Aktivitas antiplasmodium ekstrak daun sungkai (Peronema canescens Jack) :: Kajian aktivitas antiplasmodium in vitro dan in vivo, aktivitas penghambatan polimerisasi hem dan aktivitas sitotoksik terhadap sel vero

SUWANDI, Jhons Fatriyadi, dr. Mahardhika Agus Wijayanti, M.Kes

2007 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Dasar dan Biomedis

Latar Belakang : Daun P. canescens telah dipakai secara empirik oleh masyarakat SUMBAGSEL untuk mengobati malaria. Ekstrak etanol daun P. canescens telah dibuktikan efeknya pada P. berghei namun bagaimana aktivitasnya pada P. falciparum secara in vitro dan bagaimana mekanisme aksinya sebagai antiplasmodium, belum pernah diteliti lebih jauh, sehingga perlu untuk dikaji untuk melihat aktivitas tersebut. Tujuan : Untuk mengkaji aktivitas ekstrak aseton, etanol dan air daun P. canescens terhadap P. falciparum secara in vitro dan in vivo, aktivitas penghambatan polimerisasi hem dan aktivitas sitotoksik pada sel vero. Cara : Aktivitas antiplasmodium ekstrak aseton, etanol dan air daun P. canescens diuji dengan cara menginkubasikan P. falciparum strain FCR3 dan D10 dalam bahan uji dengan berbagai konsentrasi selama 24 dan 72 jam. Parasitemia dihitung dari apus darah tipis yang dicat Giemsa. Uji aktivitas antiplasmodium in vivo dilakukan dengan metode 4 days supressive test pada mencit Swiss yang diinfeksi P. berghei. Parasitemia dihitung dari apus darah tipis yang dicat Giemsa. Uji penghambatan polimerisasi hem dilakukan dengan menginkubasi hematin dalam bahan uji pada berbagai konsentrasi selama 24 jam. Absorbansi diukur dengan Elisa Reader pada panjang gelombang 405 nm. Aktivitas sitotoksik dilakukan dengan metode MTT. Jumlah sel yang hidup ditentukan dengan mengukur absorbansi pada Elisa Reader dengan panjang gelombang 595 nm. Nilai IC50 dan ED50 ditetapkan dengan analisis probit. Hasil : Ekstrak aseton, etanol dan air daun P. canescens memiliki aktivitas antiplasmodium in vitro dengan nilai IC50 berturut-turut sebesar 26,33 + 1,65 μg/mL; 37,96 + 8,17 μg/mL; 12,26 + 1,05 μg/mL untuk strain D10 dan 51,14 + 8,65 μg/mL; 70,22 + 14,13 μg/mL; 34,85 + 6,04 μg/mL untuk strain FCR3, secara in vivo nilai ED50 385,73 mg/kgBB; 102,88 mg/kgBB dan 87,79 mg/kgBB. Ekstrak aseton, etanol dan air memiliki penghambatan polimerisasi hem dengan nilai IC50 0,40 + 0,17 mg/mL; 1,46 + 0,05 mg/mL; 53,89 + 29,47 mg/mL. Ekstrak aseton, etanol dan air memiliki aktivitas sitotoksik dengan nilai IC50 23,37 + 5,63 μg/mL; 629,46 + 24,85 μg/mL dan 634,00 + 144,82 μg/mL. Kesimpulan : Ekstrak air daun P. canescens memiliki aktivitas antiplasmodium terbaik secara in vitro dan in vivo, ekstrak aseton memiliki penghambatan polimerisasi hem terbaik, ekstrak etanol dan air memiliki aktivitas sitotoksik rendah.

Background : Sungkai (P. canescens) leaves is being empirically used to treat malaria in south sumatra region. Ethanol extract of P. canescens leaves has been proven effective to infection againts P. berghei in vivo. However, in vitro and in vivo antiplasmodial activity, the mechanism of action of P. canescens leaves extracts and cytotoxic effects had not been known. Therefore, it is necessary to study the effectiveness of the extracts. Objectives : To study the in vitro and in vivo antiplasmodial activity of acetone, ethanol and aqueous extracts of P. canescens leaves, their haem polymerization inhibition activity and their cytotoxic effects in vero cells. Methods : Antiplasmodial activity of the acetone, ethanol and aqueous extract of P. canescens leaves in various concentration was tested againts P. falciparum D10 and FCR3 strains at 24 and 72 hours incubation period in vitro. Parasitemia was counted from Giemsa stained thin blood smear under microscopy. In vivo antiplasmodial activity was done with 4 days supressive test methode on Swiss mice infected P. berghei. Parasitemia was counted from Giemsa stained thin blood smear under microscopy. Haem polymerization inhibition activity was done by reacting haematin with extracts in various concentration at 24 hours incubation period. Glacial acetic acid was added for began polumerization. Polymerized haematin were determined by measuring its absorbance at 405 nm in Elisa Reader. Cytotoxic effects in vero cells was carried out with MTT methods. The viability cells were determined by measuring its absorbance at 595 nm in Elisa Reader. IC50 and ED50 values was determined by probit analysis. Results : The acetone, ethanol and aqueous extracts of P. canescens leaves exhibited antiplasmodial activity on P. falciparum D10 strain with the IC50 values of 26,33 + 1,65 μg/mL; 37,96 + 8,17 μg/mL; 12,26 + 1,05 μg/mL respectively, and in P. falciparum FCR3 strain with IC50 values of 51,14 + 8,65 μg/mL; 70,22 + 14,13 μg/mL; 34,85 + 6,04 μg/mL respectively. In vivo antiplasmodial activity was shown as ED50 values of 385,73 mg/bw/day; 102,88 mg/bw/day dan 87,79 mg/bw/day respectively. Haem polymerization inhibition activity was shown as IC50 values of 0,40 + 0,17 mg/mL; 1,46 + 0,05 mg/mL; 53,89 + 29,47 mg/mL respectively. Cytotoxic effects was shown as IC50 values of 23,37 + 5,63 μg/mL; 629,46 + 24,85 μg/mL; 634,00 + 144,82 μg/mL respectively. Conclusion : The aqueous extracts of P. canescens leaves had the highest in vitro and in vivo antiplasmodial activity; acetone extract had the highest haem polymerization inhibition activity; ethanol and aqueous extracts had low cytotoxic effects.

Kata Kunci : Infeksi Malaria,Penatalaksanaan,Ekstrak Daun Sungkai, Peronema canescens, Plasmodium falciparum, Plasmodium berghei, antiplasmodial activity, haem polymerization, cytotoxic, in vitro, in vivo