Ekspresi dan aktivitas Gelatinase, Tissue Inhibitors of Metalloproteinases (TIMP-1 dan TIMP-2) pada luka pencabutan gigi setelah Augmentasi Demineralized Bone Matrix :: Kajian in vivo pada kelinci

TANDELILIN, Regina TC, Promotor Prof.dr. Abdul Salam M. Sofro, Ph.D.Sp.KT

2006 | Disertasi | S3 Ilmu Kedokteran Gigi

Kerusakan tulang akibat pencabutan gigi merupakan kasus terbanyak yang terjadi dalam bidang bedah mulut. Demineralized bone matrix (DBM) bentuk bubuk dibutuhkan untuk mengisi tulang alveolus guna mencegah kerusakan jaringan lebih lanjut akibat pencabutan gigi. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui ekspresi, aktivitas gelatinase, TIMP-1, TIMP-2, kepadatan serat kolagen gingiva, kepadatan serat kolagen dan osteoblast tulang alveolus pada proses penyembuhan luka pencabutan gigi sesudah augmentasi DBM. Tigapuluh enam ekor kelinci jantan dengan berat 900 -1.100 g, berumur 2,5-3 bulan secara acak dibagi dalam 2 kelompok yaitu kontrol dan perlakuan. Pada kelompok perlakuan, dicabut gigi insisivus rahang bawah dan segera langsung diugmentasi dengan serbuk DBM. Kemudian gingiva dijahit dengan benang non-absorbable Nomer 0-5. Perlakuan yang sama diberikan pada kelompok kontrol tanpa augmentasi DBM. Kemudian kelinci dimatikan pada hari ke 1, 3, 5, 7, 10 dan 14 pasca operasi dan masing-masing kelompok diwakili 3 ekor kelinci. Alveolus pada mandibula dipotong selebar gigi insisivus kemudian difiksasi dan dekalsifikasi dalam larutan Lylis. Pembuatan spesimen pengamatan pada tulang hanya hari ke 5, 7, 10 dan 14. Selanjutnya proses pengecatan Mallory untuk mengetahui kepadatan serat kolagen dan HE untuk pengamatan kepadatan sel osteoblast. Gingiva pada daerah perlukaan spesimen, selebar kurang lebih 5 cm diambil dan dibagi menjadi 2 bagian. Satu bagian diproses untuk mengetahui rasio konsentrasi gelatinase, TIMP-1 dan TIMP-2 dengan ELISA. Sisanya segera difiksasi dalam larutan paraformaldehid 10%, dilanjutkan pembuatan preparat imunohistokimia guna pengamatan ekspresi keempat protein tersebut dan pengecatan Van Gieson untuk melihat kepadatan serat kolagen. Hasil menunjukkan pada kelompok DBM, aktivitas TIMP-2 pada hari ke 3 (19.49 ng/ml), hari ke 5 (72.80 ng/mL) dan hari ke 14 (92.24 ng/mL), serta TIMP-1 pada hari ke 7 (3.46 ng/mL) secara bermakna meningkat. Ekspresi gelatinase berkurang secara bermakna dan ekspresi TIMP-1 dan TIMP-2 bermakna meningkat dibandingkan kontrol. Kepadatan serat kolagen gingiva secara bermakna lebih padat pada kelompok DBM. Serat kolagen tulang lebih padat pada kelompok DBM pada hari ke 10 dan 14, sedangkan osteoblast menunjukkan padat secara bermakna pada semua hari pengamatan. Kesimpulan hasil penelitian menunjukkan serbuk DBM dapat mengurangi ekspresi dan aktivitas gelatinase dan meningkatkan ekspresi dan aktivitas TIMP-1 dan TIMP-2. DBM meningkatkan biosintesis kolagen pada gingiva dan tulang alveolus, serta meningkatkan pertumbuhan tulang secara osteokunduktif. DBM mempercepat proses penyembuhan

Bone defect as a result of teeth extraction dominates the cases in oral surgery. The powder of Demineralized bone matrix (DBM) is needed to fill alveolus bone for preventing the defect of tissues after extracting the tooth. The objectives were to determine the expressions and activities of gelatinase, TIMP-1, TIMP-2 and the density of gingiva collagen, bone collagen and osteoblast during wound healing after augmentation of DBM. Thirty six male rabbits (aged 2.5-3 months; 900-1,100 g/male) were randomly divided into control and treated groups. Mandible incisivus tooth of the treated rabbits were extracted and augmented with the allograft DBM powder. The gingiva was sutured with the number 0-5 of non-absorbable suture. The same procedures were employed to the control rabbits group, except no augmentation of DBM powder. The rabbits were sacrified and carried out on day 1, 3, 5, 7, 10, and 14 after operation, and each of group had three sub samples. The mandible was cut with the width similar to the width of insisivus tooth followed by fixation and decalcification in Lylis solution and were made only for the 5, 7, 10, and 14 days observations. The Mallory and HE staining were performed to measure the density of collagen respectively. The gingiva (ca. 5 cm) was split into two parts: one part was used to measure the ratio between the concentrations of gelatinas, TIMP-1 and TIMP-2 using ELISA technique; the other part was fixed immediately in 10% paraformaldehyde for immunohistochemistry speciments for determine the expression of proteins and Van Gieson staining for measuring the density of collagen. In the treated rabbits, the activity of TIMP-2 on day 3 (19.49 ng/ml), day 5 (72.80 ng/mL) and day 14 (92.24 ng/mL), and TIMP-1 on day 7 (3.46 ng/mL) increased significantly, expression of gelatinase reduced, and the expression of TIMP-1 and TIMP-2 significantly higher than those in the control rabbits. The density of collagen in the gingiva was significantly higher in the treated rabbits than in the control. High density of collagen in the bone of treated rabbits was observed only on day 10 and 14. The density of osteoblast in the treated rabbits was found to be significantly higher than that in the control. It was concluded that the allograft powder of DBM reduces the expression of gelatinase and increase the expression of TIMP-1 and TIMP-2. DBM increased the activity of TIMP-1 and TIMP-2, reduced the expression and activity gelatinase and increased the biosynthesis of collagen in gingiva and bone and growth of the bone osteoconductively. All these effects accelerate wound healing process

Kata Kunci : Pencabutan Gigi,DBM,TIMP,1 dan TIMP,2