Pengaruh Ekstrak Royal Jelly Dalam Menginduksi Apoptosis Pada Sel HeLa (Studi Pada Viabilitas Sel, Ekspresi Bcl-2, Caspase-3, Dan Integritas Nukleus)

Hilmy Irsyadi Hanif, Prof. drg. Heni Susilowati, M.Kes., Ph.D; Dr. rer.nat. Risky Oktriani, S.Si., M.Biotech., M.Sc.

2025 | Tesis | S2 Kedokteran Gigi

Latar belakang: Royal jelly terbukti menghambat proliferasi berbagai sel kanker secara in vitro. Diketahui bahwa royal jelly berpotensi mampu mengaktivasi jalur kematian sel terprogram/apoptosis pada sel kanker. Protein yang berperan dalam mekanisme apoptosis antara lain adalah Bcl-2 dan Caspase-3. Tanda apoptosis teraktivasi pada sel kanker dapat terlihat dengan perubahan nukleus. Metode: Penelitian ini menggunakan sel HeLa sebagai pemodelan sel kanker dengan sel Fibroblas NIH3T3 sebagai pembanding sel sehat. Ekstrak royal jelly didapatkan melalui proses ekstraksi dengan milipore 0,22µm dengan pencampuran PBS yang kemudian dilakukan teknik serial dilusi (50%-0,09%). Doxorubicin digunakan sebagai kontrol positif. Konsentrasi terpilih diinkubasikan selama 24 jam pada sel HeLa untuk melihat ekspresi dari Bcl-2 dan Caspase-3 dengan teknik imunofluorosens. Perubahan morfologi nukleus pada sel HeLa pasca pemberian ekstrak royal jelly dideteksi secara mikroskopis setelah diberi pewarnaan dengan DAPI. Nilai viabilitas sel HeLa terhadap ekstrak royal jelly dianalisis dari hasil uji MTT. Hasil: Melalui uji MTT, diketahui bahwa esktrak royal jelly pada konsentrasi 0,19%, 0,39%, 0,78%, 1,56%, 3,125%, 6,25%, 12,5%, 25%, dan 50% secara signifikan menurunkan viabilitas sel HeLa (p<0>royal jelly konsentrasi 0,09%, 0,19%, 0,39%, 0,78%, 1,56?rsifat meningkatkan viabilitas pada sel fibroblas. Terbukti dengan imunofluorosens, inkubasi ekstrak royal jelly selama 24 jam mampu menginduksi ekspresi regulator apoptosis intrinsik Bcl-2 dan proapoptosis Caspase-3 pada sel HeLa. Perubahan morfologi nukleus pada sel HeLa pasca inkubasi ekstrak royal jelly dapat terdeteksi ditandai fragmentasi nukleus, mikronukleus, dan kondensasi kromatin. Kesimpulan: Ekstrak royal jelly memiliki potensi antikanker terhadap sel HeLa secara in vitro, ditandai dengan ekspresi protein regulator apotosis Bcl-2, proapoptosis Caspase-3, dan perubahan morfologi nukleus.

Background: Royal jelly has been proven to be anti-inflammatory and antibiotic supplements. Another potency of royal jelly can be utilized for anti-cancer through various cancer cell lines in vitro. However, the anti-cancer effect of royal jelly, which involves the activation of apoptosis through Bcl-2 and Caspase-3 expression with nuclear morphological changes remain elusive and requires for further observation. Method: Our research is conducted by utilized HeLa cell lines as cancer model and NIH3T3 cell lines as healthy cells comparison. The royal jelly is combined with PBS then extracted using a 0.22 µm Millipore filter and undergone the serial dilution technique. Selected concentrations (3.125%; 6.25%, 12.5% b/v) are used to observe the expression of apoptosis proteins (Bcl-2 and Caspase-3) in HeLa cells using the immunofluorescence method. We observed the morphological changes in the nuclei of HeLa cells using DAPI staining. Result: We measured the concentration-dependent inhibition of royal jelly extract on HeLa cells using the MTT assay and found that 50%-0.19% concentrations are inhibited HeLa cell growth. Using the immunofluorescence technique, we found that royal jelly influences the expression of the apoptosis regulator Bcl-2 and induces high expression of Caspase-3 in HeLa cells. The morphological changes of nuclei have been observed in HeLa cells, where their nuclei are fragmented and exhibit the micronuclei phenomenon, characterized by condensed chromatin. Conclusion: Royal jelly extract has a potential anti-cancer effect towards HeLa cells by activating the apoptosis mechanism through Bcl-2 and Caspase-3 expression 

Kata Kunci : apoptosis, Bcl-2, Caspase-3, HeLa, royal jelly