Skrining dan Uji Formasi Biofilm Bakteri Pembentuk Histamin pada Kupon Stainless Steel dan Polypropylene

IKA SAFITRI, Indun Dewi Puspita, S.P., M.Sc., Ph.D.

2020 | Skripsi | S1 TEKNOLOGI HASIL PERIKANAN

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan bakteri pembentuk histamin (BPH) dalam membentuk biofilm, formasi biofilm BPH pada kupon stainless steel 304 (SS304) dan polypropylene (PP), serta mengetahui pengaruh lama waktu inkubasi terhadap formasi biofilm. Penelitian ini dilakukan dengan cara skrining formasi biofilm 10 isolat BPH menggunakan metode Microtiter Plate Biofilm Assay. Formasi biofilm diwarnai dengan kristal violet 0,4% dan warna yang terbentuk diukur dengan spektrofotometer dengan panjang gelombang 570 nm. Nilai OD yang didapat selanjutnya digunakan untuk menentukan kemampuan formasi biofilm BPH menjadi non-biofilm producers, weak, moderate atau strong. Sejumlah 2 isolat BPH dengan kemampuan membentuk biofilm dan menghasilkan histamin tertinggi, ditambah dengan 1 isolat referensi Morganella morganii ATCC 25830 diuji kemampuan membentuk biofilm pada kupon SS304 dan PP dengan cara menghitung Colony Forming Units (CFU) pada suhu 30°C selama 3 hari, dilanjutkan dengan konfirmasi biofilm menggunakan Scanning Electron Microscope (SEM). Hasil uji skrining formasi biofilm pada 10 isolat BPH menunjukkan bahwa 5 diantaranya strong, 3 moderate dan 2 weak. Klebsiella sp. (CK13.2) (isolat penghasil histamin tertinggi) dan M. morganii (TK7) (isolat penghasil biofilm tertinggi) dipilih untuk pengujian tahap selanjutnya. Uji formasi biofilm pada kupon SS304 dan PP menunjukkan bahwa isolat M.morganii ATCC 25830, Klebsiella sp. (CK13.2) and M.morganii (TK7) mampu melekat dan membentuk biofilm pada kedua kupon dengan preferensi PP untuk isolat Klebsiella sp. (CK13.2) dan M. morganii (TK7), sedangkan isolat referensi, M. morganii ATCC 25830 memiliki preferensi yang sama untuk membentuk biofilm pada kedua kupon. Jumlah sel biofilm ketiga isolat tersebut juga bertambah seiring bertambahnya waktu inkubasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa BPH berpotensi menjadi kontaminan di tempat penanganan maupun pengolahan perikanan karena mampu membentuk biofilm terutama pada material berbahan stainless steel dan polypropylene.

The study aimed to analyze the ability of histamine-forming bacteria (HFB) to form a biofilm, biofilm formation of HFB on stainless steel 304 (SS304) and polypropylene (PP) coupons, and to determine the effect of time incubation on biofilm formation. This study was carried out by screening the biofilm formation of 10 HFBs using the Microtiter Plate Biofilm Assay method. The biofilm formation was stained with 0.4% crystal violet and the color formed was assayed with a spectrophotometer at wavelength 570 nm. The OD value was used to determine the biofilm formation capability of HFB into non-biofilm producers, weak, moderate, and strong. A total of 2 HFB isolates with the highest ability to form biofilm and produce the highest histamine, plus 1 reference isolate Morganella morganii ATCC 25830 were tested for their ability to form biofilm on SS304 and PP coupons by counting the number of Colony Forming Units (CFU) at 30°C for 3 days, biofilm was confirmed using Scanning Electron Microscope (SEM). The screening result of biofilm formation on 10 HFB isolates shows that 5 of them were strong, 3 were moderate and 2 were weak biofilm producers. Klebsiella sp. (CK13.2) (the highest histamine producer) and M. morganii (TK7) (the highest biofilm producer) were chosen for the biofilm formation assay on the different surface materials. Biofilm formation test on SS304 and PP coupons shows that M. morganii ATCC 25830, Klebsiella sp. (CK13.2) and M. morganii (TK7) can adhere and form biofilm on both coupons, with a preference on PP for Klebsiella sp. (CK13.2) and M. morganii (TK7) and preference on both for M. morganii ATCC 25830. The bacteria number recovered from the biofilm increased along with the increase in incubation time. Overall these results suggest that HFB is potential as a contaminant in fish handling and processing sites because it can form biofilm, especially on stainless steel and polypropylene material.

Kata Kunci : bakteri pembentuk histamin, skrining, fomasi biofilm, stainless steel, polypropylene