Deteksi Mutasi Gen katG Arg363Leu pada Isolat Mycobacterium tuberculosis Yogyakarta dan Jawa Tengah

NURLAINI, Prof. drh. Widya Asmara, SU, Ph.D

2008 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Tropis

Tuberculosis (TB) merupakan penyakit yang masih menjadi masalah kesehatan masyarakat di dunia, termasuk Indonesia. Salah satu mekanisme resistensi bakteri M. tuberculosis terhadap INH adalah adanya mutasi pada gen katG. Mutasi pada gen katG berupa delesi atau mutasi titik pada kodon 463. yang menyebabkan terjadinya mutasi gen yang mengkode protein sasaran obat anti tuberkulosis. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendeteksi mutasi gen katG Arg463leu pada isolat M. tuberculosis di Yogyakarta dan Jawa Tengah periode Agustus-Desember 2007 dan mengetahui ada tidaknya mutasi gen katG kodon 463 pada isolat M. tuberculosis. Penelitian ini dilakukan terhadap 60 sampel isolat M. tuberculosis yang resisten dan sensitif berasal dari Yogyakarta dan Jawa Tengah. DNA bakteri diisolasi dari isolat M. tuberculosis dan diamplifikasi menggunakan primer spesifik. Produk PCR dipotong dan dielektroforesis mengunakan agarose 2%. Hasil penelitian yang mengindikasikan mutasi arg menjadi leu pada kodon 463 gen katG M. tuberculosis ditemukan sebesar 64% dari keseluruhan isolat M. tuberculosis resisten INH. Hasil fragmen gen katG dari semua sampel dapat teramplifikasi dengan tehnik PCR dan menghasilkan pita yang sama berukuran 378 bp. Pemotongan dengan enzim MspI menunjukkan bahwa 13 (59,9%) dari 22 isolat M. tuberculosis dari Yogyakarta dan 14 (70%) dari 20 isolat dari Jawa Tengah menghasilkan pita DNA yang memberi indikasi adanya mutasi Arg463leu pada gen katG. Tidak ditemukan mutasi arg menjadi leu pada kodon 463 gen katG pada isolat M. Tuberculosis yang sensitif terhadap INH.

Tuberculosis (TB) has been a problem of public health importance in world, including Indonesia. One of the mechanisms of resistance M. tuberculosis to INH is caused by mutation at katG gene. Mutation at katG gene could be a deletion or point mutation at codon 463. The aim of the study is to detect mutation katG of Arg 463 Leu in M. tuberculosis isolates in Yogyakarta and Central Java. Sixty INH resistant and INH sensitive of M. tuberculosis were used in this exsperiment. Bacterial DNA was isolated from M. tuberculosis isolates and amplified using specific primers. PCR products were digested with enzyme MspI and elektrophorized in 2% of agarose. Results showed that all DNA samples can be amplified by PCR, resulting in bands with the size of 378 bp. Restriction analysis by MspI to 13 (59,9%) of 22 isolats from Yogyakatra and 14 (70%) of 20 isolates from Central Java showed DNA bands indicating the mutation of Arg463Leu at gene katG. None of the INH-sensitive isolates showed mutation in Arg 463 Leu of katG

Kata Kunci : Mycobacterium tuberculosis,INH resisten,Gen katG Arg 463 Leu, Mycobacterium tuberculosis, , INH resistant, gene katG Arg 463 Leu.