Pengaruh Ekstrak Etanol Propolis (EEP) terhadap Hepatotoksisitas dan Stres Oksidasi akibat pemberian 2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-P-Dioxin (TCDD) secara kronis pada Tikus Albino (Sprague Dawley)

SARAGIH, Hendry T.S, Prof.drh. Soesanto Mangkoewidjojo, M.Sc.,Ph.D

2005 | Tesis | S2 Sain Veteriner

Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh ekstrak etanol propolis terhadap hepatotoksisitas dan stres oksidasi akibat pemberian 2,3,7,8- tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) secara kronis pada tikus albino (Sprague Dawley). Tiga puluh lima ekor tikus strain Sprague Dawley, betina, umur 1 bulan dengan berat ± 100 gram digunakan sebagai hewan percobaan. Tikus dibagi dalam 7 kelompok, masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor. Kelompok 1 sebagai kontrol dan kelompok 2 diberi olive oil (minyak zaitun) dengan dosis 2 ml/kg bb/oral/hari selama 27 minggu dan kelompok 3 diberi TCDD 0,1 μg/kg bb/oral/hari yang dilarutkan dalam olive oil selama 27 minggu dan kelompok 4 diberi propolis 50 mg/kg bb/oral/hari (propolis 50) selama 27 minggu dan kelompok 5 diberi propolis I00 mg/kg bb/oral/hari (propolis 100) selama 27 minggu. Kelompok 6 diberi TCDD 0,1 μg/kg bb/oral/hari yang dilarutkan dalam olive oil dan diberi propolis 50 selama 27 minggu dan kelompok 7 diberi TCDD 0,1 μg/kg bb/oral/hari yang dilarutkan dalam olive oil dan diberi propolis I00 selama 27 minggu Berat badan tikus ditimbang setiap minggu sampai akhir penelitian. Pada minggu ke-27, semua tikus diambil darahnya untuk dilakukan analisis terhadap aktivitas enzim alanine aminotransferase (ALT), alkaline phospatase (ALP), γ- glutamyl Transferase (γ-GT) serta diukur thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Pada akhir penelitian (minggu ke-27), semua tikus dietanasi dengan menggunakan kloroform kemudian dinekropsi dan diambil sampel organ hati untuk dilakukan pemeriksaan histopatologik. Data aktivitas enzim dianalisis secara statistik dengan metode analisis varians (ANOVA) jenis One Way Anova, diikuti dengan Tukey-test dan LSD test. Gambaran histopatologik hati dianalisis secara deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan persentase peningkatan berat badan kelompok TCDD (123,3±31,4%) lebih rendah dibandingkan kelompok kontrol (170,9±17,6%). Aktivitas ALT mengalami peningkatan yang signifikan (p<0,05) pada kelompok TCDD, TCDD+propolis 50 dan TCDD+propolis 100 (93,6±28,3, 112,8±25,2 dan 113,4±35,6 U/L) dibandingkan kelompok kontrol dan olive oil (59,0±9,5 dan 51,2±12,6 U/L). Aktivitas enzim ALP pada tikus kelompok TCDD (17,0±2,9 U/L) mengalami peningkatan yang signifikan (p<0,05) terhadap kelompok kontrol (12,8±2,59 U/L). Konsentrasi TBARS kelompok olive oil, TCDD, propolis 50, propolis 100, TCDD+propolis 50 dan TCDD+propolis 100 (2,044±0,1, 2,244±0,1, 2,824±0,1, 3,592±0,1, 4,394±0,1 dan 4,642±0,1 U/L) mengalami peningkatan yang signifikan (p<0,05) dibandingkan dengan kelompok kontrol (1,848±0,1 U/L). Pemberian TCDD 0,1 μg/kg bb/oral pada kelompok TCDD selama 27 minggu menyebabkan vakuolisasi sel hati, keradangan, nekrosis dan tumor hati. Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa pemberian propolis dengan dosis 50 dan 100 mg/kg bb/hari dapat melindungi hepatotoksisitas tikus akibat TCDD. Propolis dengan dosis 50 dan 100 mg/kg bb/hari tidak mampu mengatasi stres oksidasi akibat pemberian TCDD dengan berdasarkan parameter konsentrasi TBARS. Propolis tidak bersifat toksik pada tikus dengan dosis 50 dan 100 mg/kg bb/hari selama 27 minggu.

This study was aimed to evaluate the effects of propolis ethanol extract (PEE) on hepatotoxicity and oxidative stress in albino rats (Sprague Dawley) chronicaly intoxicated with 2,3,7,8 tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD). A total of 35 female rats strain Sprague Dawley weighing approximately 100 grams of 1 month old were divided into 7 groups, of 5 rats each: Group 1 (normal control group) and group 2 received the vehicle olive oil (2ml/ kg b.w /oral/day) for 27 weeks and group 3 was given TCDD 0,1 μg / kg b.w /oral/day for 27 weeks; group 4 and 5 were administered propolis (50 and 100 mg/ kg b.w /oral/day respectively) for 27 weeks; group 6 and 7 were administered propolis (50 and 100 mg/ kg b.w /oral/day respectively) and TCDD (0,1 μg/ kg b.w /oral/day) for 27 weeks. Body weight rats measured each weeks until 27 weeks. After 27 weeks of treatment, the blood samples were collected from plexus retroorbitalis to analyzed alanine aminotransferase (ALT), alkaline phospatase (ALP), γ-glutamyl transferase (γ-GT) activities and to determine thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) concentration. At the end of the experiment all rats were euthanized, a complete necropsy was performanced. Tissue samples of liver were taken and fixed in 10% buffered formalin for histopatological examination. The results of the studies indicated that percentage of increasing body weight of group TCDD (123,3±31,4%) was lower compared to the control group (170,9±31,4%). The ALT Activities were significantly increased in groups TCDD, TCDD+propolis 50 and TCDD+propolis 100 ((93,6±28,3, 112,8±25,2 and 113,4±35,6 U/L) compared to the control and olive oil groups (59,0±9,5 and 51,2±12,6 U/L). The ALP Activities were significantly elevated in the TCDD treated group (17,0±2,9 U/L) compared to the control group (12,8±2,59 U/L). The lipid peroxidation (TBARS) concentrations were significantly increased in groups olive oil, TCDD, propolis 50, propolis 100, TCDD+propolis 50 and TCDD+propolis 100 (2,044±0,1, 2,244±0,1, 2,824±0,1, 3,592±0,1, 4,394±0,1 and 4,642±0,1 U/L) than control group (1,848±0,1 U/L). Group TCDD caused hepatocellular carcinomas, liver cells vacuolation, inflamation and focal necrotic changes of liver. The results generate a conclusion that propolis ethanol extract (PEE) at the doses of 50 and 100 mg/kg b.w./oral/day showed protective effect on 2,3,7,8 tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) induced hepatotoxicity. Propolis (PEE) at the doses of 50 and 100 mg/kg b.w./oral/day could not prevent oxidative damages caused by TCDD based on parameter TBARS concentration. Administration of propolis at the doses of 50 and 100 mg/kg b.w./oral/day in 27 weeks to the rats showed nontoxic.

Kata Kunci : Stress Oksidasi dan Hepatotoksisitas, EEP, TCDD, propolis, hepatotoxicity, oxidative stress.