Efek Kuratif Ekstrak Etanolik Bekatul Beras Hitam (Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’) terhadap Deposisi Kolagen Fibroblas NIH3T3 yang diinduksi H2O2

MATILDA JESSELINE GABRIELA GIOVANNI, Dr. Ardaning Nuriliani, S.Si., M.Kes.

2024 | Skripsi | BIOLOGI

Beras hitam (Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’) merupakan salah satu tanaman tropis yang banyak digunakan sebagai bahan pangan fungsional. Kandungan senyawa fenolik seperti antosianin dalam beras hitam berperan sebagai antioksidan. Antioksidan merupakan molekul yang dapat berikatan dengan reactive oxygen species (ROS) sehingga dapat mereduksi cekaman yang diakibatkan oleh H2O2. H2O2 merupakan salah satu stresor sel yang dapat meningkatkan kadar ROS di dalam tubuh serta menginduksi penghentian pertumbuhan sel yang berujung pada kematian sel. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari efek kuratif ekstrak etanolik beras hitam (Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’) terhadap sel NIH3T3 yang diinduksi dengan H2O2. Metode yang digunakan pada penelitian ini yaitu ekstraksi bekatul beras hitam dengan pelarut etanol, isolasi dan pembiakan sel NIH3T3, pemberian stressor H2O2 terhadap sel NIH3T3, induksi ekstrak etanolik beras hitam (Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’) terhadap sel NIH3T3, dan uji deposisi kolagen dengan pewarnaan Sirius Red. Konsentrasi ekstrak etanolik beras hitam yang digunakan yaitu 15,625; 31,25; 62,5; 125; 250; 500; 1000; dan 1500 µg/mL dan konsentrasi H2O2 yang digunakan yaitu 50, 100, dan 150 µM. Data dianalisis dengan oneway ANOVA (p ? 0,05), IC50 dengan regresi linier, dan deskriptif komparatif untuk uji morfologi sel. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan ekstrak etanolik bekatul beras hitam konsentrasi 15,625 hingga 500 µg/mL pada NIH3T3 yang diinduksi H2O2 50, 100, dan 150 µM mampu memberikan efek kuratif berupa peningkatan persen deposisi kolagen. Selain itu, ekstrak bekatul beras hitam konsentrasi 250 µg/mL memberikan perbaikan morfologis terbaik untuk fibroblas dengan induksi H2O2 50 dan 100 µM, sedangkan pada induksi H2O2 150 µM, perbaikan morfologis yang paling signifikan adalah perlakuan esktrak bekatul beras hitam konsentrasi 125 µg/mL. Dengan demikian, ekstrak etanolik bekatul beras hitam pada konsentrasi tertentu mampu memberikan efek kuratif terhadap fibroblas NIH3T3 yang diinduksi dengan H2O2.

Black rice (Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’) is a tropical plant that is widely used as a functional food ingredient. The content of phenolic compounds such as anthocyanins in black rice acts as an antioxidant. Antioxidants are molecules that can bind to reactive oxygen species (ROS) so they can reduce stress caused by H2O2. H2O2 is a cell stressor that can increase ROS levels in the body and induce the cessation of cell growth which leads to cell death. This research aims to study the curative effect of ethanolic extract of black rice (Oryza sativa L. 'Sembada Hitam') on NIH3T3 cells induced with H2O2. The methods used in this research were extraction of black rice bran with ethanol solvent, isolation and culturing of NIH3T3 cells, administration of the stressor H2O2 to NIH3T3 cells, induction of ethanolic extract of black rice (Oryza sativa L. 'Sembada Hitam') to NIH3T3 cells, and deposition testing collagen with Sirius Red staining. The concentration of black rice ethanolic extract used was 15.625; 31.25; 62.5; 125; 250; 500; 1000; and 1500 µg/mL and the H2O2 concentrations used were 50, 100, and 150 µM. Data were analyzed using one-way ANOVA (p ? 0.05), IC50 with linear regression, and comparative descriptive for cell morphology observation. The results showed that treatment with ethanolic extract of black rice bran at the concentration of 15.625 to 500 µg/mL on NIH3T3 induced by 50, 100, and 150 µM H2O2 was able to provide a curative effect with the increase of the collagen deposition percentage. In addition, black rice bran extract with the concentration of 250 µg/mL provided the best morphological improvement for fibroblasts with 50 and 100 µM H2O2 induction, while in H2O2 at 150 µM induction, the most significant morphological improvement was treated with black rice bran extract with a concentration of 125 µg/mL. Thus, the ethanolic extract of black rice bran at a certain concentration was able to provide a curative effect on NIH3T3 fibroblasts induced with H2O2.

Kata Kunci : stres oksidatif, H2O2, Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’, deposisi kolagen, sel NIH3T3, morfologi