Efek Sinergistik Senyawa Kurkumin Analog, Pentagamavunon-0 (PGV-0) dengan Doxorubicin pada Sel HCC 1954: Kajian Keterkaitan Antara Apoptosis, ROS dan Senescence

SONIA META ANGRAINI, Prof. Dr. Edy Meiyanto, M.Si., Apt.; Dr. rer. nat. Adam Hermawan, M.Sc., Apt.

2019 | Tesis | MAGISTER BIOTEKNOLOGI

Senescence menghambat proliferasi sel kanker dan apoptosis berperan dalam mengurangi populasi sel kanker. Diketahui bahwa reactive oxygen species (ROS) memiliki peran dalam menginduksi senescence dan apoptosis. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efek sitotoksik, induksi apoptosis, induksi senescence dan pengaruh ROS senyawa PGV-0 pada sel kanker payudara dengan karakteristik HER2- positif, HCC 1954. Uji sitotoksik yang dilakukan dengan MTT assay menunjukkan bahwa senyawa PGV-0 memiliki efek sitotoksik semakin kuat seiring dengan peningkatan dosis (dose-dependent manner) dengan nilai IC50 sebesar 39 uM. Perlakuan dengan sub-dosis IC50 yang dikombinasikan dengan doxorubicin menunjukkan efek peningkatan sitotoksik. Uji apoptosis menunjukkan bahwa senyawa PGV-0 dan kombinasinya dengan doxorubicin mampu menginduksi apoptosis. Pengujian senescence menggunakan SA-Beta-Galactosidase assay menunjukkan bahwa senyawa PGV-0 pada perlakuan tunggal dengan konsentrasi setengah IC50 mampu menginduksi senescence dengan persentase cell senescent sebesar 15%. Perlakuan kombinasi PGV-0 pada dosis setengah IC50 dengan doxorubicin 100 nM mampu menginduksi senescence dengan persentase cell senescent sebesar 25%. Uji level ROS seluler pada penelitian ini menunjukkan bahwa senyawa PGV-0 dan kombinasinya dengan doxorubicin meningkatkan level ROS seluler. Kesimpulan penelitian ini antara lain senyawa PGV-0 memiliki efek sitotoksik, meningkatkan sitotoksik doxorubicin, menginduksi apoptosis, menginduksi senescence dan meningkatkan ROS pada sel HCC 1954, serta berpotensi dikembangkan sebagai agen ko-kemoterapi.

Senescence inhibits cancer cell proliferation and apoptosis causing in cancer regression. Reactive oxygen species (ROS) play role in senescence and apoptosis induction on cancer cell. The aim of this study is to examine the cytotoxic effects of PGV-0 on breast cancer cells with HER2-expressing cell, HCC 1954, emphasizing on apoptosis induction, senescence induction and ROS generation. Under MTT assay PGV-0 performed cytotoxic effect with IC50 value of 39 uM. In IC50 sub-doses treatment PGV-0 enhanced cytotoxic effect of doxorubicin. The assessment of apoptosis using flowcytometry showed that PGV-0 and combination with doxorubicin induced apoptosis. The senescence test showed that PGV-0 at a single concentration induced senescence by 15% senescent positive cells. The combination treatment of PGV-0 with doxorubicin 100 nM induced senescence by 25% senescent positive cells. ROS generation test showed that PGV-0 and its combination with doxorubicin increased ROS level. In summary, PGV-0 showed cytotoxic effect, increasing cytotoxic doxorubicin leads to inducing apoptosis, inducing senescence and increasing ROS on HCC 1954 cells. Therefore, PGV-0 performed a potential agent to be developed as a co-chemotherapeutics agent.

Kata Kunci : Pentagamavunon (PGV-0), HCC 1954, Senescence, Apoptosis, ROS