Studi Morfologi Lidah Pteropus vampyrus dan Eonycteris spelaea (Dobson 1871) dari Pulau Timor: Histokimia, Imunohistokimia, dan Molekuler

Yulfia Nelymalik Selan, Prof. drh. Dwi Liliek Kusindarta, MP., Ph.D; Dr. med. vet. drh. Hevi Wihadmadyatami, M.Sc.; Prof. Dr. drh. Aris Haryanto, M. Si

2024 | Disertasi | S3 Sain Veteriner

Pteropus vampyrus merupakan kelelawar pemakan buah yang hanya menghisap sari buah, sedangkan Eonycteris spelaea merupakan kelelawar pemakan nektar. Jenis makanan, pola makan, habitat, dan perilaku kelelawar dapat mempengaruhi struktur dan morfologi lidah. Penelitian bertujuan untuk mengetahui morfologi permukaan dorsal lidah, keberadaan dan distribusi karakteristik kelenjar lidah dan serat kolagen, serta keberadaan dan distribusi neuropeptida dengan histokimia, imunohistokimia (IHC), dan qRT-PCR pada P. vampyrus dan E. spelaea. Penelitian ini menggunakan 6 ekor P. vampyrus dan 6 ekor E. spelaea. Dua ekor setiap spesies diperfusi, jaringan lidah difiksasi dengan paraformaldehyde 4%, diproses parafin, 3 µm untuk pewarnaan histokimia, 8 µm untuk IHC, 2 ekor setiap spesies untuk SEM dan 2 ekor setiap spesies untuk qRT-PCR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa panjang lidah P. vampyrus adalah 5,5 ± 0,8 cm; sedangkan E. spelaea berukuran 6,0 ± 0,1 cm. Kelenjar Weber pada kedua spesies mengeluarkan mucous dengan sifat musin berbeda. Kelenjar von Ebner pada P. vampyrus mensekresi seromucous dengan musin netral sedangkan pada E. spelaea dengan musin netral dan asam. Struktur papila lingual pada apex kedua spesies sama yaitu scale like, small crown-like, giant trifid dan fungiform; corpus lidah P. vampyrus adalah large crown-like, leaf like, dan fungiform; corpus lidah E. spelaea yaitu leaf-like, rosette shape filiform, dan fungiform; radix kedua spesies terdiri dari long conical, rosette shape, short conical dan sirkumvallata. Serat kolagen dari kedua spesies didistribusikan di lamina propria dan lapisan muskularis. Secara kuantitatif, ekspresi gen pada lidah P. vampyrus digambarkan sebagai berikut: PGP 9.5: 3.13 ± 0.8; NPY 2,8 ± 0,5; SP 2.4 ± 0.4; Serotonin 1,88 ± 0,1. Lebih lanjut, kuantifikasi ekspresi gen pada E. spelaea adalah sebagai berikut: PGP 9.5: 5.01 ± 1.1; SP 3,16 ± 0,6; Serotonin 1,96 ± 0,2 dan NPY 1,59 ± 0,3. Serabut saraf Neuropeptida Y (NPY) dan Serotonin terdistribusi pada taste buds, epitel, lamina propria, dan kelenjar lingual pada lidah P. vampyrus, sedangkan Substance P (SP) tidak ditemukan pada kelenjar. Selain itu, pada Eonycteris spelaea, serabut saraf serotonin terdistribusi di epitel, lamina propria, dan otot. Selain itu, serabut saraf Neupeptida Y dan Substance P yang imunoreaktif ditemukan pada taste buds, epitel, lamina propria, dan kelenjar. Protein gene product 9,5 (PGP 9.5) pada kedua spesies positif pada taste buds, epitel, lamina propria, dan ganglion pada vallata. Kesimpulan: lidah P. vampyrus dan E. spelaea memiliki variasi struktur papilla, sekresi kelenjar, ekspresi gen, dan distribusi neuropeptida.

 

Pteropus vampyrus is a fruit-eating bat, sucking only the juice from the fruit, while Eonycteris spelaea is a nectar-eating bat. The type of food, diet, habitat, and behavior of bats can affect the structure and morphology of the tongue. The study aimed to determine the morphology of the dorsal surface of the tongue, the presence and distribution of characteristics of the tongue glands and collagen fibers, and the presence and distribution of neuropeptides with histochemistry and immunohistochemistry and qRT-PCR in P. vampyrus and E. spelaea. This study used 6 P. vampyrus and six E. spelaea. Two samples of each species were perfused, tongue tissue was fixed with 4% paraformaldehyde, processed paraffin, 3 ?m for histochemical staining, 8 ?m for IHC, 2 heads for each species for SEM, and 2 samples for each species for qRT-PCR. The results showed that the length of the tongue of P. vampyrus is 5.5 ± 0.8 cm; meanwhile, E. spelaea is 6.0 ± 0.1cm. Weber's glands in both species secrete mucous with different mucin properties. The von Ebner glands of both species secrete seromucous with neutral mucin in P. vampyrus while neutral and acidic mucin in E. spelaea. The structure of the lingual papillae on the apex of both species is the same: scale-like, small crown-like, giant trifid, and fungiform. Meanwhile, on the corpus of P. vampyrus, the lingual papillae consist of large crown-like, leaf-like, and fungiform; The tongue corpus of E. spelaea consist of leaf-like, rosette shape filiform and fungiform; The radix of both species composed of long conical, rosette shape, short conical and circumvallate papilla. The collagen fibers of both species are distributed in the lamina propria and the muscular layer. Quantifically, the gene expression in taste buds of P. vampyrus tongue is described as follows: PGP 9.5: 3.13 ± 0.8; NPY 2.8 ± 0.5; SP 2.4 ± 0.4; Serotonin 1.88± 0.1. Furthermore, the quantification of gene expression in E. spelaea is as follows: PGP 9.5: 5.01 ± 1.1; SP 3.16 ± 0.6; Serotonin 1.96 ± 0.2 and NPY 1.59 ± 0.3. Nerve fibers NPY and Serotonin distribute on the taste buds, epithelium, lamina propria, and lingual glands on the P. vampyrus. Meanwhile, SP is not found in the glands. Moreover, in the Eonycterys spelaea, serotonin nerve fiber is distributed in the epithelium, lamina propria, and muscular. In addition, immunoreactive NPY and SP nerve fibers are found on taste buds, epithelial, lamina propria, and glands. Protein gene product 9.5 in both species was positive in taste buds, epithelial, lamina propria, and ganglion in vallate. In conclusion, the tongues of P. vampyrus and E. spelaea have variations in papilla structure, glandular secretion, neuropeptide distribution, and neuropeptide expression.

Kata Kunci : Pteropus vampyrus, Eonycteris spelaea, Lidah, Histokimia, IHK, qRT-PCR