Pengaruh Kombinasi Cisplatin dan mimic miR-143-3p Terenkapsulasi Eksosom terhadap Viabilitas dan Induksi Apoptosis Triple Negative Breast Cancer Cell Line MDA-MB-23

Flafiani Cios Conara, Prof. dr. Sofia Mubarika Haryana, M.Med.Sc., Ph.D. ; Dr. rer. nat. Risky Oktriani, S.Si., M.Biotech., M.Sc.

2025 | Tesis | S2 Bioteknologi

Triple Negative Breast Cancer (TNBC) merupakan subtipe kanker payudara yang bersifat agresif, resisten terhadap terapi hormonal, dan memiliki tingkat kekambuhan tinggi. Salah satu pendekatan terapeutik yang potensial adalah penggunaan microRNA miR-143-3p, yang diketahui memiliki aktivitas tumor suppressor. Namun, keterbatasan stabilitas dan efisiensi penghantaran miRNA menjadi tantangan utama dalam aplikasinya. Eksosom, vesikel ekstraseluler berukuran nano, menawarkan solusi sebagai sistem delivery yang efektif dan mampu melindungi miRNA dari degradasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi efek kombinasi cisplatin dan miR-143-3p terenkapsulasi dalam eksosom (ExomiR) terhadap viabilitas dan apoptosis sel kanker payudara TNBC MDA-MB-231. Eksosom diisolasi dari sekretom sel Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC) dan dikarakterisasi menggunakan Nanoparticle Tracking Analysis (NTA). Transfeksi miR-143-3p ke dalam eksosom dilakukan dengan Exo-Fect™ Exosome Transfection Kit. Viabilitas sel diuji menggunakan MTT assay, sedangkan analisis apoptosis dilakukan melalui flow cytometry Annexin V-FITC/PI dan dikonfirmasi dengan pewarnaan acridine orange - propidium iodide (AO/PI).

Uji viabilitas sel dengan MTT assay menunjukkan bahwa kombinasi cisplatin dan ExomiR 2× menurunkan viabilitas sel secara signifikan menjadi 20,03 ± 1,63%, dibandingkan kontrol sel (100 ± 4,24%) dan perlakuan cisplatin tunggal (33,70 ± 5,04%). Perlakuan ExomiR tanpa cisplatin juga menurunkan viabilitas menjadi 91,27 ± 9,62% , sementara naked miR-143-3p tidak memberikan efek signifikan (105,1 ± 18,32%). Uji apoptosis menggunakan flow cytometry dan double staining AO/PI menunjukkan bahwa kombinasi cisplatin dan ExomiR 2× (CIS EM2×) secara signifikan meningkatkan persentase apoptosis lanjut  dibandingkan cisplatin tunggal maupun kombinasi dengan naked miR-143-3p. Hasil ini menunjukkan bahwa ExomiR, terutama dalam kombinasi dengan cisplatin, berpotensi sebagai terapi yang efektif dalam menurunkan viabilitas dan meningkatkan apoptosis lanjut sel TNBC.

Triple Negative Breast Cancer (TNBC) is an aggressive subtype of breast cancer that is resistant to hormonal therapies and associated with a high recurrence rate. One promising therapeutic approach is the use of the tumor-suppressive microRNA miR-143-3p. However, the limited stability and delivery efficiency of miRNA present major challenges for its application. Exosomes, nanosized extracellular vesicles, offer a potential solution as an effective delivery system capable of protecting miRNAs from degradation. This study aimed to evaluate the effects of combining cisplatin and miR-143-3p encapsulated in exosomes (ExomiR) on the viability and apoptosis of TNBC MDA-MB-231 cells. Exosomes were isolated from the secretome of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC) and characterized using Nanoparticle Tracking Analysis (NTA). Transfection of miR-143-3p into exosomes was performed using the Exo-Fect™ Exosome Transfection Kit. Cell viability was assessed using the MTT assay, while apoptosis analysis was carried out by Annexin V-FITC/PI flow cytometry and confirmed by acridine orange–propidium iodide (AO/PI) double staining.

The MTT assay results showed that the combination of cisplatin and ExomiR 2× significantly reduced cell viability to 20.03 ± 1.63%, compared to control cells (100 ± 4.24%) and cisplatin alone (33.70 ± 5.04%). Treatment with ExomiR alone also decreased cell viability to 91.27 ± 9.62%, while naked miR-143-3p had no significant effect (105.1 ± 18.32%). Apoptosis analysis via flow cytometry and AO/PI staining showed that the cisplatin + ExomiR 2× combination (CIS EM2×) significantly increased late apoptosis compared to cisplatin alone or cisplatin + naked miR-143-3p. These findings suggest that ExomiR, particularly in combination with cisplatin, has strong potential as an effective therapy for reducing cell viability and enhancing late apoptosis in TNBC cells.

Kata Kunci : Apoptosis, cisplatin, eksosom, miR-143-3p, triple negative breast cancer