Pengaruh Metabolit Lactobacillus ATCC 4356 terhadap Pembentukan Biofilm Streptococcus sanguinis ATCC 10556 (Kajian In Vitro)

TIARA KUS ANINDITA MAHARANI, Prof. drg. Tetiana Haniastuti, M.Kes., Ph.D.; drg. Heni Susilowati, M. Kes., Ph.D.

2023 | Skripsi | PENDIDIKAN DOKTER GIGI

Stereptococcus sanguinis merupakan bakteri primary colonizers yang dapat menyebabkan plak gigi dengan cara membantu perlekatan bakteri secondary colonizers. Lactobacillus acidophilus merupakan salah satu spesies Lactobacillus yang paling sering disarankan untuk digunakan sebagai probiotik. Lactobacillus acidophilus memiliki aktivitas antimikroba karena metabolit sekunder yang diproduksinya. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh metabolit L. acidophilus ATCC 4356 terhadap pembentukan biofilm S. sanguinis ATCC 10556. 

Uji penghambatan biofilm dilakukan dengan mengkultur suspensi bakteri S sanguinis dalam media BHI bersama-sama dengan metabolit L. acidophilus (6,25%, 12,5%, 25%) dan NaCl 0,9% (kontrol negatif) di 96 well microtiter plate. Microtiter plate kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 derajat Celcius. Setelah dilakukan inkubasi, biofilm diwarnai menggunakan kristal violet 0,1%. Optical density dibaca menggunakan microplate reader dengan panjang gelombang 540 nm. Data dari penelitian ini dianalisis dengan menggunakan uji One-Way ANOVA dan Post-Hoc Least Significant Difference dengan tingkat kepercayaan 95%. 

Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna persentase penghambatan biofilm S. sanguinis antara metabolit konsentrasi 6,25?ngan metabolit konsentrasi 12,5?n konsentrasi 25%. Metabolit konsentrasi 12,5% juga memiliki perbedaan bermakna dengan metabolit konsentrasi 25%. Kesimpulan dari penelitian ini adalah metabolit L. acidophilus ATCC 4356 dengan konsentrasi 6,25%, 12,5%, dan 25% mampu menghambat pembentukan biofilm bakteri S. sanguinis ATCC 10556.

Streptococcus sanguinis is a primary colonizer bacterium that leads to dental plaque formation by aiding the attachment of secondary colonizer bacteria. Lactobacillus acidophilus is one of the most commonly recommended Lactobacillus species for use as a probiotic. Lactobacillus acidophilus has antimicrobial activity due to its secondary metabolites. The purpose of this study was to determine the effect of L. acidophilus ATCC 4356 metabolites on the formation of S. sanguinis ATCC 10556 biofilm.

Biofilm inhibition assay was performed by culturing a suspension of S. sanguinis bacteria in BHI media together with L. acidophilus metabolites (6.25%, 12.5%, 25%) and 0.9% NaCl (negative control) in 96-well microtiter plate. The microtiter plate is then incubated for 24 hours at a temperature of 37 degrees Celcius. After incubation, the biofilm was stained using 0.1% crystal violet. The optical density was read using a microplate reader at a wavelength of 540 nm. Data from this study were analyzed using One-Way ANOVA and Post-Hoc Least Significant Difference tests with a confidence level of 95%.

The results of statistical analysis showed that there was a significant difference in the percentage of inhibition of S. sanguinis biofilm among groups. There were significant differences between metabolites concentration of 6.25% with metabolites concentration of 12.5% and concentration of 25%. The metabolite concentration of 12.5% also has a significant difference with the metabolite concentration of 25%. This study concludes that L. acidophilus ATCC 4356 with concentrations of 6.25%, 12.5%, and 25% inhibits the formation of bacterial biofilms S. sanguinis ATCC 10556. 

Kata Kunci : metabolit, Lactobacillus acidophilus, biofilm, Streptococcus sanguinis