Skrining senyawa sitotoksik dari tumbuhan asal Taman Nasional Gunung Merapi Yogyakarta :: Kajian terhadap Eupatorium riparium Reg. (#04-KU-01-06)

FAKHRUDIN, Nanang, Dr. Subagus Wahyuono, M.Sc.,Apt

2006 | Tesis | S2 Ilmu Farmasi

Ada sekitar 500.000 spesies tumbuhan yang hidup di bumi. Akan tetapi, masih banyak tumbuhan tersebut yang belum dieksplorasi potensinya dan belum dimanfaatkan dalam bidang kesehatan. Disamping itu, lebih dari 25 % obat yang ada sekarang berasal dari tumbuhan. Oleh karena itulah eksplorasi potensi tumbuhan yang tumbuh di Indonesia perlu dilakukan untuk mencari senyawa bioaktif yang bermanfaat bagi pengobatan. Skrining terhadap ekstrak kloroform dan metanol dari 30 tumbuhan dari Taman Nasional Gunung Merapi Yogyakarta dengan metode BST (Brine Shrimp Lethality Test), menunjukkan bahwa ekstrak kloroform dari E. riparium (BST 500 μg/ml: 90%) berpotensi untuk diteliti lebih lanjut. Penelitian ini bertujuan mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa bioaktif dari E. riparium dan mengevaluasi aktivitas sitotoksiknya terhadap sel HeLa and Vero. Isolasi senyawa bioaktif dari E. riparium dilakukan dengan metode Bioassay Guided Fractionation menggunakan BST. Serbuk kering daun dan batang E. riparium (900 gram) diekstraksi dengan wasbensin. Ekstrak wasbensin yang diperoleh dipartisi dengan metanol menghasilkan sari larut metanol yang lebih aktif (BST 50 μg/ml: 82%) dibandingkan sari yang tidak larut metanol (BST 50 μg/ml: 42%). Sari larut metanol kemudian dipisahkan dengan kromatografi cair vakum dengan eluen wasbensin : etil asetat dengan beberapa perbandingan dan kloroform : metanol (1:1) menghasilkan 7 fraksi gabungan (I-VII). Fraksi II, III dan IV merupakan fraksi yang aktif dan diperkirakan mempunyai senyawa mayor yang sama. Senyawa mayor yang ada di dalam ketiga fraksi diisolasi dan dimurnikan dengan KLT preparatif. Berdasarkan data spektrum (IR, UV, massa, 1H- dan 13C-NMR), isolat aktif teridentifikasi sebagai metilripariokromen A yang mempunyai LC50 2,24 x 10-5 M (BST), 2,23 x 10-4 M (HeLa) dan 3,09 x 10-4 M (Vero).

There are about 500.000 species of plants growing on the earth. However, large majority of those plants have not been evaluated for their full potential. It was estimated that the number of species explored so far represent only about 3 % of the total flora. Besides that, more than 25% existing drugs today are derived from plant. Therefore, exploration of the potential of local plants is necessary to be done to search new bioactive compounds for treating diseases. Preliminary screening using BST (Brine Shrimp Lethality Test) on chloroform and methanol extracts of 30 plants collected from Merapi Mountain National Park, Yogyakarta exhibited that the chloroform extract of Eupatorium riparium Reg. (BST 500 μg/ml: 90%) is potential to be further studied. The objectives of this research are to isolate and identify the bioactive compound of E. riparium and to evaluate its cytotoxic activity against HeLa and Vero. The isolation of bioactive compound of E. riparium is conducted by Bioassay Guided Fractionation method using BST. The ground dried leaves and bark (900 gram) were extracted with wasbensin. The active wasbensin extract was then partitioned with methanol. The methanol-soluble extract is more active (BST 50 μg/ml: 82%) than the methanol-insoluble extract (BST 50 μg/ml: 42%). The methanol-soluble extract was subjected to vacuum liquid chromatography (VLC) eluted with wasbensin containing increasing amount of ethyl acetate and finally chloroform-methanol (1:1) yielded 7 combined fractions (I-VII). Fractions II, III, and IV are active and suspected to contain same major compound. These three fractions were then combined and the major compound was isolated and purified by preparative TLC. Based on its spectral data (IR, UV, 1H- and 13C-NMR, and mass spectrum), the active isolat is identified as metilripariokromen with the LC50 2,24 x 10-5 M (BST), 2,23 x 10-4 M (HeLa) and 3,09 x 10-4 M (Vero).

Kata Kunci : Eupatorium riparium,Sitotoksisitas, Eupatorium riparium Reg., metilripariokromen A, cytotoxicity