Aktivitas Sitoprotektif Ekstrak Etil Asetat Daun Beluntas (Pluchea indica L.) Pada Sel Vero Yang Diinduksi H2O2

Violita Syukroni, Woro Anindito Sri Tunjung, S.Si., M.Sc., Ph.D.

2024 | Tesis | S2 Biologi

Stress oksidatif ditimbulkan karena produksi Reactive Oxygen Species (ROS) yang berlebihan akibat paparan sinar UV, polusi udara, radikal bebas, asap rokok dan lifestyle yang buruk. Beluntas memiliki senyawa antioksidan yang tinggi dan aktivitas enzimatis antioksidan yaitu SOD dan CAT yang dapat menetralisir ROS. Penggunaan sel Vero dinilai mampu memberikan bukti preliminary mekanisme stres oksidatif yang dapat digunakan dalam pengujian efektifitas senyawa antioksidan daun beluntas. Tujuan penelitian ini adalah menganalisis efektivitas dan mekanisme kerja esktrak daun beluntas sebagai agen sitoprotektan pada sel Vero yang diinduksi H₂O₂ secara in vitro. Metode yang digunakan adalah ekstraksi menggunakan pelarut etil asetat kemudian dianalisis aktivitas antioksidannya dengan uji DPPH. Sel vero diberi perlakuan ekstrak daun beluntas sebelum diinduksi H₂O₂ untuk analisis aktivitias sitoprotektif. Parameter yang digunakan dalam uji aktivitas sitoprotektif adalah uji viabilitas (MTT), apoptosis dan caspase-3 (flowcytometri), dan kandungan enzim antioksidan (spektrofotometri) sel Vero setelah diberi perlakuan ekstrak etil asetat daun beluntas. Hasil menunjukkan bahwa ekstrak beluntas memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC₅₀ sebesar 369,3 µg/ml. Ekstrak beluntas terbukti meningkatkan dan mempertahankan viabilitas sel Vero lebih baik dari kontrol dan asam askorbat (Vit C). Sel vero yang diberi perlakuan ekstrak etil asetat daun beluntas memiliki aktivitas enzim antioksidatif SOD dan CAT yang lebih tinggi dibandingkan kontrol dan Vit C. Ekstrak etil asetat daun beluntas juga mampu menekan aktivitas apoptosis dan caspase-3 lebih baik dibandingkan dengan kontrol dan Vit C. Studi ini mengungkapkan bahwa ekstrak etil asetat daun beluntas menunjukkan potensi sebagai agen sitoprotektan yang dapat dikembangkan lebih lanjut salah satunya adalah sebagai agen anti-aging. 

Oxidative stress is caused by increasing Reactive Oxygen Species (ROS) production due to UV exposure, air pollution, free radicals, cigarette smoke and poor lifestyle. Indian camphorweed has high antioxidant compounds and antioxidant enzymatic activity, namely SOD and CAT, which can neutralize ROS. Vero cells can provide preliminary evidence of oxidative stress mechanisms that can be used in testing the effectiveness of Indian camphorweed leaves antioxidant compounds. This study aimed to analyze the effectiveness and mechanism of Indian camphorweed leaf extract as a cytoprotectant agent in Vero cells from H₂O₂-induced oxidative stress. The method used was extraction using ethyl acetate solvent and then analyzing the antioxidant activity with DPPH method. Vero cells were treated with Indian camphorweed leaves extract before H₂O₂ induction for cytoprotective activity analysis. Cell viability (MTT), apoptosis and caspase-3 (flow cytometry), and antioxidant enzyme content (spectrophotometry) of Vero cells was used as cytoprotective activity parameters. The results show that Indian camphorweed leaves extract has antioxidant activity with IC₅₀ value of 369.3 µg/ml. MTT results showed that Extract can increase and maintain Vero cell viability better than the control and ascorbic acid. Vero cells treated by extract had higher  SOD and CAT antioxidant enzyme activities compared to the control and Vit C. Extract also effectively suppresses apoptosis and caspase-3 activities compared to the control and Vit C. This study reveals that ethyl acetate extract of Indian camphorweed shows potential as a cytoprotective agent that can be further developed, particularly as an anti-aging agent. 

Kata Kunci : Sitoprotektif, Antioksidan, Pluchea indica L., Sel Vero, Stres Oksidatif