Sintesis dan Epoksidasi Oleamida Tersubstitusi N-Aril (Fenil dan o-Tolil) dari Asam Oleat Minyak Kelapa Sawit sebagai Kandidat Antikanker: Studi In Vitro dan In Silico

Umi Nurwahidah, Prof. Drs. Jumina, Ph.D.; Dr.Sc. Robby Noor Cahyono, S.Si., M.Sc.

2025 | Tesis | S2 Ilmu Kimia

Tingginya prevalensi kanker secara global dan keterbatasan kemoterapi, meliputi resistensi dan toksisitas, menjadi tantangan signifikan dalam bidang kesehatan yang menekankan perlunya pendekatan terapeutik baru. Penelitian ini bertujuan untuk mensintesis dan mengevaluasi sitotoksisitas empat senyawa kandidat antikanker berbasis asam oleat dari minyak kelapa sawit: oleamida aromatik (OA-1 dan OA-2) yang diperoleh melalui reaksi amidasi dengan anilin dan o-toluidin menggunakan SOCl2 sebagai coupling agent, kemudian diepoksidasi menggunakan mCPBA untuk menghasilkan E-1 dan E-2. Elusidasi struktur dilakukan dengan FTIR, GC-MS, 1H-NMR, 13C-NMR, dan LC-MS. Uji aktivitas antikanker dan uji selektivitas dilakukan secara in vitro terhadap sel kanker T47D, HeLa, dan WiDr, serta sel normal Vero menggunakan metode MTT. Prediksi sifat farmakokinetik dan uji penambatan molekuler terhadap enzim FASN domain tioesterase dilakukan secara in silico.

Reaksi transesterifikasi menghasilkan FAME dengan persen hasil 70,88?ngan kandungan metil oleat 48,48%; yang berhasil ditingkatkan menjadi 70,61% melalui metode UIC. Hidrolisis FAME oleat menghasilkan asam oleat dengan persen hasil sebesar 71,50%. Data elusidasi mengkonfirmasi bahwa OA-1, OA-2, E-1, dan E-2 sesuai dengan struktur kimia senyawa target dengan persen hasil berturut-turut sebanyak 55,93%; 90,22%; 34,85%; dan 33,59%. Analisis lebih lanjut menunjukkan bahwa OA-2 serta E-1 dan E-2 memiliki aktivitas sitotoksik signifikan terhadap sel HeLa dengan nilai IC50 berturut-turut 12,84, 6,16, dan 11,23 µg/mL. Sementara itu, E-1 dan E-2 menunjukkan aktivitas moderat (20 µg/mL < IC50> 2). Studi in silico mendukung hasil studi in vitro bahwa keterbatasan sifat farmakokinetik, khususnya kelarutan dan absorpsi, berkontribusi terhadap rendahnya efektivitas sitotoksik senyawa oleamida. Selain itu, senyawa turunan epoksida menunjukkan aktivitas sitotoksik yang lebih baik, didukung oleh interaksi sinergis senyawa E1 terhadap residu Glu2251 serta interaksi senyawa E-2 dengan residu katalitik enzim FASN (Ser2308, Asp2338, His2481), dan afinitas ikatan yang lebih kuat dibandingkan senyawa oleamida (E1 = –6,90 kkal/mol dan E2 = –6,57 kkal/mol).

The increasing global prevalence of cancer, along with the limitations of current chemotherapeutic agents, especially resistance and systemic toxicity, emphasizes the urgent need for alternative treatment methods. This study presents the synthesis and biological evaluation of four oleic acid derivatives from palm oil: N-aril oleamides (OA-1 and OA-2), produced through amidation with aniline and o-toluidine using SOCl2 as a coupling agent. Subsequent epoxidation with mCPBA yielded the corresponding epoxides (E-1 and E-2). The chemical structures of all compounds were verified by FTIR, GC-MS, 1H-NMR, 13C-NMR, and LC-MS. Cytotoxicity and selectivity were assessed in vitro against T47D, HeLa, and WiDr cancer cell lines, as well as Vero normal cell line, using the MTT assay. Additionally, in silico analyses were performed to predict pharmacokinetic properties and investigate molecular interactions with the thioesterase domain of FASN enzyme.

The transesterification process yielded 70.88% of FAME, with a methyl oleate content of 48.48% and was successfully increased to 70.61% via the UIC method. Hydrolysis of the oleate methyl ester produced oleic acid in 71.50% yield. Structural elucidation confirmed that OA-1, OA-2, E-1, and E-2 corresponded to the target structures, with yields of 55.93%, 90.22%, 34.85%, and 33.59%, respectively. Biological evaluation showed that OA-2, E-1, and E-2 had strong cytotoxic effects against HeLa cells, with IC50 values of 12.84, 6.16, and 11.23 µg/mL, respectively. Furthermore, E-1 and E-2 demonstrated moderate cytotoxicity (20 µg/mL < IC50 xss=removed xss=removed>

Kata Kunci : minyak kelapa sawit, oleamida, epoksida, antikanker, farmakokinetik, penambatan molekuler