PENGARUH DIET RENDAH PROTEIN TERHADAP EKSPRESI mRNA TOLL-LIKE RECEPTOR 4 (TLR4) DAN mRNA CLUSTER OF DIFFERENTIATION 68 (CD68) PADA MENCIT MODEL UNILATERAL URETERAL OBSTRUCTION (UUO) STADIUM AKHIR

BAGUS WIJAYA KUSUMA, dr. Junaedy Yunus, M.Sc., PhD.; dr. Arta Farmawati, Ph.D.; Dr. dr. Ch. Tri Nuryana, M.Kes

2021 | Skripsi | S1 KEDOKTERAN

Latar Belakang: Malnutrisi masih menjadi permasalahan di Indonesia meskipun terdapat tren penurunan angka malnutrisi dari tahun sebelumnya. Salah satu organ yang terkena dampak malnutrisi adalah ginjal karena dapat menghambat nefrogenesis dan menyebabkan penurunan kemampuan pertahanan ginjal terhadap radikal bebas. Perlakuan Unilateral Ureteral Obstruction (UUO) dapat menyebabkan model mengalami penyakit ginjal kronis yang keparahannya akan dihitung dengan mRNA TLR4 dan mRNA CD68 sebagai biomarker inflamasi. Tujuan Penelitian: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh diet rendah protein terhadap ekspresi mRNA TLR4 dan mRNA CD68 akibat cedera oksidatif pada mencit jantan galur Swiss model Unilateral Ureteral Obstruction (UUO) stadium akhir. Metode Penelitian: Menggunakan metode non-randomized quantitative dengan desain posttest with control group design dimana sampel yang digunakan adalah mencit galur Swiss berusia 2-3 bulan dengan berat 30-40 gram. Mencit akan diberi pakan diet rendah protein 10% dan 12% selama 30 hari untuk membuat kondisi malnutrisi kronis (kekurangan energi protein). Setelah itu diberi perlakuan UUO dan ditunggu selama 14 hari sebagai model dari gagal ginjal kronis. Setelah 14 hari pasca UUO, mencit model akan dikorbankan dan diambil ginjalnya untuk dilihat ekspresi mRNA TLR4 dan mRNA CD68 menggunakan metode RT-PCR yang dapat dijadikan sebagai biomarker inflamasi akibat UUO. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan metode one-way ANOVA. Hasil: Kelompok dengan perlakuan UUO menunjukkan ekspresi mRNA TLR4 yang lebih tinggi (0,949������±0,0031 vs. 0,850������±0,061; p>0,05) dibandingkan kelompok sham operation, dan kelompok UUO dengan diet rendah protein 10% menunjukkan ekspresi mRNA TLR4 yang lebih tinggi (0,994������±0,028 vs. 0,949������±0,031; p>0,05) dibandingkan dengan kelompok UUO yang diberikan diet normal. Kelompok mencit dengan diet rendah protein 12% menunjukkan ekspresi mRNA TLR4 hampir sama (0,945������±0,046 vs. 0,949������±0,031; p>0,05) dibandingkan dengan kelompok UUO yang diberikan diet normal. Sedangkan ekspresi mRNA CD68 pada kelompok UUO lebih tinggi (0,935������±0,024 vs. 0,831������±0,047; p>0,05) dibandingkan sham operation, dan kelompok UUO dengan diet rendah protein 10% (0,967������±0,033 vs. 0,935������±0,024; p>0,05) dibandingkan dengan kelompok UUO yang diberikan diet normal. Kelompok mencit dengan diet rendah protein 12% menunjukkan ekspresi mRNA CD68 yang hampir sama (0,924������±0,018 vs 0,935������±0,024; p>0,05) dengan kelompok UUO yang diberikan diet normal. Kesimpulan: Pemberian diet rendah protein menghasilkan ekspresi mRNA TLR4 dan CD68 yang lebih tinggi namun tidak signifikan pada mencit dengan unilateral ureteral obstruction.

Background: Malnutrition is still a problem in Indonesia despite a decrease in malnutrition from the previous year. One of the organs that is affected by malnutrition is the kidney because it can inhibit nephrogenesis and cause a decrease in the ability of the kidneys to defend against free radicals. Unilateral ureteral obstruction (UUO) treatment can cause a model to experience chronic kidney disease whose severity will be calculated using TLR4 mRNA and CD68 mRNA as inflammatory biomarkers. Objectives: The aim of this study was to examine the effect of a low diet on the expression of TLR4 mRNA and CD68 mRNA expression on oxidative injury in male Swiss mice with the final stage Unilateral Ureteral Obstruction (UUO) model. Methods: Using a non-randomized quantitative method with a posttest design with a control group design where the sample used was Swiss strain mice aged 2-3 months with a weight of 30-40 grams. Mice will be fed a diet low in protein 10% and 12% for 30 days to create a condition of chronic malnutrition (lack of protein energy). After that he was given UUO treatment and waited for 14 days as a model of chronic renal failure. After 14 days after UUO, the model mice were sacrificed and their kidneys were taken to see the expression of TLR4 mRNA and CD68 mRNA using the RT-PCR method which could be used as biomarkers of inflammation due to UUO. The data obtained were analyzed using one-way ANOVA method. Results: The UUO treatment group showed higher TLR4 mRNA expression (0.949 ������± 0.0031 vs. 0.850 ������± 0.061; p> 0.05) than the sham operation group, and the UUO group with a 10% low protein diet showed higher TLR4 mRNA expression (0.994 ������± 0.028 vs. 0.949 ������± 0.0031; p> 0.05) compared to the UUO group given the normal diet. The group of mice with a 12% low protein diet showed almost the same TLR4 mRNA expression (0.945 ������± 0.046 vs. 0.949 ������± 0.0031; p> 0.05) compared to the UUO group given a normal diet. Meanwhile, CD68 mRNA expression in the UUO group was higher (0.935 ������± 0.024 vs. 0.831 ������± 0.047; p> 0.05) than sham operation, and the UUO group with a low protein diet of 10% (0.967 ������± 0.033 vs. 0.935 ������± 0.024; p> 0.05) compared to the UUO group given the normal diet. The group of mice with a 12% low protein diet showed almost the same expression of CD68 mRNA (0.924 ������± 0.018 vs 0.935 ������± 0.024; p> 0.05) with the UUO group given the normal diet. Conclusion: Administration of a low protein diet resulted in higher expression of TLR4 and CD68 mRNA but not significantly in mice with unilateral ureteral obstruction.

Kata Kunci : diet rendah protein, Toll Like Receptor 4 (TLR4), Cluster of Differentiation 68 (CD68), unilateral ureteral obstruction (UUO), low diet protein