IDENTIFIKASI PEPTIDA ANTIBAKTERI DARI HIDROLISAT KIMOTRIPSIN PROTEIN BIJI JARAK KEPYAR (Ricinus communis L.) TERFRAKSINASI EKSTRAKSI FASE PADAT FASE TERBALIK

ALIFA FIRDA FADLINA, Tri Joko Raharjo, S.Si., M.Si., Ph.D.

2022 | Skripsi | S1 KIMIA

Telah dilakukan identifikasi peptida potensial antibakteri dari hidrolisat kimotripsin protein biji jarak kepyar (Ricinus communis L.). Tujuan dari penelitian ini untuk mendapatkan fraksi peptida dari hasil hidrolisis dengan kemotripsin terhadap protein biji jarak kepyar serta menentukan urutan asam amino peptidapeptida antibakterial dari fraksi tersebut. Penelitian diawali dengan proses ekstraksi lemak biji jarak kepyar dengan metode ekstraksi Soxhlet menggunakan pelarut petroleum eter (PE). Selanjutnya dilakukan ekstraksi protein dengan presipitasi aseton dari serbuk biji jarak bebas lemak. Protein kemudian dihidrolisis secara enzimatis dengan enzim kimotripsin dan hasil hidrolisis di fraksinasi dengan menggunakan solid phase extraction (SPE) fase terbalik. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi cakram pada masing-masing fraksi peptida terhadap S. aureus dan E. coli. Fraksi peptida yang memiliki aktivitas antibakteri akan dianalisis dengan High Resolution Mass Spectrometry (HRMS). Hasil dari penelitian ini berupa ekstrak protein dengan rendemen sebesar 69,73%, sedangkan hidrolisis dengan enzim kimotripsin menghasilkan nilai derajat hidrolisis sebesar 66,09%. Pengujian fraksi peptida dengan difusi cakram terhadap E. coli dan S. aureus menghasilkan zona hambat pada fraksi MeOH 50%. Hasil identifikasi fraksi MeOH 50% menggunakan HRMS menghasilkan 8 peptida dengan urutan asam amino QRAAGL, RGAAGAL, KGAPGF, KGGAPF, RQAIEQQQSQGQLQGQDVFEAF, ITTITL, TVEDLPEVPTPL, dan MSSIDVHTHY.

The identification of potential antibacterial peptides from chymotrypsin hydrolyzate protein from jathropa (Ricinus communis L.) seeds has been carried out. The purpose of this study was to obtain the peptide fraction from the hydrolysis of chemotrypsin to the protein of jatropha seed and to determine the amino acid sequence of the antibacterial peptides from the fractions. The study began with the extraction fat out of jatropha seed using the Soxhlet extraction method using petroleum ether (PE) as a solvent. Furthermore, protein extraction was carried out with acetone precipitation from fat-free seed powder. The protein was then hydrolyzed enzymatically using chymotrypsin and the hydrolysis product was fractionated using a reversed phase solid phase extraction (SPE). Antibacterial activity test was carried out by disc diffusion method on each peptide fraction against S. aureus and E. coli. Peptide fractions that have antibacterial activity will be analyzed by High Resolution Mass Spectrometry (HRMS). The results of this study were protein extracts with a yield of 69,73%, while hydrolysis with chymotrypsin resulted in a degree of hydrolysis of 66,09%. Testing the peptide fraction by disc diffusion against E. coli and S. aureus resulted in an inhibition zone at 50% MeOH fraction. The results of the identification of the 50% MeOH fraction using HRMS produced 8 peptides with the amino acid sequence QRAAGL, RGAAGAL, KGAPGF, KGGAPF, RQAIEQQQSQGQLQGQDVFEAF, ITTITL, TVEDLPEVPTPL, and MSSIDVHTHY.

Kata Kunci : antibakteri, biji jarak kepyar, hidrolisis, kimotripsin