Identifikasi golongan senyawa anti kanker leher rahim in vitro tiga varietas buah merah (Pandanus conoideus Lamk.)

ROYYANI, Miftakh, Prof. Dr. Sukarti Moeljopawiro, M.App.Sc

2008 | Tesis | S2 Biologi

Buah merah (Pandanus conoideus Lamk.) telah digunakan secara tradisional oleh masyarakat untuk pengobatan kanker, namun bukti ilmiah masih terbatas. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui varietas, jenis ekstrak, dan jenis fraksi buah merah yang mempunyai efek sitotoksik paling tinggi terhadap sel kanker leher rahim (HeLa), serta mengidentifikasi golongan senyawa bioaktif yang mempunyai efek sitotoksik. Buah merah varietas kuning (Yanggiru), merah panjang (Maler), dan merah segitiga (Barugum) dari Sentani (Papua) diekstraksi berjenjang dengan kloroform, metanol dan air menghasilkan 9 macam ekstrak. Uji sitotoksisitas dengan metode MTT Assay menunjukkan bahwa ekstrak metanol Barugum mempunyai efek sitotoksik paling tinggi terhadap sel line HeLa (IC-50, 153,083 μg/ml), diikuti dengan ekstrak kloroform Maler dengan IC-50, 205,220 μg/ml. Dua ekstrak toksik difraksinasi dengan Vacuum Liquid Chromatographi. Uji sitotoksisitas fraksi menunjukkan bahwa dua macam fraksi gabungan dapat membunuh 100% sel HeLa pada konsentrasi 300 μg/ml. Isolasi senyawa bioaktif dari fraksi toksik tersebut dilakukan dengan KLT Preparatif menghasilkan enam isolat. Hasil uji sitotoksik isolat menunjukkan bahwa isolat tengah dari fraksi kloroform 100% ekstrak kloroform Maler mempunyai efek sitotoksik paling tinggi terhadap sel HeLa dengan IC-50, 48,782 μg/ml. Nilai tersebut lebih rendah dari IC-50 obat kanker Doxorubicin yang mempunyai IC-50 sebesar 61, 016 μg/ml. Profil KLT-kromatogram dengan penempak bercak spesifik menunjukkan bahwa senyawa bioaktif utama yang terkandung dalam isolat toksik adalah golongan triterpenoid saponin dan terpenoid lain. Dengan ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak yang paling toksik adalah ekstrak kloroform varitas Maler, dan golongan senyawa yang mempunyai efek sitotoksik terhadap sel kanker leher rahim (HeLa) adalah triterpenoid saponin dan terpenoid lainnya.

Red fruit (Pandanus conoideus Lamk.) has been used widely to treat cancer, but scientific evidence is limited. The objectives of this research was to determine variety, extract, and fraction of three red fruits variety that have the highest cytotoxicity on cell line of cervical cancer (HeLa), and to identify bioactive compound that responsible to cytotoxic effect. Three variety of red fruits (Yanggiru, Maler and Barugum) were collected from Sentani (Papua) and each was extracted gradually using chloroform, methanol and water to give nine extracts. Cytotoxicity test was done by MTT Assay showed that methanol extract of Barugum had the highest citotoxicity on HeLa cell Line (IC- 50, 153,083 μg/ml), followed by chloroform extract of Maler (IC-50, 205,220 μg/ml). Two cytotoxic extracts were fractionated by Vacuum Liquid Chromatography. Cytotoxicity test of these fractions showed that two fractions had killed 100% cell line HeLa by 300 μg/ml. Bioactive compound from active fractions were isolated by Preparative TLC gave 6 isolate. Cytotoxicity test results showed that the best isolate was middle isolate from chloroform 100% fraction of chloroform extract of Maler that had IC-50 48,782 μg/ml on HeLa cell line. These IC-50 value was lower than standard clinical medicine (Doxorubicin) that have IC-50 61,016 μg/ml. The TLC chromatogram profile with specific spray reagents showed that bioactiv in toxic isolate were triterpenoid saponin and the other terpenoid compounds. It can be concluded that chloroform extract of Maler variety was the highest citotoxicity on HeLa cell line, caused by triterpenoid saponin and the other terpenoid compounds.

Kata Kunci : Buah merah,Senyawa bioaktif,Kanker,Sitotoksik,MTT Assay, Red fruit, bioactive compound , cancer, cytotoxic, MTT Assay