Efek Sekretom MSC HUVEC Terhadap Ekspresi Mir-125b-5p Dan mRNA Smad2 Pada Pankreas Mencit Model Hiperglikemia

Zahratul Aini, Prof. dr. Sofia Mubarika Haryana, M.Med.Sc., Ph.D

2025 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Dasar dan Biomedis

Latar Belakang : Hiperglikemia adalah kondisi di mana kadar glukosa dalam darah meningkat di atas batas normal. Hiperglikemia terjadi disebabkan oleh adanya gangguan dalam regulasi glukosa tubuh, yang meliputi penurunan sekresi insulin, penurunan penggunaan glukosa, dan peningkatan produksi glukosa. Salah satu terapi alternatif dari hiperglikemia adalah menggunakan sekretom MSC-HUVEC. Sekretom mengandung mikro RNA (miRNA) yang berperan dalam regulasi metabolisme glukosa. miRNA yang diteliti pada penelitian ini adalah miR-125b-5p yang diketahui dapat menghambat aktivitas SMAD2 sehingga sekresi insulin dapat meningkat.

Tujuan penelitian : melihat efek sekretom MSC HUVEC terhadap ekspresi miRNA miR-125b-5p dan gen target mRNA SMAD2 pada mencit model hiperglikemia.

Metode : Analisis in silico dilakukan dengan menggunakan Targetscan, Microrna Enrichment Turned Network (MIENTURNET), MirWalk, Cytoscape, dan RNAfold Web Server. Ekspresi miR-125b-5p dan mRNA dilakukan dengan qPCR. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok perlakuan yaitu Dosis 1, 2, 3, Media, dan Kontrol. Hasil ekspresi dari qPCR dianalisis statistik dengan menggunakan Graphpad Prism dengan tingkat kepercayaan 95%.

Hasil Penelitian : Hasil analisis in silico  menunjukkan bahwa terdapat interaksi penghambatan oleh miR-125b-5p terhadap mRNA SMAD2 secara in silico yang ditunjukkan dengan MFE sebesar -22.6 kcal/mol dan menarget pada jalur pensinyalan TGF-beta. Ekspresi miR-125b-5p pada kelompok Dosis 2 lebih tinggi dibanding dengan kelompok media. Ekspresi gen target SMAD2 tidak berbeda signifikan.

Kesimpulan : miR-125b-5p memiliki interaksi terhadap mRNA SMAD2. Ekspresi miR-125b-5p pada jaringan pankreas mencit model hiperglikemia yang diterapi sekretom MSC HUVEC lebih tinggi dibandingkan kelompok yang tidak diterapi. Ekspresi mRNA SMAD2 yang diterapi sekretom MSC HUVEC tidak berbeda signifikan dibandingkan dengan kelompok yang tidak diterapi sekretom.

Background : Hyperglycemia is a condition characterized by elevated blood glucose levels exceeding normal limits. This state arises due to disruptions in glucose regulation, including decreased insulin secretion, reduced glucose utilization, and increased glucose production. An alternative therapeutic approach to managing hyperglycemia involves the use of MSC-HUVEC secretome. The secretome contains microRNA (miRNA), which plays a critical role in regulating glucose metabolism. In this study, miR-125b-5p is investigated for its ability to inhibit SMAD2 regulation, potentially enhancing insulin levels. Objectives : to investigate the regulation of miRNA expression, specifically miR-125b-5p and its target mRNA gene, SMAD2, in a hyperglycemic mouse model. Methods : In silico analysis was conducted using TargetScan, MicroRNA Enrichment Turned Network (MIENTURNET), MirWalk, Cytoscape, and RNAfold Web Server. Expression analysis of miR-125b-5p and mRNA was performed using qPCR. This study utilized five treatment groups. qPCR expression results were statistically analyzed with GraphPad Prism at a 95% confidence level. Results : In silico analysis revealed that miR-125b-5p indirectly targets SMAD2. The expression of miR-125b-5p in the Dose 2 group was higher than in the media group. Conversely, the expression of the target gene SMAD2 was higher in the media group compared to the control group. Conclusions : miR-125b-5p exhibits an indirect interaction with SMAD2 mRNA in silico, with a low interaction affinity. The expression of miR-125b-5p in pancreatic tissue of hyperglycemic mice induced with MSC-HUVEC secretome was higher compared to the non-induced MSC-HUVEC secretome group. Conversely, SMAD2 mRNA expression in the pancreatic tissue of hyperglycemic mice induced with MSC-HUVEC secretome was lower than in the non-induced group.

Kata Kunci : MSC HUVEC, Sekretom, Hiperglikemia, miR-125b-5p, SMAD2