Aktivitas Sitotoksik dan Induksi Apoptosis Ekstrak Kloroform Bekatul Beras Hitam (Oryza sativa L. 'Sembada Hitam') terhadap Sel HepG2 (Hepatoma Cell Line)
Bima Mahendra, Dr. Ardaning Nuriliani, S.Si., M.Kes.
2023 | Skripsi | BIOLOGI
Beras hitam (Oryza sativa L.
‘Sembada Hitam’) merupakan tanaman yang digunakan sebagai bahan pangan dan
nutraseutikal. Tanaman tersebut mengandung nutrien yang tinggi termasuk
berbagai asam amino esensial hingga senyawa fenolik seperti antosianin yang
berperan sebagai antioksidan. Antioksidan berperan sebagai antikanker dengan
cara menghambat proliferasi dan menginduksi apoptosis sel abnormal. Penelitian
dilakukan dengan tujuan untuk mempelajari aktivitas sitotoksik dan induksi apoptosis
ekstrak kloroform bekatul beras hitam (Oryza
sativa L. ‘Sembada Hitam’) terhadap sel HepG2. Metode yang
digunakan pada penelitian ini yaitu ekstraksi beras hitam dengan pelarut
kloroform, uji sitotoksisitas dengan MTT assay,
dan uji apoptosis dengan flow cytometry.
Konsentrasi ekstrak yang digunakan yaitu 7,8125; 15,625; 31,25; 62,5; 125; 250;
500; 1000; 1500; 2000; 2500; dan 3000 µg/mL. Pengamatan juga dilakukan terhadap
kelompok kontrol sel, kontrol DMSO 1%, dan kontrol positif doksorubisin
konsentrasi 0,25; 0,5; 1; 2; 4; dan 8 µg/mL. Hasil dianalisis dengan One-way ANOVA (p ? 0,05) dan uji letak beda nyata Tukey HSD. Hasil uji
sitotoksik bekatul beras hitam yang diinkubasi 24 jam menunjukkan viabilitas
sel terendah pada kelompok konsentrasi 2500 µg/mL yaitu 11,98 ± 5,06%. Sedangkan pada kelompok yang diinkubasi 48
jam, viabilitas sel terendah ditunjukkan pada konsentrasi 3000 µg/mL
sebesar 4,90 ± 0,67%. Berdasarkan hasil
IC50 kedua kelompok perlakuan ekstrak bekatul beras hitam senilai
1265 µg/mL dan 1868 µg/mL serta uji apoptosis, dapat disimpulkan bahwa ekstrak
kloroform bekatul beras hitam ‘Sembada Hitam’ tidak bersifat sitotoksik dan
induksi apoptosis rendah sehingga tidak potensial sebagai antikanker.
Black rice (Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’) is a
plant used as source of food and nutraceutical because of its high-nutrient
content namely phenolic compounds like anthocyanin that act as antioxidant.
Antioxidant has the property of anticancer by inhibiting proliferation and
induce apoptosis of abnormal cells. This study aimed to determine the cytotoxic
activity and apoptosis induction of chloroform extract of black rice bran or
CEBRB ‘Sembada Hitam’ on HepG2 cell line. The methods used are
extraction using chloroform, cytotoxic assay with MTT, and apoptosis test by flow
cytometry. Concentrations of CEBRB used in this research are 7,8125; 15,625;
31,25; 62,5; 125; 250; 500; 1000; 1500; 2000; 2500; and 3000 µg/mL.
Observations are also conducted on cell control, DMSO 1%, and doxorubicin with
various concentrations (0,25; 0,5; 1; 2; 4; and 8 µg/mL). Data will be analyzed
using One-way ANOVA (p ? 0,05) and Tukey HSD. The cytotoxicity result of CEBRB
group incubated for 24 hours showed the lowest cell viability at 2500 µg/mL
with 11,98 ± 5,06%. Meanwhile, for 48 hours, the
lowest cell viability was indicated by the concentration of 3000 µg/mL
with 4,90 ± 0,67%. Based on the IC50
of both CEBRB groups which were 1265 µg/mL and 1868 µg/mL as well as the apoptosis test, it can be concluded that CEBRB
‘Sembada Hitam’ did not show cytotoxic activity and low induction of apoptosis.
Thus, has low potential to be used as an anti-cancer.
Kata Kunci : Aktivitas sitotoksik, Apoptosis, HepG2 Cell Line, Oryza sativa L. ‘Sembada Hitam’.