Efek Ekstrak Daun Suji (Pleomele angustifolia N.E. Brown) pada Aktivitas Fagositosis Netrofil terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 in vitro

RIZKY LUTHFIANA P, Dr. drg. Juni Handajani, M.Kes., Ph.D. ; Dr. drg. Alma Linggar Jonarta, M.Kes.

2020 | Skripsi | S1 KEDOKTERAN GIGI

Netrofil merupakan salah satu jenis sel darah putih yang berfungsi untuk fagositosis yang berperan ketika benda asing memasuki hospes. Daun Suji (Pleomele angustifolia N.E. Brown) memiliki kandungan flavonoid yang dapat berperan menjaga kesehatan manusia dan mengurangi risiko dari berbagai penyakit. Pseudomonas aerugonisa merupakan bakteri Gram negatif yang dapat dijumpai di saliva, mukosa oral dan plak gigi. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui efek ekstrak daun suji terhadap kemampuan netrofil dalam memfagositosis bakteri P. aeruginosa ATCC 9027. Kultur netrofil dalam penelitian berasal dari darah vena sukarelawan manusia yang dimasukkan ke dalam plat 24 sumuran yang berisi coverslip. Kultur netrofil dibagi menjadi kelompok kontrol negatif (RPMI komplit), kontrol positif (Imboost®) dan perlakuan (ekstrak daun suji konsentrasi 10 μg/ml, 25 μg/ml and 50 μg/ml). Uji fagositosis dilakukan dengan cara menginkubasi kultur netrofil selama 4 jam pada inkubator CO2 dan dicuci dengan RPMI. Pseudomonas aeruginosa ditambahkan sebanyak 200 μl/sumuran dan diinkubasi kembali selama 30 menit, selanjutnya dilakukan pewarnaan Giemsa 10% selama 15 menit. Indeks Fagositosis ditentukan dengan menghitung jumlah bakteri yang difagositosis oleh netrofil pada coverslip yang diamati dengan mikroskop perbesaran 1000x. Data dianalisis dengan one-way ANOVA dilanjutkan dengan Post Hoc LSD test. Hasil analisis statistik menunjukkan perbedaan yang signifikan (p ≤ 0,05) antar kelompok. Kesimpulan penelitian ini adalah ekstrak daun meningkatkan aktivitas fagositosis netrofil. Peningkatan kemampuan netrofil dalam fagositosis P. aeruginosa ATCC 9027 seiring dengan peningkatan konsentrasi ekstrak daun suji.

Neutrophil is one of white blood cells that acts for phagocytosis playing a role when a foreign thing enters the hospes. Suji leaves (Pleomele angustifolia N.E. Brown) contain flavonoid which maintain human health and reduce the risk of various disease. Pseudomonas aeruginosa is a Gram negative bacterium that can be found in saliva, oral mucosa and dental plaque. This study aimed to determine the effect of Suji leaves extract on the neutrophil ability in the phagocytosis process of P. aeruginosa ATCC 9027 bacteria. The culture of neutrophil in the study was collected from voluntary human venous blood inserted into a 24 well plates that contained coverslip. The culture of neutrophil were divided into negative control group (complete RPMI), positive control group (Imboost®) and treatment groups (concentrations of suji leaf extract were 10 μg/ml, 25 μg/ml and 50 μg/ml). Phagocytosis test was carried out by incubating neutrophil cultures for 4 hours on a CO2 incubator and washed with complete RPMI. Two hundred microliters per well of Pseudomonas aeruginosa was added, re-incubated for 30 minutes, then stained with Giemsa 10% for 15 minutes. Phagocytosis index was determined by counting the number of bacteria phagocytosed by neutrophils on a coverslip observed with a 1000x magnification microscope. Data were analyzed by one-way ANOVA followed by Post Hoc LSD test statistical analysis showed significant differences (p ≤ 0.05) between groups. The conclusion of this study is the leaf extract increases the activity of neutrophil phagocytosis. The increase of neutrophil ability in phagocytosis of P. aeruginosa ATCC 9027 along with the increase in the concentration of suji leaf extract.

Kata Kunci : daun suji, Pseudomonas aeruginosa, netrofil, indeks fagositosis