Analisis Aktivitas Lipolitik dari Planococcus sp. JS01

NAUFAL FATHAN FAKHRIZAL, M. Saifur Rohman, M.Si., M.Eng., Ph.D; Ir. Jaka Widada, M.P., Ph.D.

2025 | Skripsi | MIKROBIOLOGI PERTANIAN

Planococcus sp. JS01  merupakan bakteri halotoleran yang diisolasi dari Sangiran, Jawa Tengah. Bakteri ini memiliki kemampuan tumbuh pada media dengan kadar garam hingga 10?n memiliki potensi untuk dieksplorasi sebagai sumber untuk memperoleh berbagai metabolit potensial untuk kepentingan industri. Salah satu metabolit yang potensial yang umumnya dimiliki oleh genus Planococcus adalah enzim lipase. Pada penelitian ini akan dilakukan analisis terhadap aktvitas lipolitik Planococcus sp. JS01. Analisis lipolitik dilakukan dengan menumbuhkan Planococcus sp. JS01 pada media minimal dengan Tween 80 sebagai sumber karbon. Ekstrak kasar lipase diproduksi dengan menggunakan medium minimal dengan sumber karbon Tween 80 dan analisis ekstrak kasar lipase dilakukan dengan 12% SDS-PAGE. Open reading frame lipase diisolasi dengan menggunakan PCR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa Planococcus sp. JS01 memiliki aktivitas lipolitik. Hal tersebut ditunjukkan dari kemampuannya memecah substrat Tween 80 menjadi asam lemak yang kemungkinan menjadi penyebab menurunnya pH pada pengujian spot plate. Analisis SDS-PAGE supernatan menujukkan adanya pita pada ukuran ± 28 kDa. Hasil isolasi orf  lipase Planococcus sp. JS01 menunjukkan ukuran sekitar ± 751 bp yang menghasilakn protein sebesar 27.5 kDa. Sekuensing open reading frame  hasil isolasi menunjukkan 100% kemiripan dengan lipase Planococcus plakortidis. Hasil penelitian ini menegaskan bahwa Planococcus sp. JS01 memiliki potensi sebagai sumber enzim lipase yang dapat diteliti lebih lanjut dan diaplikasikan pada berbagai bidang industri.

Planococcus sp. JS01 is a halotolerant bacterium isolated from Sangiran, Central Java. This bacterium is able to grow in media containing up to 10% of salt and has the potential to be explored as a source of various metabolites of industrial importance. One of the metabolites commonly produced by the genus Planococcus is lipase. In this study, an analysis of the lipolytic activity of Planococcus sp. JS01 was carried out. Lipolytic analysis was performed by cultivating Planococcus sp. JS01 on minimal medium with Tween 80 as the carbon source. Crude lipase extract was produced using minimal medium with Tween 80 as the carbon source, and the crude lipase extract was analyzed with 12% SDS-PAGE. The open reading frame of the lipase was isolated using PCR. The results showed that Planococcus sp. JS01 exhibited lipolytic activity, as indicated by its ability to hydrolyze Tween 80 into fatty acids, which likely caused a decrease in pH during the spot plate assay. SDS-PAGE analysis of the supernatant showed distinct band with molecular weight of 28 kDa. The isolated lipase ORF of Planococcus sp. JS01 was approximately ±751 bp in size producing 27.5 kDa of protein which is comparable to the protein detected on SDS-PAGE. Sequencing of the open reading frame showed 100% identity to the lipase of Planococcus plakortidis. These findings indicate that Planococcus sp. JS01 has potential as a source of lipase that can be further studied and applied in various industrial fields.

Kata Kunci : Halotoleran, Lipase, Planococcus sp. JS01, SDS-PAGE