Ekspresi Relatif mRNA CD163, IFN Gamma, dan TGF Beta pada Hepar Tikus (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769) Tanpa dan Dengan Tumor Payudara Setelah Paparan Medan Listrik Statis Frekuensi Menengah

G A B YEHEZKIEL P C, Dra. Rarastoeti Pratiwi, M.Sc., Ph.D.

2022 | Skripsi | S1 BIOLOGI

Electro-Capacitive Cancer Therapy (ECCT) mulai dikembangkan sebagai metode alternatif bagi terapi kanker payudara dengan memanfaatkan medan listrik statis. Penelitian terdahulu membuktikan efektivitas terapi medan listrik statis terhadap jaringan tumor payudara hewan coba, namun penggunaannya mungkin memberi pengaruh pada aktivitas molekuler dari organ lain seperti hepar. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh terapi medan listrik statis berfrekuensi menengah serta intensitas rendah terhadap ekspresi mRNA CD163, IFN Gamma, dan TGF Beta pada hepar tikus (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769) tanpa dan dengan tumor payudara yang diinduksi DMBA. Penelitian diawali dengan pengambilan sampel simpanan jaringan hepar tikus dalam RNA-Later suhu -20 derajat Celcius. Jaringan tersebut berasal dari empat kelompok perlakuan berbeda, yakni kelompok tikus non-induksi DMBA dan non-terapi (NINT) sebagai kelompok kontrol, induksi DMBA dan non-terapi (INT), non-induksi DMBA dan terapi (NIT), serta induksi DMBA dan terapi (IT) dengan tiga spesimen tikus (ulangan biologis) untuk tiap kelompok perlakuan. Isolasi RNA hepar dilakukan menggunakan reagen TriPure, kemudian dilanjutkan dengan sintesis cDNA. Ekspresi mRNA CD163, IFN Gamma, dan TGF Beta dikuantifikasi menggunakan metode RT-qPCR dengan dua tube sampel cDNA (ulangan teknis) dari tiap spesimen. Nilai relatif ekspresi mRNA dihitung dengan rumus Livak dan dianalisis statistik menggunakan One-way ANOVA. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa ekspresi relatif mRNA CD163, IFN Gamma, dan TGF Beta, baik pada kelompok perlakuan NIT, IT, dan IT cenderung mengalami penurunan, meskipun tidak signifikan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol NINT (p > 0,05). Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa terapi medan listrik statis berfrekuensi menengah serta intensitas rendah tidak berpengaruh terhadap ekspresi relatif mRNA CD163, IFN Gamma, dan TGF Beta pada hepar tikus tanpa dan dengan tumor payudara yang diinduksi DMBA.

Electro-Capacitive Cancer Therapy (ECCT) is being developed as an alternative method for breast cancer therapy by utilizing static electric fields. Previous research has proven the effectiveness of static electric field therapy on breast tumor tissue of the experimental animal, but its use may affect the molecular activity of other organs, i.e. the liver. This research aims to study the effects of intermediate-frequency and low-intensity static electric field therapy on the relative expression of CD163, IFN Gamma, and TGF Beta mRNA in rat liver (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769) with and without DMBA-induced mammary tumor. The study began by retrieving samples of stored rat liver tissues in -20 degrees Celcius RNA-Later belonging to four different treatment groups: non-DMBA induction and non-therapy (NINT) as the control group, DMBA induction and non-therapy (INT), non-DMBA induction with therapy (NIT), and DMBA induction with therapy (IT), three rat specimens (biological replications) for each treatment group. RNA isolation of the liver was conducted using TriPure reagent, followed by cDNA synthesis. The relative expression of CD163, IFN Gamma, and TGF Beta mRNA was quantified using RT-qPCR with 2 tubes of cDNA samples (technical replication) from each specimen. The expression values were calculated using Livaks formula and statistically analyzed using One-way ANOVA. Obtained results show that the mRNA relative expression of CD163, IFN Gamma, and TGF Beta genes in NIT, INT, and IT treatment groups tend to experience a decrease, although it is insignificant when compared to the NINT control group (p > 0,05). In conclusion, intermediate-frequency and low-intensity static electric field therapy does not affect the relative expression of CD163, IFN Gamma, and TGF Beta mRNA in rat liver with and without DMBA-induced mammary tumors.

Kata Kunci : mRNA, CD163, IFN Gamma, TGF Beta, hepar tikus, ECCT