Dampak Progresi Diabetes terhadap Lien Tikus: Kajian Stereologi, Histopatologi, Flow Cytometry dan Ekspresi Ligan Kemokin
Teresa Lucretia Maria Astari, Rina Susilowati, dr., Ph.D; Dewi Kartikawati Paramita, S.Si., M.Si., Ph.D.
2026 | Disertasi | S3 Kedokteran Umum
Latar Belakang: Diabetes melitus
diketahui mempengaruhi organ sistem imun, termasuk lien. Temuan terdahulu
menunjukkan bahwa atrofi lien dan penurunan pulpa alba dapat terjadi
dalam lima minggu setelah timbulnya hiperglikemia pada tikus diabetes yang
diinduksi streptozotocin (STZ). Penelitian ini bertujuan melakukan evaluasi
perubahan struktural dan imunologis lien pada dua tahap progresi diabetes.
Metode: Dua puluh enam tikus
dibagi menjadi empat kelompok berdasarkan kondisi (kontrol normal [NC] atau
model diabetes [DM]) dan waktu observasi pasca induksi (5 atau 10 minggu): NC5,
DM5, NC10, dan DM10. Diabetes diinduksi menggunakan kombinasi streptozotocin
dan nikotinamid (STZ-NA). Evaluasi mikroskopis dilakukan menggunakan teknik
pewarnaan rutin pada sediaan histologis, sedangkan volume kompartemen lien
diestimasi secara kuantitatif menggunakan metode hitung titik. Analisis
imunohistokimia (IHK) dan flow cytometry digunakan untuk menentukan
distribusi dan persentase lymphocytus T dan B. Analisis RT-qPCR
digunakan untuk menilai ekspresi relatif gen ligan yang berperan dalam migrasi lymphocytus
T dan B.
Hasil: Dibandingkan dengan
kelompok NC5, kelompok DM5 menunjukkan adanya respon inflamasi, ditandai dengan
infiltrasi granulocytus
neutrophilicus
(PMN); namun, tanpa adanya atrofi yang bermakna. Median skor imunohistokimia
untuk lymphocytus T lebih tinggi secara bermakna (p < 0>lymphocytus B CD20+CXCR5+ yang lebih tinggi (p < 0 xss=removed>pulpa alba
(p = 0,015) dan zona marginalis (p = 0,008) yang lebih rendah, serta
fraksi textus connectivus yang lebih tinggi (p < 0>Ccl19 lebih tinggi pada fase kronis awal,
sedangkan Ccl21 dan Cxcl13 lebih tinggi pada fase kronis
lanjut.
Kesimpulan: Lien pada diabetes
awal menunjukkan respon inflamasi dan aktivasi imun adaptif tanpa atrofi. Pada
diabetes lanjut terjadi atrofi lien proporsional terhadap berat badan, dengan
penurunan volume pulpa alba dan zona marginalis disertai penurunan lymphocytus
T dan B serta pergeseran ekspresi kemokin dari Ccl19 ke Ccl21 dan Cxcl13.
Background: Diabetes mellitus is known to affect the
immune system and lymphoid organs, including the spleen. Previous studies have
reported that splenic atrophy and reduction of the white pulp may occur within
five weeks after the onset of hyperglycemia in streptozotocin-induced (STZ)
diabetic rats. This study aims to evaluate structural and immunological
alterations in the spleen at two stages of diabetes progression.
Methods: Twenty-six rats were categorized into
four groups based on condition (normal control [NC] or diabetic model [DM]) and
observation period post-induction (5 or 10 weeks): NC5, DM5, NC10, and DM10.
Diabetes was induced using a combination of streptozotocin and nicotinamide
(STZ-NA). Histological evaluations were performed using standard staining techniques,
while the volumes of spleen compartments were quantitatively assessed through
point-counting methods on histological sections. Additionally,
immunohistochemistry (IHC) and flow cytometry analyses were utilized to
determine the distribution and percentages of T and B lymphocytes. Relative
gene expression was used to determine the fluctuation of ligans responsible for
lymphocyte migration.
Results: Compared to its NC5 control, the DM5
group exhibited inflammatory responses, as indicated by the infiltration of
polymorphonuclear leukocytes (PMN); however, no significant atrophy was
observed in this group. Notably, this group showed a significantly higher
immunohistochemistry median score for T lymphocytes (p < 0>+CXCR5+ B lymphocytes (p < 0 xss=removed xss=removed xss=removed>
Conclusions: The spleen in early diabetes shows
inflammation and adaptive immune activation without atrophy. In advanced
diabetes, splenic atrophy occurs while organ size remains proportional to body
weight, with reduced white pulp and marginal zone, increased connective tissue,
decreased T and B lymphocytes, and a chemokine shift from Ccl19 to Ccl21 and Cxcl13.
Kata Kunci : Stereologi Berbasis Desain, Progresi Diabetes, Histopatologi, Atrofi Organ Lien, Volume Pulpa alba
