Pengaruh Asam Klorogenat terhadap Fibrosis Ginjal terkait Ekspresi mRNA TGF-�²1, Smad7, Collagen-1 dan Protein �±-SMA pada Mencit yang diinduksi 5/6 Subtotal Nefrektomi

NURFADILAH, dr. Nungki Anggorowati, Sp.PA(K), Ph.D, dr. Ratih Yuniartha, Ph.D/ dr. Nur Arfian, Ph.D

2022 | Tesis | MAGISTER ILMU BIOMEDIK

Latar Belakang: Penyakit Gagal Ginjal Kronis (GGK) telah menjadi masalah kesehatan utama dan menjadi prioritas kesehatan masyarakat di seluruh dunia. Kondisi lanjutan dari GGK adalah fibrosis ginjal, ditandai dengan peningkatan produksi marker fibrosis seperti TGF�²-1, Collagen-I, dan �±-SMA, serta penurunan Smad7. Chlorogenic acid (CGA) merupakan salah satu komponen kopi yang memiliki aktivitas renoprotektif sehingga berpotensi untuk dikembangkan dalam pengobatan GGK. Tujuan: Penelitian ini dilakukan untuk mengamati pengaruh pemberian asam klorogenat pada ekspresi marker fibrosis seperti TGF�²-1, Smad7, Collagen-I, dan �±-SMA pada model hewan coba 5/6 Subtotal Nefrektomi (5/6 SN). Metode: Desain penelitian ini adalah post-test only quasi experimental. Subjek yang digunakan adalah mencit (Mus musculus) jantan galur Swiss-Webster jantan yang dibagi menjadi 3 kelompok kontrol: Sham operation (SO), 5/6-SN yang diberikan aquadest dari hari ke-15-28 (SN14), dan 5/6-SN yang diberikan aquadest dari hari 1-28 (SN28); serta 2 kelompok uji: 5/6-SN yang diberikan CGA dari hari ke-15-28 (CGA14), dan 5/6-SN yang diberikan CGA dari hari 1-28 (CGA28). Intervensi dilakukan dengan pemberian CGA 14 mg/kgBB/hari/i.p. Pengamatan protein dilakukan dengan immunohistokimia sedangkan ekspresi mRNA diamati dengan qRT-PCR dan RT-PCR. Hasil: Ekspresi mRNA TGF-�²1, �±-SMA, dan Collagen-I pada CGA28 secara signifikan lebih rendah dibandingkan SN28 (0,75�±0,17 vs 1,23�±0,19, p<0,01; 2,36�±0,79 vs 2,66�±1,57, p<0,01; 1,81�±0,12 vs 2,15�±0,19, p>0,01 berturut-turut). Sementara itu, mRNA Smad7 lebih tinggi namun tidak signifikan pada CGA28 dibandingkan SN28 (0,23�±0,02 vs 0,19�±0,02, p>0,01). Kesimpulan: Pemberian CGA dapat menghambat fibrosis ginjal pada mencit GGK 5/6-SN ditunjukkan dengan mRNA TGF-�²1, �±-SMA, dan Collagen-I pada kelompok CGA28 lebih rendah secara signifikan dibandingkan dengan kelompok SN28. Dapat ditarik kesimpulan pengaruh pemberian CGA dapat menurunkan ekspresi mRNA TGF-�²1, �±-SMA, dan Collagen-I.

Background: Chronic Kidney Failure (CKD) has become a major health problem and a public health priority throughout the world. The advanced condition of CKD is renal fibrosis, characterized by increased production of fibrosis markers such as TGF�²-1, Collagen 1, and �±-SMA, as well as decreased Smad7. Chlorogenic acid (CGA) is one of the components of coffee that has renoprotective activity so that it has the potential to be developed as a CKD drug. Objective: This study was conducted to observe the effect of CGA administration on the expression of fibrosis markers such as TGF�²-1, Smad7, Collagen 1, and �±-SMA in experimental animal models of 5/6 Subtotal Nephrectomy (5/6-SN). Methods: The design of this study was post-test only quasi-experimental. The subjects used were male Swiss-Webster strain mice (mus musculus) which were divided into 3 control groups: Sham operation (SO), 5/6-SN which was given aquadest from days 15-28 (SN14), and 5/6-SN given aquadest from day 1-28 (SN28); and 2 test groups: 5/6-SN given CGA from days 15-28 (CGA14), and 5/6-SN given CGA from days 1-28 (CGA28). The intervention was carried out by giving 14 mg/kgBW/day/i.p of CGA. Protein observations were carried out by immunohistochemistry while mRNA expression was observed by qRT-PCR and RT-PCR. Results: Expression of mRNA TGF-�²1, �±-SMA, and Collagen-I in CGA28 was significantly lower than SN28 (0.75�±0.17 vs 1.23�±0.19 p<0.01; 2.36�±0.79 vs 2.66 �±1.57 p<0.01; 1,634�±0,045 vs 2,154�±0,185, p=0,031 respectively). Meanwhile, mRNA Smad7 was higher but not significant in CGA28 compared to SN28 (0.23�±0.02 vs 0.19�±0.02, p>0.01). Conclusion: Administration of CGA can inhibit renal fibrosis in CKD 5/6-SN mice as shown by expression of mRNA TGF-�²1, �±-SMA, and Collagen-I in the CGA28 group which was significantly lower than in the SN28 group. It can be concluded that the effect on CGA administration can reduce the expression of mRNA TGF-�²1, �±-SMA, and Collagen-I

Kata Kunci : Gagal Ginjal Kronis, 5/6 Subtotal Nefrektomi, TGF�²-1, Smad7, Collagen-1, �±-SMA chlorogenic acid, myofibroblast/ ChronicKidneyDisease, 5/6 Subtotal Ne