EFEK TERAPI SEKRETOM HUVEC MSC TERHADAP EKSPRESI INTERLEUKIN-6 PADA SEL C2C12 YANG DIINDUKSI ASAM PALMITAT DALAM KONDISI PENAMBAHAN INSULIN
Inzan Ilmi Kazamzam, Dr. drh. Pamungkas Bagus Satriyo, Ph.D.; Prof. dr. Sofia Mubarika Haryana, M.Med.Sc, Ph.D.
2025 | Skripsi | PENDIDIKAN DOKTER
Latar belakang: Resistensi insulin merupakan kelainan utama yang terjadi pada diabetes
mellitus tipe 2, dengan jaringan otot sebagai lokasi utamanya. Resistensi
insulin dapat dipicu oleh paparan asam lemak jenuh seperti asam palmitat
melalui peningkatan kondisi inflamasi. Hal ini ditandai dengan peningkatan
sitokin proinflamasi, seperti interleukin-6 (IL-6). Penggunaan sekretom sel
punca yang dikoleksi dari human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) mesenchymal
stem cell (MSC) dapat menjadi kandidat yang potensial untuk pengobatan
resistensi insulin. Meski demikian, informasi mengenai efektivitas serta
konsentrasi optimal pemberian sekretom HUVEC MSC sebagai terapi terhadap
ekspresi sitokin proinflamasi pada sel otot yang mengalami resistensi insulin
masih belum diketahui.
Tujuan: Mengetahui efek terapi sekretom HUVEC MSC dalam menyebabkan ekspresi Interleukin-6
menjadi lebih rendah secara dose-dependent pada sel C2C12 yang diinduksi
asam palmitat dalam kondisi penambahan insulin.
Metode: Penelitian dilakukan secara in vitro pada sel C2C12 myotube.
Sel C2C12 myotube model resistensi insulin dibuat dengan induksi asam
palmitat (C16H32O2) 0,25 mM. Kelompok
percobaan dibedakan berdasarkan level konsentrasi pemberian sekretom HUVEC MSC
(105, 106, dan 107 partikel/ mL) yang
dikombinasikan dengan insulin 100 nM. Sitokin proinflamasi yang dijadikan
parameter pada penelitian ini adalah IL-6. Pengukuran ekspresi mRNA IL-6
dilakukan dengan menggunakan RT-PCR. Analisis statistik dilakukan menggunakan OneWay
ANOVA test yang dilanjutkan dengan Post Hoc Tukey Test serta Pearson
correlation test (CI=95%, ?=0,05).
Hasil: Kombinasi sekretom HUVEC MSC dan insulin secara tidak signifikan menyebabkan
ekspresi mRNA IL-6 yang lebih rendah pada sel C2C12 myotube yang
diinduksi asam palmitat. Konsentrasi sekretom HUVEC MSC secara tidak signifikan
memiliki korelasi negatif dengan kekuatan ringan (r = 0,222) terhadap
ekspresi mRNA IL-6. Data yang tidak signifikan pada penelitian ini dipengaruhi
oleh optimasi model C2C12 myotube resistensi insulin yang kurang baik
serta asumsi konsentrasi sekretom HUVEC MSC yang terlalu rendah.
Kesimpulan: Terapi sekretom HUVEC MSC menyebabkan ekspresi interleukin-6
menjadi lebih rendah secara dose-dependent pada sel C2C12 yang diinduksi
asam palmitat dalam kondisi penambahan insulin, tetapi tidak signifikan secara
statistik.
Kata kunci: C2C12 myotube; Interleukin-6; Resistensi insulin;
Sekretom HUVEC MSC
Background: Insulin resistance is the most common problem found in Type 2
Diabetes Mellitus, with muscle tissue as the main location. Insulin resistance
can be triggered by the exposure of saturated fatty acid, such as palmitic
acid, through the increased inflammatory stage. This is marked with increased
proinflammatory cytokine, such as Interleukin-6 (IL-6). The use of stem cell’s
secretome collected from Human Umbilical Vein Endothelial Cell (HUVEC
Mesenchymal Stem Cell (MSC) could be a potential candidate for insulin
resistance treatment. However, information about the effectivity and optimal
concentration of HUVEC MSC Secretome as therapy towards proinflammatory
cytokine expression in insulin resistant skeletal muscle cells still not well
known.
Objective: To know the dose-dependent therapeutic effect of HUVEC MSC secretome
towards the decreased in expression of interleukin-6 in palmitic acid induced
C2C12 cell in insulin-added state.
Method: This is an in vitro research using C2C12 myotube cell. The insulin
resistance cell model was made through palmitic acid (C16H32O2)
0,25 mM induction. The experimental group was differentiated by the
concentration of HUVEC MSC secretome given (105, 106, dan
107 particle/ mL) combined with insulin 100 nM. In this research,
interleukin-6 was used as proinflammatory cytokine parameter. The measurement
of IL-6 mRNA expression was done with RT-PCR. The statistical analysis used
OneWay ANOVA test continued with Post Hoc Tukey Test as well as Pearson
correlation test (CI=95%, a=0,05).
Result: The combination of HUVEC MSC secretome and insulin insignificantly
reduced the IL-6 mRNA expression in C2C12 myotube induced by palmitic acid.
HUVEC MSC secretome had a non-significant negative correlation with light
strength (r = 0,222) on IL-6 mRNA expression. The insignificant data in
this study was influenced by poor optimization of the C2C12 myotube model of
insulin resistance and the assumption that the HUVEC MSC secretome
concentration was too low.
Conclusion: There is a dose-dependent therapeutic effect of HUVEC MSC secretome
towards the decreased in expression of interleukin-6 in palmitic acid induced
C2C12 cell in insulin-added state.
Keywords: C2C12 myotube; Interleukin -6, Insulin Resistance; HUVEC MSC Secretome
Kata Kunci : C2C12 myotube, Interleukin-6, Resistensi insulin, Sekretom HUVEC MSC