Efek Induksi Senescence Minyak Biji Jinten Hitam (Nigella sativa L.) pada Sel Kanker Payudara MCF7/HER2

LISYARATIH ANGGRIANI, Dr. Riris Istighfari Jenie, M.Si., Apt

2019 | Skripsi | S1 FARMASI

Terapi induksi senescence mulai dikembangkan untuk meningkatkan sitotoksisitas dan menurunkan resistensi agen kemoterapi kanker payudara. Minyak jinten hitam (MJH) berpotensi sebagai agen penginduksi senescence oleh karena salah satu kandungan utamanya yaitu α-pinene terbukti dapat menginduksi peningkatan reactive oxygen species (ROS) sehingga berimplikasi pada terjadinya senescence sel kanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek induksi senescence MJH pada sel kanker payudara dengen ekspresi berlebihan HER2 (MCF7/HER2). Dalam penelitian ini, dilakukan hidrodistilasi untuk memperoleh MJH. Kemudian, dilakukan identifikasi kandungan fitokimia MJH dengan metode gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Selanjutnya, dilakukan uji sitotoksik MJH pada sel MCF7/HER2 dengan trypan blue exclusion assay untuk mengetahui profil sitotoksisitas MJH terhadap sel MCF7/HER2. Uji senescenceassociated-β-galactosidase (SA-β-galactosidase) staining dilakukan untuk mengobservasi efek MJH terhadap senescence sel MCF7/HER2 dibandingkan dengan kontrol sel dan kontrol positif (perlakuan doksorubisin tunggal). Rendemen yang diperoleh dari hidrodistilasi MJH adalah sebesar 0,54%, dengan kandungan utama p-cymene (48,03%), dihydrocarveol (11,39%), dan αpinene (11,29%). Berdasarkan uji sitotoksik, diketahui bahwa MJH bersifat sitotoksik moderat terhadap sel MCF-7/HER2 dengan IC50 sebesar 306 µg/mL. Hasil SA-ꞵ-galactosidase staining menunjukkan bahwa MJH memiliki aktivitas induksi senescence dengan peningkatan persentase senescent cell sebesar 3% dibandingkan dengan kontrol sel, namun potensinya lebih rendah dibandingkan kontrol positif. Sementara, perlakuan kombinasi MJH dan doksorubisin terbukti dapat meningkatkan senescent cell sebesar 3-7% dibandingkan kontrol positif. Dengan demikian, MJH berpotensi sebagai agen penginduksi senescence pada sel kanker payudara dengan ekspresi berlebihan HER2.

Senescence-induced therapy is more improved recently in order to increase cytotoxicity and reduce resistance of breast cancer chemotherapy agents. Black cumin oil (MJH) potential as a senescence-inducing agent because one of its major compound, α-pinene has been shown to be able to induce an increase of reactive oxygen species (ROS) which implicate to the senescence phenomenon in cells. This study aims to explore senescence-inducing activity of MJH in HER2overexpressed breast cancer cells (MCF7/HER2). In this study, hydrodistillation was carried out to obtain MJH. Then, the identification of MJH phytochemical content was carried out by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) method. MJH cytotoxic assay was carried out on MCF7 / HER2 cells with trypan blue exclusion assay to determine the cytotoxicity profile of MJH against MCF7/HER2 cells. Senescence-asscociatedβ-galactosidase (SA-β-galactosidase) staining assay was done to observe the effect of MJH on MCF7/HER2 senescent cell compared to control cell and positive control (a single treatment of doxorubicin). The yield obtained from the hydrodistillation was 0.54% of MJH, with the main compound was p-cymene (48.03%), dihydrocarveol (11,39%), and α-pinene (11,29%).. Based on cytotoxic assay, MJH proved to have weak cytotoxicity profile against MCF-7/HER2 cells with an IC50 of 306 μg/mL. The results of SA-βgalactosidase staining showed that MJH had senescence-inducing activity by increasing 3% of senescent cell precentage compared to control cell, but the result was lower than positive control. Meanwhile, the combination of MJH and doxorubicin has been shown to increase 3-7% of senescence cell precentage compared to positive control. Thus, MJH potential to be developed as senescenceinducing agent for the treatment of HER2-overexpressed breast cancer.

Kata Kunci : minyak jinten hitam (MJH), sel MCF7/HER2, senescence / black cumin oil (MJH), MCF7/HER2 cell, senescence