Aktivitas Sitotoksik Fraksi Ekstrak Etanolik Buah Cabe Jawa (Piper retrofractum Vahl.) terhadap Sel Kanker Payudara T47D

Novanda Eka Saputra, Prof. Dra. Rarastoeti Pratiwi, M.Sc., Ph.D

2024 | Tesis | S2 Biologi

Buah cabe jawa (Piper retrofactum Vahl.) merupakan salah satu tumbuhan asli Indonesia yang berpotensi sebagai antikanker. Buah cabe jawa memiliki tiga tingkatan kematangan buah yang dapat dilihat dari morfologi kulit buah, yaitu kematangan hijau, jingga dan merah. Tujuan penelitian ini untuk menguji sitotoksisitas ekstrak dan fraksi ekstrak etanolik 96 % pada sel T47D dan Vero, profil metabolit sekunder, induksi apoptosis, dan penghambatan siklus sel pada sel T47D. Buah cabe jawa diperoleh dari Tulungagung, Jawa Timur. Analisis warna kematangan buah dilakukan menggunakan chromameter. Sampel diekstraksi dengan etanolik 96% menggunakan metode soklet dan difraksinasi menggunakan metode vacuum liquid chomatography. Ekstrak dan fraksi ekstrak diukur sitotoksistasnya terhadap sel T47D dan Vero menggunakan MTT assay. Uji induksi apoptosis dan penghambatan siklus sel dengan metode flow cytometry. Analisis komponen bioaktif menggunakan GC-MS. Data induksi apoptosis dan penghambatan siklus sel dianalisis menggunakan Oneway ANOVA (p ? 0,05) dan dilanjutkan uji beda nyata Tukey. Aktivitas sitotoksik ekstrak menunjukkan ekstrak buah cabe jawa kematangan jingga memiliki aktivitas paling toksik terhadap sel T47D dengan nilai IC₅₀ 102,76 µg/mL. Aktivitas sitotoksik fraksi ekstrak buah cabe jawa kematangan jingga menunjukkan fraksi paling toksik pada T47D yaitu fraksi B (fraksi dari gabungan pelarut n:heksan-etil asetat (7:3 dan 5:5)) dengan nilai IC₅₀ 56,31 µg/mL. Semua fraksi ekstrak kurang selektif terhadap sel Vero. Ekstrak buah cabe jawa kematangan jingga mampu memicu hambatan siklus sel pada fase Sub-G1 dan menginduksi apoptosis. Senyawa yang diduga berperan sebagai antikanker antara lain piperidine, piperlongumine, dan ß-sitosterol. Ekstrak ekstrak buah cabe jawa kematangan jingga potensial untuk dikembangkan sebagai antikanker.

Javanese long pepper (Piper retrofactum Vahl.) is a plant native to Indonesia that has anticancer potential. Javanese long pepper has three levels of fruit maturity which can be seen from the morphology of the fruit skin, namely green, orange and red maturity. The purpose of this study was to test the cytotoxicity of extracts and 96% ethanolic extract fractions on T47D and Vero cells, secondary metabolite profiles, apoptosis induction, and cell cycle arrest in T47D cells. Javanese long pepper fruit is obtained from Tulungagung, East Java. Color analysis of fruit maturity was carried out using a chromameter. The sample was extracted with 96% ethanol using soxhlet and fractionated using the Vacuum Liquid Chomatography. Extracts and fractions were measured for cytotoxicity against T47D and Vero cells using the MTT assay. Apoptosis induction and cell cycle arrest assay using the flow cytometry. Analysis of bioactive components using GC-MS. Data on apoptosis induction and cycle arrest submitted to One-way ANOVA followed by Tukey test. The cytotoxic activity of the extract showed that the orange maturation fruit extract had the most toxic activity against T47D cells with an IC₅₀ value of 102.76 µg/mL. The cytotoxic activity of the orange maturation fruit extract fraction showed that the most toxic fraction in T47D was fraction B (fraction from the combined solvent n:hexane-ethyl acetate (7:3 and 5:5)) with an IC₅₀ value of 56.31 µg/mL. All extract fractions were less selective to Vero cells. orange maturation extract is able to trigger cell cycle arrest in the Sub-G1 phase and induce apoptosis. Compounds that are thought to have an anticancer role include piperidine, piperlongumine, and ß-sitosterol. Orange maturation fruit extract has the potential to be developed as an anticancer.

Kata Kunci : Piper retrofractum, kanker, sitotoksisitas, apoptosis, siklus sel