Kajian morfologi dan profil protein mikrospora tembakau Nicotiana tabacum L. cv. Vorstenlanden dan cv. Petit Havana SR-1 setelah stres panas dan pelaparan

SALAMAH, Zuchrotus, Dr. Ari Indrianto, SU

2004 | Tesis | S2 Biologi

Telah dilakukan penelitian untuk mengetahui pengaruh praperlakuan stres panas suhu 340 C dan pelaparan pada mikrospora tembakau Nicotiana tabacum L. cv Vorstenlanden dan cv Petit havana SR-1 serta profil protein mikrospora yang terbentuk. Kedua kultivar tembakau ditanam untuk mendapatkan sumber eksplan berupa mikrospora. Mikrospora pada stadium uninukleat akhir diberi praperlakuan stres panas dan pelaparan selama 7 hari. Sementara itu mikrospora juga ada yang dibiarkan tumbuh secara in-vivo pada tanamannya selama 7 hari. Setelah 7 hari dalam medium pelaparan mikrospora dipindah ke medium yang diperkaya (medium A2), diinkubasi dalam gelap pada suhu 250 C selama 4 minggu. Populasi mikrospora pada kondisi segar, setelah praperlakuan stres panas suhu 340 C dan pelaparan serta pollen masak secara in-vivo diukur konsentrasi proteinnya dan dibuat profil proteinnya menggunakan metode SDSPAGE yang berdasarkan berat molekul. Data yang diharapkan terdiri dari penetapan stadium perkembangan mikrospora, perubahan morfologi yang terjadi pada mikrospora setelah diberi stres, perkembangan mikrospora dalam medium A2, konsentrasi protein yang terkandung dalam mikrospora dan data berat molekul dari profil protein mikrospora. Hasil penelitian menunjukkan bahwa stadium late uninukleat terdapat pada kuncup dengan mahkota bunga berukuran 9-10 mm dengan presentase 69,00 ± 0,74 pada cv. Vorstenlanden dan 56,46 ± 0,80 pada cv. Petit havana SR-1. Setelah diberi praperlakuan stres mikrospora mengalami perubahan morfologi, dijumpai sitoplasma berbentuk star like (tipe-3) 21,49 ± 0,27 % pada cv. Vorstenlanden dan 20,89 ± 1,32 % pada cv. Petit havana SR-1. Dalam medium A2 dijumpai mikrospora multiseluler 4,11 ± 0,22 % pada cv. Vorstenlanden dan 5,12 ± 1,01 % pada cv. Petit havana SR-1. Konsentrasi protein yang terkandung dalam mikrospora sebelum diberi praperlakuan adalah 0,3486 mg/ml pada cv. Vorstenlanden dan 0,3762 mg/ml pada cv. Petit havana SR-1. Setelah diberi praperlakuan konsentrasi protein yang terkandung dalam mikrospora adalah 0,0719 mg/ml pada cv. Vorstenlanden dan 0,1687 mg/ml pada cv. Petit havana SR-1. Setelah mikrospora berada dalam kondisi stres dijumpai protein dengan berat molekul 65 kD dan 84 kD pada cv. Petit havana SR-1.

The aims of this research were to know the effect of heat shock 340 C and starvation to the tobacco variety, Nicotiana tabacum L. cv. Vorstenlanden and cv. Petit havana SR-1 microspore also protein profile of microspore formed after heat shock 340 C and starvation. Both tobacco varieties plants have been planted to produce microspore. Isolated microspore subjected to stres by culturing in starvation B medium and incubated at 340 C for 7 days in dark. In the mean time microspore were grown in-vivo at the plants during 7 days. After 7 days in starvation medium the microspore were subcultured to the rich medium (A2 medium), incubated in darkness during 4 weeks at 250 C. Protein concentration of population of the microspore after pre- treatment before by heat shock at 340 C and starvation and in-vivo mature pollen was measured and the protein profile was made using the SDS-PAGE method based on molecular weight. The expected data consist of establishment of microspore viability, and the microspore viability which have been given the treatment of stress, microspore development in rich medium, microspore protein concentration and the molecular weight data of the microspore protein profile before. Result showed that late uninucleat microspore was found in the bud with flower crown size (9–10) mm with precentage of 69,00 ± 0,74 at the cv Vorstenlanden and 56,46 ± 0,80 at the cv Petit havana SR-1. After stres microspore showed, star like (tipe-3) 21,49 ± 0,27 % at cv. Vorstenlanden and 20,89 ± 1,32 % at cv. Petit havana SR-1.Viability of fresh isolated microspore 81 %, the viability microspore after pre- treatment is 54,93 ± 0,42 % at cv. Vorstenlanden and 50,13 ± 2,75 % at cv. Petit havana SR-1.Multicellular microspore was found in the rich medium at 4,11 ± 0,22% in the cv Vorstenlanden dan at 5,12 ± 1,01 % in the cv Petit havana SR-1. The microspore protein concentration after pre-treatment is 0,0719 mg/ml in the cv Vorstenlanden and 0,1687 mg/ml in the cv Petit havana SR-1. In stressed microspore protein with molecular weight of 65 kD and 84 kD was found in the cv. Petit havana SR-1

Kata Kunci : Morfologi Tembakau,Profil Protein,Stres Panas dan Pelaparan, morfology, protein profile, microspore Nicotiana tabacum L. cv. Vorstenlanden, cv.and Petit havana SR-1, heat shock and starvation stress