Aktivitas antikanker ekstrak kasar dan fraksi kolom biji Monordica charantia L. terhadap sel Raji, Hela dan T47D

PARHARDIAN, Hesri Rochmad, Drs. Sudjadi, Apt.,MS.,PhD

2004 | Tesis | S2 Ilmu Kedokteran Tropis

Momordica charantia L. telah lama digunakan sebagai obat tradisional di Indonesia. Ekstrak biji Momordica charantia L. mempunyai senyawa aktif dalam wujud ribosome-inactivating protein (RIP). Hampir semua RIP dapat menghambat virus dan membunuh sel kanker. Beberapa sel kanker seperti sel Raji dan sel HeLa diturunkan dari Limfoma Burkitt (BL) dan karsinoma leher rahim. Kedua kanker tersebut berhubungan dengan virus seperti Epstein-Barr Virus (EBV) dan Human Papilloma Virus (HPV). Sel T47D berasal dari turunan sel kanker payudara yang tidak disebabkan oleh virus. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek RIP dari Momordica charantia L. terhadap sel Raji, sel HeLa dan sel T47D. Ekstrak kasar dari biji Momordica charantia L. dilarutkan dalam NaCl 0,15M, dan diendapkan dengan 30-60% ammonium sulfat jenuh. Endapan kemudian dimurnikan dengan kolom CM-Sepharose CL-6B menggunakan gradien NaCl 0,5M. Cell line ditumbuhkan dalam medium pertumbuhan yang ditambahkan ekstrak kasar ataupun fraksi kolom. Dosis Kematian 50% (LC50) dihitung secara langsung untuk Raji dan menggunaan MTT untuk sel Hela dan T47D. Penelitian ini mendapatkan bahwa sel Raji lebih sensitif dari sel T47D. Sel HeLa resisten terhadap ekstrak bahkan pada dosis 1 mg / ml. Mekanisme kematian sel karena RIP umumnya proses apoptosis. Sel Raji mempunyai kerusakan pada jalur apoptosis sehingga tidak dapat terjadi apoptosis dan sel Hela dari penelitian ini mempunyai LC50 yang tinggi (resisten terhadap RIP dari Momordica charantia L.), karena itu dipakai sel T47D. Sel T47D menunjukkan fragmentasi DNA sebagai tanda apoptosis.

Momordica charantia L. has been used traditionally as medicinal plant in Indonesia. The seed extracts have active substance in the form of ribosomeinactivating proteins (RIP). Almost RIP can eliminate virus infection and kill cancer cell. Some cancer cells like Raji cell line and HeLa cell line are derived from Burkitt’s lymphoma (BL) and carcinoma of cervix, respectively. Both cancers shows a striking association with Epstein-Barr Virus (EBV) and Human Papilloma Virus (HPV).T47D cell line is derived from breast cancer and do not related to certain type of virus. This work was focused on the effect of RIP from Momordica charantia L. against Raji cell line, HeLa cell line and T47D cell line. Crude extract from Momordica charantia L. seeds dissolved in 0,15 M NaCl, and then precipitated with 30-60% saturated ammonium sulphate. Precipitan was then purified with column of CM-Sepharose CL-6B with 0,5 M NaCl gradient. Cell lines grown in growth media with crude extract and active fraction of column. Lethal Concentration 50% (LC50) was calculated directly for Raji cell line and used MTT for HeLa and T47D cell lines. The Raji cells showed more sensitive than T47D cell lines. Whereas HeLa cell line was more resistant. Death mechanism of the cell for most of RIP was apoptosis. Raji cell line was resistant to apoptosis and HeLa cell line showed high LD50 (resistant to M. charantia RIP), so T47D cell line was used for apoptosis experiment. In this work T47D cell line showed DNA fragmentation, as sign of apoptosis.

Kata Kunci : Imunologi Molekular,Ekstrak Biji Momordica Charantia L,Anti Kanker, column fraction, Momordica charantia L., Raji cell line, HeLa cell line, T47D cell line, apoptosis