Optimasi dan validasi metode penetapan kadar klopidogrel secara kromatografi cair kinerja tinggi menggunakan kolom C 18 dan detektor UV serta aplikasinya dalam sediaan tablet

POLLO, Frama El Lefiyana, Prof. Dr. Sudibyo Martono, MS., Apt

2009 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Klopidogrel adalah suatu agen antiplatelet oral yang poten yang sering digunakan dalam terapi penyakit jantung koroner, penyakit pembuluh darah perifer, dan penyakit pembuluh darah otak. Klopidogrel yang aktif sebagai agen antiplatelet adalah klopidogrel konfigurasi S pada posisi atom C7, sedangkan klopidogrel konfigurasi R merupakan kontaminan. Senyawa ini merupakan suatu prodrug inaktif dan mengalami biotransformasi di hati menjadi metabolit aktif, asam karboksilat. Metode analisis untuk menetapkan kadar klopidogrel dalam tablet secara kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) menggunakan kolom C18 dan detektor UV yang umum dimiliki oleh laboratorium-laboratorium analisis di Indonesia belum tersedia. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan metode penetapan kadar klopidogrel secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi menggunakan kolom C18 dan dideteksi menggunakan detektor UV yang memenuhi parameter validasi meliputi ketepatan, ketelitian, selektivitas, batas deteksi, batas kuantitasi, dan linearitas untuk diaplikasikan dalam sediaan tablet. Pemisahan klopidogrel dilakukan secara KCKT dengan fase diam kolom Shim-Pack VP-ODS (panjang 150 mm, diameter internal 4,6 mm, dan ukuran partikel 5 μm), fase gerak campuran metanol : 0,1 % trietilamin (80 : 20, v/v, pH 5,3), kecepatan alir 0,6 mL/menit, dan dideteksi menggunakan detektor UV pada λ 220 nm. Puncak yang terbentuk merupakan puncak klopidogrel gabungan antara konfigurasi S dan konfigurasi R. Metode ini divalidasi terhadap parameter-parameter selektivitas, keterulangan, linearitas, batas deteksi, batas kuantitasi, dan ketepatan dan diperoleh hasil memenuhi persyaratan validasi. Aplikasi metode KCKT setelah tervalidasi tersebut pada penetapan kadar klopidogrel dalam tablet menghasilkan rekoveri pada konsentrasi 80 %, 100 %, dan 120 % berturut-turut adalah antara 98,71 – 101,52 % dengan RSD = 1,58 %; 99,92 – 100,60 % dengan RSD = 0,36 %; dan 99,76 – 99,90 % dengan RSD = 0,07 %, jika dihitung berdasarkan data luas area.

Clopidogrel is a potent oral antiplatelet agent often used in the treatment of coronary artery disease, peripheral vascular disease, and cerebrovascular disease. Clopidogrel has an absolute S configuration at carbon 7, while R configuration is contaminant. This compound is an inactive prodrug and is converted by the liver to the active metabolit, carboxylic acid. There is not any available methos for determining clopidogrel in tablets based on HPLC with C18 column and UV detector that usually used in laboratories of analysis in Indonesia. This research is aimed to get a new HPLC method with C18 column and UV detector for the determination of clopidogrel meeting validation parameters such as accuracy, precision, selectivity, limit of detection, limit of quantitation, and linearity to apply to tablet formulation. The product is separated by HPLC using Shim-Pack VP-ODS column (150 x 4.6 mm id, 5 micron) as stationary phase, methanol : 0.1 % triethylamine (80 : 20, v/v, pH 5.3) as mobile phase, at a flow rate of 0.6 mL/minute, and the detection at 220 nm. The result is shown by the clopidogrel peak that consist of S configuration and R configuration. The proposed method is validated for selectivity, precision, linearity, limit of detection, limit of quantitation, and accuracy, and complied with the requirements of validity. The method has been successfully applied to the determination of chlopidogrel in tablets with recovery at concentration of 80 %, 100 %, dan 120 % is 98.71 – 101.52 % (RSD is 1.58 %); 99.92 – 100.60 % (RSD is 0.36 %); and 99.76 – 99.90 % (RSD is 0.07 %), respectively, based on data of area under the curve.

Kata Kunci : Klopidogrel,KCKT,Kolom C 18,Detektor UV,Clopidogrel,HPLC,C18 column, UV detector