Rekayasa Genetika Anggrek Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’ dengan Penyisipan Gen AtRKD4 untuk Produksi Embrio Somatik

Tutik Pujiyanti, Prof. Dr. Endang Semiarti, M.S., M.Sc.; Dr. Yekti Asih Purwestri, S.Si., M.Si.

2024 | Tesis | S2 Bioteknologi

Tanaman anggrek merupakan salah satu tanaman hias yang memiliki banyak spesies. Anggrek hibrida yang berpotensi untuk dikembangkan yaitu Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’. Menurut De (2020) Rhyncholaeliocattleya memiliki keunggulan bunganya yang besar dan indah, warna bunganya cerah, aromanya harum dan memiliki nilai ekonomi yang tinggi. Perbanyakan secara konvesional relatif membutuhkan waktu yang lama dan menghasilkan anakan yang sedikit. Teknologi perbanyakan mikropropagasi menjadi solusi yang efisien karena tanaman dapat diperbanyak dengan biji maupun organ tanaman seperti daun, akar dan meristem pada nodus tangkai bunga. Perbanyakan menggunakan biji (secara generatif) secara in vitro akan menghasilkan protokorm (Piria et al., 2018). Penggunaan Agrobacterium tumefaciens sebagai media penghantaran gen yang dinginkan menjadi kombinasi yang prospektif untuk perbanyakan tanaman yang unggul. Rekayasa genetika tanaman anggrek dengan penambahan vitamin C untuk meningkatkan jumlah transforman yang hijau. Transforman yang berhasil hidup setelah seleksi kemudian diinduksi dengan media DEX 15 ppm untuk pembentukan embrio somatik. Tujuan penelitian yaitu 1) mengetahui efisiensi transformasi genetik pada protokorm anggrek Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’ yang disisipi konstruksi gen 35S::GR::AtRKD4 dengan penambahan vitamin c. 2) mengkonfirmasi keberadaan transgen AtRKD4 pada konstruksi 35S::GR::AtRKD4 pada tanaman transforman anggrek Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’  dan 3) mendapatkan embrio somatik pada tanaman anggrek Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’  transforman setelah diinduksi dengan DEX. Hasil menunjukan penambahan vitamin C mendapatkan transforman yang hidup sebanyak 13 protokorm atau jika dimasukkan kedalam rumus efisiensi menjadi 0, 33%, transgen AtRKD4 berhasil tersisipkan kedalam genom anggrek Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’ dan terbentuknya embrio somatik pada tanaman transforman setelah diinduksi DEX 15 ppm.

Kata kunci: Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’, rekayasa genetika, AtRKD4, embrio somatik.

The orchid plant is an ornamental plant that has many species. The hybrid orchid that has the potential to be developed is the Rhyncholaeliocattleya '‘Adinda x Mount Hood’'. According to De (2020), Rhyncholaeliocattleya has the advantage of having large and beautiful flowers, bright flower colors, fragrant smell and high economic value. Conventional propagation takes a relatively long time and produces few offspring. Micropropagation technology is an efficient solution because plants can be propagated by seeds or plant organs such as leaves, roots and meristems at flower stalk nodes. Propagation using seeds (generatively) in vitro will produce protocorms (Piria et al., 2018). The use of Agrobacterium tumefaciens as a medium for delivering the desired gene is a prospective combination for the propagation of superior plants. Genetic engineering of orchid plants with the addition of vitamin C to increase the number of green transformants. Transformants that survived after selection were then induced with 15 ppm DEX media for the formation of somatic embryos. The aims of the research are 1) to determine the efficiency of genetic transformation in Rhyncholaeliocattleya '‘Adinda x Mount Hood’' orchid protocorm which is inserted with the 35S::GR::AtRKD4 gene construct with the addition of vitamin C. 2) confirming the presence of the AtRKD4 transgene in the 35S::GR::AtRKD4 construct in Rhyncholaeliocattleya '‘Adinda x Mount Hood’' orchid transformant plants and 3) obtaining somatic embryos in transformant Rhyncholaeliocattleya '‘Adinda x Mount Hood’' orchid plants after being induced with DEX. The results showed that the addition of vitamin C resulted in 13 protocorm viable transformants or if entered into the efficiency formula it became 0.33%, the AtRKD4 transgene was successfully inserted into the Rhyncholaeliocattleya '‘Adinda x Mount Hood’' orchid genome and somatic embryos were formed in the transformant plants after being induced by 15 ppm DEX.

Kata Kunci : Rhyncholaeliocattleya ‘Adinda x Mount Hood’, genetic engineering, AtRKD4, somatic embryo.