Deteksi Mutasi F1534C pada Aedes albopictus Dewasa dengan Metode Direct PCR

Rachma Widya Pangesti, Prof. dr. Tri Baskoro Tunggul Satoto, MSc., Ph.D; dr. Alfin Harjuno Dwiputro, M.Sc

2026 | Skripsi | PENDIDIKAN DOKTER

Latar Belakang : Aedes albopictus merupakan salah satu vektor berbagai penyakit pada manusia. Pengendalian populasi Aedes albopictus menjadi tantangan tersendiri karena banyaknya laporan resistensi terhadap insektisida, khususnya golongan piretroid. Piretroid sendiri merupakan insektisida yang bekerja dengan mengganggu voltage-gated sodium channel (VGSC) pada sistem syaraf serangga. Salah satu jenis mutasi pada gen VGSC yang kerap ditemukan pada populasi nyamuk ini adalah mutasi F1534C. Saat ini, deteksi mutasi F1534C umumnya melibatkan pemeliharaan nyamuk, isolasi DNA, dan PCR. Penelitian ini menguji penggunaan metode direct PCR dengan sampel berupa serangga kering pada genomic filter paper tanpa adanya isolasi DNA. 

Tujuan : Penelitian ini menilai kemampuan metode direct PCR dalam mendeteksi mutasi F1534C pada gen VGSC pada jaringan nyamuk Aedes albopictus.

Metode : Penelitian ini menggunakan desain deskriptif dengan sampel berupa 60 ekor nyamuk Aedes albopictus dewasa yang berasal dari Kabupaten Sleman dan Kabupaten Klaten yang dikolonisasi di Insektarium Departemen Parasitologi FK-KMK UGM. Sampel terdiri atas 30 ekor nyamuk asal Sleman dan 30 ekor nyamuk asal Klaten. Sebanyak 58 sampel dianalisis menggunakan metode direct PCR dengan kertas saring genomik sebagai sumber template DNA, sedangkan 2 sampel dianalisis menggunakan PCR konvensional dengan ekstraksi DNA sebagai kontrol positif untuk verifikasi hasil deteksi mutasi F1534C.

Hasil : Analisis genotipe menunjukkan adanya mutasi kdr F1534C pada populasi Aedes albopictus yang diteliti. Ditemukan variasi genotipe berupa alel liar (F/F), heterozigot (F/C), dan homozigot mutan (C/C), dengan frekuensi yang berbeda antara populasi asal Sleman dan Klaten. Temuan ini menunjukkan bahwa alel resistansi telah beredar pada populasi nyamuk uji.

Kesimpulan : Analisis direct PCR pada Aedes albopictus dewasa berhasil mengidentifikasi mutasi kdr F1534C pada populasi yang di teliti, sehingga memenuhi tujuan surveilans resistansi. 

Background: Aedes albopictus is one of the vectors of various human diseases. Control of the Aedes albopictus population remains a considerable challenge due to numerous reports of insecticide resistance, particularly to pyrethroids. Pyrethroids are insecticides that act by disrupting voltage-gated sodium channels (VGSCs) in the insect nervous system. One type of mutation in the VGSC gene that is frequently detected in mosquito populations is the F1534C mutation. Currently, detection of the F1534C mutation generally involves mosquito rearing, DNA isolation, and PCR. This study examined the use of a direct PCR method using dried insect samples on genomic filter paper without DNA isolation.

Objective: This study aimed to assess the ability of the direct PCR method to detect the F1534C mutation in the VGSC gene in Aedes albopictus tissues.

Methods: This study employed a descriptive design with samples consisting of 60 adult Aedes albopictus mosquitoes originating from Sleman Regency and Klaten Regency that were colonized in the Insectarium of the Department of Parasitology, Faculty of Medicine, Public Health, and Nursing, Gadjah Mada University. The samples comprised 30 mosquitoes from Sleman and 30 mosquitoes from Klaten. A total of 58 samples were analyzed using the direct PCR method with genomic filter paper as the DNA template source, whereas 2 samples were analyzed using conventional PCR with DNA extraction as positive controls to verify the detection of the F1534C mutation.

Results: Genotype analysis demonstrated the presence of the kdr F1534C mutation in the studied Aedes albopictus population. Genotypic variations were identified in the form of wild-type alleles (F/F), heterozygotes (F/C), and mutant homozygotes (C/C), with differing frequencies between the populations from Sleman and Klaten. These findings indicate that resistance alleles are present in the tested mosquito populations.

Conclusion: Direct PCR analysis in adult Aedes albopictus successfully identified the kdr F1534C mutation in the studied populations, thereby fulfilling the objective of resistance surveillance.

Kata Kunci : F1534C, Aedes albopictus, direct PCR, knockdown resistance (kdr), Insektisida piretroid