Laporkan Masalah

Isolasi dan identifikasi senyawa bioaktif ekstrak akar bambu ori (Bambusa arundinacea Retz. Willd.) dan akar bambu kuning (Bambusa vulgaris Schrad. Ex Wendl)

HARLIANTORO, Dr. C.J. Soegihardjo, Apt

2007 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Penggunaan tumbuhan obat semakin diminati oleh segala lapisan masyarakat. Salah satu simplisia tumbuhan obat tradisional yang sudah terbukti secara in vivo menghambat proliferasi sel karsinoma ascite Ehrlich pada mencit adalah akar bambu ori (Bambusa arundinacea). Spesies kerabatnya, bambu kuning (Bambusa vulgaris) juga dilaporkan mempunyai efek antitumor. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan bioaktivitas ekstrak akar dari B. arundinacea Retz. Willd dan B. vulgaris Schrad. Ex Wendl., serta mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa bioaktif dengan metode bioassay guided fractionation menggunakan Brine Shrimp Lethality Test (BST) sebagai selektor penapisan. Serbuk kering akar (300 g) dimaserasi berturut-turut dengan wash benzene, etanol 80 %, dan terakhir dilakukan infundasi sehingga diperoleh infusa. Uji BST masing-masing ekstrak (10 μg/ml) memberikan hasil dari yang paling aktif : ekstrak etanolik B. vulgaris (kematian larva udang 84 %), ekstrak etanolik B. arundinacea (kematian 46 %), ekstrak wash benzene B. arundinacea (44 %), ekstrak wash benzene B. vulgaris (32 %), infusa B. arundinacea (18 %), dan infusa B. vulgaris (16 %). Pada pengujian antimikroba (100 μg/μl) diperoleh hasil hanya ekstrak wash benzene dan infusa B. arundinacea dan ekstrak wash benzene B. vulgaris menunjukkan aktivitas yang lemah terhadap S. aureus, sedangkan terhadap Escherichia coli dan Candida albicans semua ekstrak tidak menunjukkan aktivitas sama sekali. Sepuluh gram ekstrak etanolik B. vulgaris larut air dipartisi berturut-turut dengan kloroform dan etilasetat menghasilkan fraksi kloroform (1,72 g; BST 10 μg/ml = 82 % kematian larva) yang lebih aktif daripada fraksi etilasetat (1,11 g; BST 10 μg/ml = 56 %) dan fraksi air (7,256 g; BST 10 μg/ml = 32 %). Fraksi kloroform kemudian difraksinasi dengan kromatografi cair hampa dengan komposisi eluen nheksana: etilasetat yang meningkat kepolarannya dan diakhiri dengan metanol:kloroform (1:1) menghasilkan 6 fraksi gabungan (I-VI). Fraksi VI merupakan fraksi yang paling aktif (BST 100 μg/ml = 96 % kematian larva), namun untuk fraksinasi lanjut pilihan jatuh pada fraksi IV sebagai fraksi teraktif ke-2 (BST 100 μg/ml = 90 % kematian larva) karena fraksi ini mengandung senyawa utama. Fraksi IV (130 mg) dipisahkan dengan KLT preparatif menghasilkan kristal putih 40 mg dengan titik lebur 111-120 ºC. Isolat tersebut memberikan LC50 terhadap larva udang sebesar 11,95 μg/ml. Analisa Kromatografi Gas-Spektrometri Massa (KG-SM) terhadap kristal menghasilkan 3 puncak (Rt=9.125; 9.342, dan 9.800 menit). Puncak dengan Rt 9.125 dan 9.342 mempunyai M . masing-masing 516 dan 413 belum berhasil diidentifikasi. Puncak dengan Rt 9.800 dan M . =414 diidentifikasi sebagai stigmast-5-en-3-ol atau ß-sitosterol berdasarkan perbandingan dengan data spektra massa referensi (NIST12.LIB; NIST62.LIB dan WILEY229.LIB).

The use of medicinal herbs is getting more attention. A part of the plant which has used for cancer remedy based on medical folkloric is Bambusa arundinacea root. Extract of B. arundinacea root had been proved in vivo capable of inhibiting proliferation of carcinoma ascite Ehrlich cells in mice. Its relative species, Bambusa vulgaris, also had showed antitumour activity. This study was aimed to compare bioactivity of root extracts from B. arundinacea Retz. Willd and B. vulgaris Schrad. Ex Wendl., followed by isolation and identification of their bioactive substances. Isolation for bioactive substances was done by Bioassay guided fractionation method with Brine Shrimp Lethality Test (BST) as a selector. Dried root powder (300 g) was macerated consecutively by wash benzene and ethanol 80 %, and finally, infusa was made. BST of each extract (10 μg/ml) gives result as follow from the most active : B. vulgaris ethanolic extract (84 % of brine shrimp larvae death), B. arundinacea ethanolic extract (46 %), B. arundinacea wash benzene extract (44 %), B. vulgaris wash benzene extract (32 %), B. arundinacea infusa (18 %), and B. vulgaris infusa (16 %). Antimicrobial test on extracts showed only weak activity of wash benzene extract and infusa of B. arundinacea and wash benzene extract of B. vulgaris towards Staphylococcus aureus, but no activities was recorded towards Escherichia coli and Candida albicans. Ten grams of B. vulgaris ethanolic extract was then resolved in water, and partitioned consecutively with chloroform and ethylacetate to give chloroform fraction (1,72 g; BST 10 μg/ml = 82 % of larvae death) which more active than ethylacetate fraction (1,11 g: BST 10 μg/ml = 56 %), and water soluble fraction (7,256 g: BST 10 μg/ml = 32 %). Chloroform fraction was then fractioned by vacuum liquid chromatography with n-hexane-ethylacetate as the mobile phase with increased polarity and chloroform-methanol (1:1) at the end, yielded 6 combined fraction (IVI). Fraction VI was the most active (BST 100 μg/ml = 96 % of larvae death), but for further purification the choice felt on fraction IV as the 2nd active fraction (BST 100 μg/ml = 90 % of larvae death) because there is a major compound found. Fraction IV (130 mg) was then further separated with preparative TLC yielded 40 miligrams of white crystal as major compound with melting point 111-120 ºC. This compound gives LC50 = 11,95 μg/ml to brine shrimp larvae. GC-MS analyze of crystal gives three peaks (Rt = 9.125; 9.342, and 9.800 minutes). Peaks with Rt 9.125, and 9.342 had M . 516 and 413, respectively, they had not identified yet. Peak with Rt 9.800 and M . 414 was identified as stigmast-5-en-3- ol or ß-sitosterol according to comparative data of mass spectra references (NIST12.LIB; NIST62.LIB and WILEY229.LIB).

Kata Kunci : Ekstrak Bambu Ori dan Bambu uning,Senyawa Bioaktif Test BST, Bambusa arundinacea Retz. Willd, Bambusa vulgaris Schrad. Ex Wendl., Brine Shrimp Lethality Test (BST), stigmast-5-en-3-ol or ß-sitosterol


    Tidak tersedia file untuk ditampilkan ke publik.