Efek antiproliferasi dan induksi apoptosis minyak atsiri Curcuma mangga Val pada Epithelial Cervical Cancer Cell Lines (HeLa dan SiHa)

NURROKHMAN, Prof.Dr. Retno S. Sudibyo, M.Sc.,Apt

2004 | Tesis | S2 Bioteknologi

Salah satu obat tradisional yang populer dimasyarakat dan sekarang banyak digunakan sebagai obat kanker adalah Curcuma mangga Val. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek minyak atsiri Curcuma mangga Val terhadap hambatan proliferasi dan induksi apoptosis pada epithelial cervical cancer cell lines (HeLa dan SiHa). Minyak atsiri diperoleh dari hasil destilasi C. mangga Val kemudian dilarutkan dalam air dengan polietilen glikol (PEG) sebagai emulgator dengan perbandingan minyak atsiri: air: PEG = 1ml : 9ml : 7g sehingga diperoleh larutan stok 10% minyak atsiri. Uji m. atsiri C. mangga Val dilakukan secara invitro. Suspensi sel sebanyak 5 x 104 sel dalam 100 μl bufer medium ditambahkan ke dalam masing-masing 96 well plate, kemudian ditambahkan minyak atsiri kadar tertentu. Uji sitotoksisitas dilakukan dengan menghitung persen kematian sel setelah 24 jam, uji antiproliferasi dilakukan dengan menghitung jumlah sel hidup pada periode 24, 48 dan 72 jam, dan deteksi apoptosis dilakukan dengan pengecatan etidium bromid dan elektroforesis gel agarose. Uji statistik terhadap perlakuan minyak atsiri C. mangga Val menyatakan bahwa kadar 1,875 μl/ml dan 0,455 μl/ml minyak atsiri dapat menghambat proliferasi sel HeLa (dengan tingkat kepercayaan 90%) dan memperpanjang rata-rata doubling time berturutturut 4,8 dan 3,63 kali dari kontrol; tetapi pada kadar yang sama tidak mampu menghambat proliferasi sel SiHa dan hanya memperpanjang rata-rata doubling time berturut-turut 2,2 dan 2,1 kali dari kontrol. Uji apoptosis menunjukkan gambaran apoptotic bodies dan fragmentasi DNA, sehingga mengindikasikan terjadinya apoptosis.

One of the traditional herbs which has been used to treat cancers is Curcuma mangga Val. This study was to examine the antiproliferative effect and apoptotic induction of volatile oil of Curcuma mangga Val on epithelial cervical cancer cell lines (HeLa and SiHa). The volatile oil of Curcuma mangga Val was dissolved in water using polyethylene glycol (PEG) as the emulgator. The 10% volatile oil stock solution consisted of volatile oil; water; PEG = 1 ml; 9 ml; 7 g. Invitro cytotoxic test was carried out by adding certain of the volatile oil into each well of 96-well plate that contained 5 x 104 cells in 100 μl medium buffer per well. The cytotoxicity effect was determined by counting the percentage of dead cells after 24 hour treatment. The antiproliferative effect was determined by counting the number of viable cells on the periods of 24, 48 and 72 hours; and the apoptotic test was detected by staining the cells using etidium bromide and by gel agarose electrophoresis method. The results showed that the volatile oil at concentration (v/v) 1.875 μl/ml and 0.455 μl/ml inhibited the growth of HeLa cells (level of confidence 90%) and extended the doubling time in average of respectively 4.80 and 3.63 times to that of the control. At the same concentration, the volatile oil did not show ability to inhibit the growth of SiHa cell (level of confidence 90%), and only extended doubling time in average of respectively 2.20 and 2.10 times. The apoptotic test showed appearances of apoptotic bodies and DNA fragmentation which indicated apoptotic process.

Kata Kunci : Bioteknologi,Kanker Serviks,Antiproliferasi Curcuma Mangga Val, Cervical cancer – Curcuma mangga Val – Antiproliferative – Apoptosis