Identifikasi daging babi pada produk olahan dengan polymerase chain reaction-fragmnet length polymorphism (PCR-RFLP)

ABIDIN, Mohammad Zainal, Yuny Erwanto, S.Pt., M.P., Ph.D

2009 | Tesis | S2 Bioteknologi

Identifikasi jenis daging pada produk daging olahan menjadi perhatian dan pertimbangan karena berbagai faktor antara lain kesehatan, pemalsuan, religious dan pengawasan industri daging. Hingga kini, pencegahan praktek curang (pemalsuan) menjadi bagian penting dalam mengkontrol regulasi produk makanan. Isu tercampurnya daging babi pada produk pangan merupakan hal yang krusial dalam kehalalan pangan. Adanya deteksi sensitif dan akurat menjadi faktor penting dalam mengkontrol regulasi produk makanan. Tujuan penelitian ini adalah mendeteksi keberadaan daging babi sampai level (1%) dan menguji sensitifitas dan spesifitas PCR sebagai metode untuk mengidentifikasi jenis daging pada produk daging olahan. Suatu metode polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR–RFLP) dikembangkan untuk mengidentifikasi daging babi dalam campuran pada produk olahan yang meliputi perebusan, autoklaf, roasting, frying dan mendeteksi daging babi dalam campuran daging sapi, kambing dan ayam sampai level 1%. Primer L14841 dan H15149 didesain berdasarkan mitokondrial gen cytochrome b dan menghasilkan produk PCR sekitar 359 bp. Untuk membedakan jenis daging babi dari ketiga jenis daging tersebut diatas, produk amplifikasi PCR didigesti menggunakan enzim restriksi BseDI yang menghasilkan fragmen 131 dan 228 bp. Identifikasi jenis daging dengan PCRRFLP cyt b menunjukkan hasil yang baik untuk mengetahui keberadaan daging babi. Metode ini dapat dilakukan secara rutin untuk deteksi daging babi dari daging lain untuk kehalalan suatu daging atau pangan.

Identification of the origin of meat used in processed meat products has always been a concern for a variety of reasons including wholesomeness, adulteration, religious factors, and control of unfair-market competition in the meat industry. Hence, preventive fraudulence (falsification) has been always been a vital part to check a food product regulation. The issue to mixed pork in food product is an especially crucial of Halal authentication, of food product. The availability of sensitive and accurate method is essential for monitoring in food product regulation. This research was aimed to detect pork existence at level of 1%. The polymerase chain reaction (PCR) method was assessed with respect to sensitivity and specifity for identification of the origin of meat used in processed meat products. A polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism (PCR–RFLP) method had been developed for the identifying pork in mixture to process product including boiling, autoclaving, roasting, frying and detecting of pork in fresh mixture beef, goat meats and chicken meats at level of 1% . The primers L14841 and H15149 were designed in the mitochondrial cytochrome b (cyt b) gene and to produce of amplified fragment was 359 bp. To distinguish between the species of pork from third the meat above, the amplified PCR products were cut with restriction enzyme BseDI fragment 131 and 228 bp. The cyt b PCR-RFLP species identification assay yielded excellent results to know pork existence. This method could be done continuously for detection of pork from other meats for Halal authentication a meat or food.

Kata Kunci : Daging babi,Cytochrome b,L14841,H15149,PCR,RFLP, Pork, cytochrome b