Identifikasi Senyawa Toksik terhadap Artemia salina dari Ekstrak Spons Haliclona caerulea asal Perairan Pulau Menjangan Kecil, Karimunjawa

Putriandita Noor Hafidah, Respati Tri Swasono, S.Si., M.Phil., Ph.D.; Dr. Deni Pranowo, S.Si., M.Si.

2026 | Skripsi | KIMIA

Identifikasi dan penambatan molekular senyawa potensial antikanker dari ekstrak etil asetat spons Haliclona caerulea asal Perairan Pulau Menjangan Kecil, Karimunjawa telah dilakukan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui toksisitas ekstrak atau fraksi kolom kromatografi spons Haliclona caerulea terhadap Artemia salina dari Perairan Pulau Menjangan Kecil dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Selain itu, penelitian juga bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa sitotoksik dari ekstrak etil asetat atau fraksi kolom kromatografi spons Haliclona caerulea. Ekstrak spons Haliclona caerulea dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut metanol dan diklorometana, setelahnya ekstrak diklorometana dipartisi dengan etil asetat dan akuades. Hasil dari ekstrak etil asetat diuji dengan metode BSLT, kemudian ekstrak dipisahkan dengan kromatografi kolom dan setelahnya fraksi kromatografi kolom diuji juga dengan metode BSLT. Fraksi yang paling toksik berdasarkan pengujian metode BSLT diidentifikasi senyawanya dengan Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry (LC-HRMS). Senyawa hasil identifikasi dianalisis interaksinya dengan protein target CDK6 dengan penambatan molekular.

Hasil dari isolasi mendapatkan ekstrak etil asetat berwarna cokelat kehitaman, berbentuk seperti pasta dengan berat sebesar 102,4 mg. Uji toksisitas menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat spons Haliclona caerulea tergolong toksik terhadap larva Artemia salina dengan nilai Lethal Concentration 50 %(LC??) sebesar 97,247 ?g/mL. Pemisahan ekstrak menggunakan kromatografi kolom menghasilkan 11 fraksi gabungan dengan Fraksi 3 sebagai fraksi paling toksik. Berdasarkan analisis LC-HRMS dan penambatan molekular, diperoleh lima senyawa potensial dari Fraksi 3, yaitu (22E)-Kolesta-4,6,8(14),22-tetraen-3-on, Laingolide A, Conocenol D, Tanikolida, dan Pitolida B. Kelima senyawa tersebut menunjukkan interaksi dengan residu asam amino pada binding site CDK6. Laingolide A dipilih sebagai senyawa yang paling berpotensi untuk dikaji lebih lanjut berdasarkan nilai energi ikatan dan kesamaan pola interaksinya dengan palbociclib.

The identification and molecular characterisation of potential anti-cancer compounds from the ethyl acetate extract of the sponge Haliclona caerulea, sourced from the waters around Menjangan Kecil Island, Karimunjawa, have been carried out. This study aims to determine the toxicity of the extract or chromatographic fractions of the Haliclona caerulea sponge from the waters around Menjangan Kecil Island to Artemia salina using the Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Furthermore, the study also aimed to identify cytotoxic compounds from the ethyl acetate extract or chromatographic fractions of the Haliclona caerulea sponge. Extraction of the Haliclona caerulea sponge was carried out by maceration using methanol and dichloromethane as solvents; subsequently, the dichloromethane extract was partitioned with ethyl acetate and distilled water. The ethyl acetate extract was tested using the BSLT; the extract was then separated by column chromatography, and the resulting chromatographic fractions were also tested using the BSLT. The most toxic fraction, as determined by the BSLT, was identified using Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry (LC-HRMS). The interactions of the identified compounds with the target protein CDK6 were analysed using molecular docking.

The isolation yielded a blackish-brown, paste-like ethyl acetate extract weighing 102.4 mg. The toxicity test results showed that the ethyl acetate extract of the Haliclona caerulea sponge was toxic to Artemia salina larvae, with a 50 per cent lethal concentration (LC??) of 97.247 ?g/mL. Separation by column chromatography yielded 11 combined fractions, with Fraction 3 being the most toxic. Based on LC-HRMS analysis and molecular docking, five potential compounds were identified from Fraction 3, namely (22E)-Cholesta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one, Laingolide A, Conocenol D, Tanikolide and Pitholide B. All five compounds demonstrated interaction with amino acid residues at the CDK6 binding site. Laingolide A was selected as the most promising compound for further investigation based on its bond energy values and the similarity of its interaction patterns to those of palbociclib.

Kata Kunci : Haliclona caerulea, BSLT, LC-HRMS, molecular docking, CDK6