Perbandingan aktivitas in vivo dan in vitro nitrat reduktase pada tiga kultivar padi (Oryza sativa L.)

NUR, Anizah, Dr. Hari Hartiko, MSc

2002 | Tesis | S2 Biologi

Penelitian ini bertujuan untuk menentukan perbandingan antara aktivitas in vivo dan m viiro dan perbandingan tanggapan tiga kultivar padi (Oryzu sutivu L.) yang diinduksi oleh kenaikan kadar N03- terhadap aktivitas nitrat reduktase serta mengembangkan metode uji aktivitas enzim nitrat reduktase dengan teknik elektroforesis. Penelitian ddakukan dalam rumah kaca dengan menggunakan rancangan acak lengkap faktorial(3x6) terdiri dari faktor pertama berupa perbedaan kultivar (IR-64, Memberamo dan Cisadane) dan faktor kedua berupa perbedaan kadar nitrat dengan enam aras konsentrasi 0,OO ; 0,005 ; 0,O 1 ; 0,02 ; 0,05 dan 0,lO M. Padi ditumbuhkan di media tanah yang diberi pupuk dasar (TSP, KC1 dan Urea). Larutan nitrat diberikan dua hari sekali (sampai tergenang 2 cm) selama 15 hari. Aktivitas nitrat reduktase diukur dengan tiga metode pengukuran yaitu in vivo, in vitro dan teknik elektroforesis. Data dianalisis dengan anava dilanjutkan dengan BNT pada tingkat kepercayaan 99 %. Aktivitas in vivo dan in vitro nitrat reduktase menunjukkan pola hasil pengukuran yang sama. Aktivitas nitrat redubse yang paling tinggi ditunjukkan oleh kultivar Memberamo, yang kedua IR-64, dan yang paling rendah Cisadane. Pada kultivar IR-64 aktivitas nitrat reduktase yang paling tinggi ditunjukkan pada perlakuan yang tidak diberi larutan nitrat, dan pada Memberamo dan Cisadane aktivitas nitrat reduktase yang paling tinggi ditunjukkan pada perlakuan yang diberi nitrat 0,005 M. Aktivitas in vztro nitrat reduktase lebih tinggi dari pada aktivitas in vivo nitrat reduktase. Pengukuran dengan teknik elektroforesis gel poliakrilamid 7% non-SDS dapat menunjukkan adanya aktivitas nitrat reduktase tetapi belum bisa menentukan berat molekulnya.

The aims of this study were to determine the differance between tn vivo and in vitro methods and the comparison of the response of three rice cultivars (Ory--u sufrvu L.) induced by the increase in NO3' content to the nitrate reductase activities and to develop method to quantity nitrate reductase enzyme activities using polyacrylamide gel electrophoresis techque. The experiment was conducted in the green house using 3 x 6 completely randomized in factorial design three cultivars (IR-64, Memberamo and Cisadane) and six concentration 0.00, 0.005, 0.01, 0.02, 0.05 and 0.10 M. The three cultivars of rice were cultivated in the medium of soil fertilized using basic fertilizers (TSP, KCl and Urea). The nitrate solution was given every two days up to 15 days. The nitrate reductase activities was assessed using three methods, viz. In vivo, in vitro and electrophoresis ones. The data was analyzed using anava then with BNT (0 01) at the confidence level 99%. The in vivo and in vitro activities of the nitrate reductase showed similar patterns. The highest nitrate reductase activity was demonstrated by Memberamo cultivar, the second was IR-64, and the lowest was Cisadane. In addition the IR- 64 cultivar has the hghest nitrate reductase activity at 0.00 M nitrate content, Memberamo and Cisadane cultivars the highest nitrate reductase activity at 0.005M content. The in vitro activity of nitrate reductase was higher than the m vivo activity of nitrate reductase. The assessment using non-SDS 7% polyacrylamide gel electrophoresis technique could be used to exhibit the presence of the nitrate reductase activity.

Kata Kunci : Bioteknologi,Eksperimen in Vivo dan in Vitro,Tiga Kultivar Padi, in vivo, in vitro, nitrute reductuse , Oryzu sutivu L.