Peran dan Mekanisme Ekstrak Etanolik Daun Kemangi (Ocimum Sanctum Linn.) pada Hipokampus Tikus Model Alzheimer

Made Bagus Auriva Mataram, Prof. drh. Dwi Liliek Kusindarta, MP., Ph.D; Dr.med.vet. drh. Hevi Wihadmadyatami, M.Sc; Prof. Dr. drh. Siti Isrina Oktavia Salasia

2025 | Disertasi | S3 Sain Veteriner

Alzheimer adalah penyakit neurodegeneratif yang ditandai dengan hilangnya sel saraf secara progresif. Salah satu neurotransmitter yang berfungsi sebagai neuroprotektif dan neurogenesis adalah substansi P. Ekstrak daun kemangi memiliki kandungan flavonoid, tanin, fenol, saponin, alkaloid, dan eugenol yang berpengaruh dalam mekanisme antioksidan, anti-inflamasi, dan neuroprotektif. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh pemberian ekstrak daun kemangi (OSE) pada tikus model Alzheimer yang diinduksi menggunakan Trimethyltin chloride (TMT) serta mengukur tingkat toksisitas akut OSE berdasarkan OECD 423.

Uji in vivo pada penelitian ini menggunakan tikus Sprague Dawley jantan umur 12-14 minggu dengan berat badan 200-220 gram yang terbagi menjadi 5 kelompok, yaitu kelompok A (CMC NA 0,5%); kelompok B (TMT 8 mg/kg BB); kelompok C (TMT+Donepezil 0,5 mg/kg BB); kelompok D (TMT+OSE post-induksi 100 mg/kg BB); dan kelompok E (OSE pre-induksi 100 mg/kg BB +TMT+OSE post-induksi). Tikus dikorbankan pada hari ke-14, 21, dan 28 untuk diambil sampel otak kanan yang digunakan dalam pengamatan menggunakan pewarnaan cresyl violet dan imunohistokimia substansi P (SP), sedangkan sampel otak kiri bagian hipokampus digunakan untuk pemeriksaan kadar BDNF. Uji toksisitas akut oral OSE menggunakan mencit Deutschland Denken Yoken (DDY) jantan berusia 8-10 minggu dengan berat badan 35-40 gram yang terbagi menjadi 5, yaitu kelompok normal, dosis 5; 50; 300; dan 2000 mg/kg BB. Sampel uji toksisitas yang dikoleksi adalah berat badan, darah, dan organ. Jumlah neuron total dan sel imunoreaktif terhadap SP dihitung di bawah mikroskop dengan menggunakan software Optilab Image Viewer dan Optilab Image Raster. Level ekspresi BDNF diukur menggunakan ELISA. Analisis data menggunakan Two Way Anova dengan bantuan software GraphPad Prism 9. Uji toksisitas akut oral dianalisa secara kualitatif dan kuantitatif dengan pengamatan selama 14 hari untuk melihat hasil LD50.

Tikus model Alzheimer menunjukkan gejala kejang dan hiperaktivitas. Hasil analisa jumlah neuron dan sel yang imunoreaktif terhadap SP pada area DG, CA1, dan CA3 dan kadar BDNF pada kelompok D dan E mengalami peningkatan yang signifikan hingga hari ke-28 dibandingkan kelompok B dan C dibanding kelompok A. Seluruh hasil pengamatan dan analisis data uji toksisitas tidak ditemukan abnormalitas yang berarti. Ekstrak daun kemangi memiliki potensi sebagai neuroprotektif dan neurogenesis pada hewan model Alzheimer dan praktis tidak toksik (>2000 mg/kg).

Alzheimer's is a neurodegenerative disease characterized by progressive loss of nerve cells. One of the neurotransmitters that functions as a neuroprotective and neurogenesis is substance P. Basil leaf extract contains flavonoids, tannins, phenols, saponins, alkaloids, and eugenol, which affect antioxidant, anti-inflammatory, and neuroprotective mechanisms. This study aims to study the effect of OSE administration on Alzheimer's model rats induced using Trimethyltin chloride (TMT) and to measure the acute toxicity level of basil leaf extract (OSE) based on OECD 423.

In vivo testing in this study used male Sprague Dawley rats aged 12-14 weeks with a body weight of 200-220 grams divided into five groups, namely group A (CMC NA 0.5%); group B (TMT 8 mg/kg BW); group C (TMT + Donepezil 0.5 mg/kg BW); group D (TMT + OSE post-induction 100 mg/kg BW); and group E (OSE pre-induction 100 mg/kg BW +TMT+OSE post-induction). Rats were sacrificed on days 14, 21, and 28 to take right brain samples used in observations using cresyl violet staining and substance P (SP) immunohistochemistry, while left-brain samples from the hippocampus were used for BDNF level examination. Acute oral OSE toxicity test used male Deutschland Denken Yoken (DDY) mice aged 8-10 weeks with a body weight of 35-40 grams divided into 5, namely normal group, dose 5; 50; 300; and 2000 mg/kg BW. The toxicity test samples collected were body weight, blood, and organs. The total number of neurons and immunoreactive cells against SP were counted under a microscope using Optilab Image Viewer and Optilab Image Raster software. BDNF expression levels were measured using ELISA. Data analysis of all data using Two Way Anova with the help of GraphPad Prism 9 software. Acute oral toxicity tests were analyzed qualitatively and quantitatively with observations for 14 days to see the LD50 results.

Alzheimer's model rats showed symptoms of seizures and hyperactivity. The analysis results of the number of neurons and cells that were immunoreactive to SP in the DG, CA1, and CA3 areas and BDNF levels in groups D and E increased significantly until the 28th day compared to groups B and C to group A. All results of observations and analysis of toxicity test data did not find any significant abnormalities. Basil leaf extract has the potential as a neuroprotective and neurogenesis in Alzheimer's model animals and is practically non-toxic (> 2000 mg/kg)

Kata Kunci : Alzheimer, ekstrak daun kemangi, neuroprotektif, neurogenesis, toksisitas akut