebanyak 100, grup B sebanyak 21 dan grup C sebanyak 2 isolat. Hasil screening isolat uji penghambatan dengan bakteri uji yang dilakukan pada 123 isolat didapatkan hasil 16 isolat yang memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri uji. Deteksi gen PKS terhadap isolat yang memiliki kemampuan menghamabat menunjukkan hasil yang negative. Pengamatan rantai spora terhadap isolate yang berptensi menghasilkan antibiotik menunjukkan ada 3 tipe morfologi rantai spora yaitu flexus, folded dan curly dan 3 ornamentasi permukaan yaitu spiny, hairy dan flat. Seleksi strain penghasil antibiotik menunjukkan terdapat 12 strain yang berpotensi menghasilkan antibiotik. Kelompok antibiotik yang dihasilkan diduga jenis Erytromycin, Tetracyclin, Rifamicyn, Polymyxin dan Chloramphenicol. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa Streptomycetes yang berpotensi menghasilkan antibiotik dapat diisolasi dari rizosfer Vegetasi Mangrove Rhizopora mucronata dan Rhizopora apiculata.

The research of Streptomycetes Sreptomyces producing antibiotic associated with rhizosphere mangrove plant Rhizopora mucronata and Rhizopora apiculata has been done. Sampling was taken in Karimun Jawa and Teluk Awur Jepara mangrove forest. Isolation, characterization and Identification were made. Selective isolation of Streptomycetes used Starch Casein Casein (SCA) and Raffinose Histidin Agar (RAF). The colony of Streptomycetes which grew was identified based on colony recognition . The colony were identified as Streptomycetes was purified using Yeast Papton Agar and Beanett Agar. The identification of Streptomycetes was continued by gram staining. Classification was done using color grouping method on oatmeal agar and tyrosin agar. The presence of Streptomycetes producing antibiotic was observedby using inhibition test of Eschericia coli ATCC 35218 and Staphyilococcus aureus ATCC 25923 and PKS gene detection. The sorts of antibiotic were identified by thin layer chromatography method. Diversity of Isolates producing antibiotics were adjusted by observation of spore chain surface ornamentation using Scaning Electrone Microscope and observation of spore chain morphology using inclined cover slip methode that observed in contras phase microscope. The results of the study showed 123 isolates of Streptomycetes and that can be divide into 3 color group on the basic of their color, namely: color group A (100 isolates), color group B (21 isolates) and color group C (2 isolates). The screening of potential isolates to produce antibiotic was done by using inhibition test, it was shown that 16 isolates were potential producing antibiotic. The observation of spore chain morphology showed there were three types of morphology: flexus, folded and curly, and three types of surface ornaments: spiny, hairy, flat. The group of antibiotic was presumably identified as Erytromycin, Tetracyclin, Rimfamicyn, Polymyxin and Chloramphenicol. The study was concluded that Streptomycetes producing antibiotics can be isolated from mangrove plant Rhizopora mucronata and Rhizopora apiculata.

Kata Kunci : Streptomycetes,Antibiotik,Mangrove