Uji Sitotoksisitas Senyawa Antioksidan C-4-Hidroksi-3metoksifenilkaliks[4]resorsinarena In Vitro pada Sel Vero dan Sel Hep G2

SHELLA MARISKA, Prof. Dr.dr. Eti Nurwening S., M.Kes., M.Med.Ed.; Dr.dr. Rul Afiyah Syarif, M.Kes

2022 | Tesis | MAGISTER ILMU BIOMEDIK

Latar Belakang : Salah satu sistem pertahanan tubuh pada manusia adalah dihasilkannya antioksidan endogen yang berguna untuk mencegah kerusakan kulit akibat radikal bebas. Salah satu pendekatan terapi dalam menangkal stres oksidatif adalah dengan menyediakan antioksidan yang memadai untuk mengatasinya. Senyawa organik yang dikembangkan sebagai antioksidan salah satunya adalah makromolekul calixarene, C-2- hydroxyphenylcalix [4] resorsinarena yang dilaporkan memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 77.43 mcg/mL.Untuk menguji keamanan penggunaan senyawa C-4-Hidroksi-3- metoksifenilkaliks[4]resorsinarena dan pengembangan senyawa sebagai obat maka perlu dilakukan uji toksisitas. Salah satu uji toksisitas yang dapat dilakukan adalah uji sitotoksisitas in vitro. Sel yang dapat digunakan untuk uji toksisitas antara lain sel Vero dan sel Hep G2. Tujuan : Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui sitotoksisitas senyawa antioksidan C-4-Hidroksi-3-metoksifenilkaliks[4]resorsinarena in vitro pada sel Vero dan Sel Hep G2. Metode : Uji sitotoksisitas dengan metode MTT pada sel Vero dan sel Hep G2 dengan menambahkan berbagai konsentrasi senyawa uji 31,25; 62,5; 125; 250; 500; 1000mcg/mL. Absorbansi dibaca menggunakan Elisa reader. Pengukuran Alanin aminotransferase (ALT) dan Aspartat aminotransferase (AST) pada sel Hep G2 dengan spektofotometer. Hasil : Uji sitotoksisitas in vitro pada sel Vero dan sel Hep G2 didapat nilai rata- rata IC50 sebesar 1,512+-761,06(mcg/mL) dan 993+-263,691(mcg/mL). Uji AST dan ALT pada sel Hep G2 didapat penurunan kadar AST dan ALT seiring dengan peningkatan konsentrasi senyawa yang diberikan. Kesimpulan : Senyawa antioksidan C-4-Hidroksi-3- metoksifenilkaliks[4]resorsinarena tidak toksik pada sel Vero dan sel Hep G2.

Background: One of the defense systems in humans is the production of endogenous antioxidants which are useful for preventing skin damage due to free radicals. In conditions of oxidative stress, there is an increase in ROS which will cause damage to cells, tissues or organs. One of the therapeutic approaches in counteracting oxidative stress is to provide adequate antioxidants. One of the organic compounds developed as antioxidants is the macromolecule calixarene. The C-2-hydroxyphenylcalix[4]resorcinarene which is reported to have santioxidant activity with an IC50 value of 77.43 mcg/mL. To test the safety of the C-4-Hydroxy-3-methoxyphenylkalix[4]resorcinarene to develop as a drug, it is necessary to carry out a toxicity test. One of the toxicity tests that can be carried out is the in vitro cytotoxicity test. Objective: This study was conducted to determine the cytotoxicity of the antioxidant compound of C-4-Hydroxy-3-methoxyphenylcalix[4]resorsinarene in vitro on Vero cells and Hep G2 cells. Method: The cytotoxicity test using was conducted with MTT method on cell Vero and cell Hep G2. The compond with various concentration of 31.25, 62,5, 125, 250, 500, and 1000mcg/mL were added to the cells. The absorbance was read by Elisa reader. The level of Alanine aminotransferase (ALT) and Aspartate aminotransferase (AST) on cell Hep G2 culture was determined by spectrophotometer. Result: In vitro cytotoxicity test on Vero cells and Hep G2 cells showed the IC50 value of 1.512+-761,06 mcg/mL and 99+-263,6913 mcg/mL respectively. The AST and ALT level on Hep G2 cells with the compound showed a decreasing level with increasing the concentration of the compounds. Conclusion: The antioxidant compound C-4-Hydroxy-3-methoxyphenylcalix[4] resorcinarene is not toxic to Vero cells and Hep G2 cells.

Kata Kunci : C-4-Hidroksi-3-metoksifenilkaliks[4]resorsinarena, sitotoksisitas, AST, ALT.