ANALISIS EKSPRESI GEN Foxl2 DAN Sry PADA SPERMATOZOA KAMBING PERANAKAN ETAWA HASIL SEPARASI MENGGUNAKAN PERCOLL GRADIENT METHOD

M. FAHMY AVICENNA, Dr. Widodo, SP., M.Sc. ; Dr.agr. Ir. Siti Darodjah Rasad, MS.

2018 | Tesis | MAGISTER BIOTEKNOLOGI

Kambing Peranakan Etawa merupakan ternak dwiguna yang sangat diminati oleh masyarakat Indonesia, sehinga stok ternak jantan dan betina pun sangat dibutuhkan. Separasi spermatozoa merupakan salah satu metode teknologi reproduksi dalam menentukan jenis kelamin offspring yang bertujuan untuk meningkatkan populasi ternak yang sesuai dengan tujuan pemeliharaan. Penelitian ini dilakukan untuk menganalisis ekspresi gen Foxl2 dan Sry berdasarkan perbedaan antara hasil separasi pada fraksi atas dan bawah pada masing-masing proporsi spermatozoa X dan Y Kambing PE hasil separasi menggunakan Percoll Gradient Method . Metode yang dilakukan yakni menggunakan 3 ejakulat Kambing Peranakan Etawa dengan menggunakan metode Percoll Gradient. Layer percoll yang digunakan sebanyak 3 layer (2 layer percoll + 1 semen). Perhitungan proporsi spermatozoa X dan Y berdasarkan pengukuran luas kepala spermatozoa dan perhitungan kuantitas ekspresi gen Foxl2 dan Sry menggunakan metode Livak. Analisis data menggunakan Independent sample t-test dengan tingkat signifikansi 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara proporsi X dan Y pada masing-masing fraksi dan terdapat upregulation gen Foxl2 dan Sry pada spermatozoa fraksi bawah masing-masing sebesar 4,56 dan 2,03 meskipun tidak signifikan. Fenomena downregulation gen Foxl2 dan Sry terjadi pada spermatozoa fraksi atas sebesar -1,56 dan -3,89 dengan tidak terdapat perbedaan yang signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa Percoll Gradient Method dengan konsentrasi 60% dan 70% tidak menyebabkan pengaruh yang berarti pada proporsi spermatozoa X dan Y serta dalam kuantitas ekspresi gen Foxl2 dan Sry pada kedua fraksi.

Etawa Crossbred Goat is an dual-purpose animal that as an useful for any purposes of Indonesian people. Because of that, stock of male and female goat has a high demand along with Indonesian population growth. Sperm separation is an Animal Reproduction Technology to determine offspring�s sex. Foxl2 and Sry has an important role in determining sex on female and male, respectively. The aim of this research was conducted to Foxl2 and Sry gene expression based on separated spermatozoa X-and Y-bearing sperm proportions by spermatozoa separation using Percoll Gradient Method. This method use 3 layers (2 layers for Percoll Medium and 1 layer for fresh semen). Calculation of X and Y-bearing sperm proportion based on measurment of sperm�s head area and quantity calculation of Foxl2 and Sry gene expression using Livak method. Data analysis using Independent sample t-test with significance level of 95%. The result show that there is no significant difference between X and Y-bearing sperm proportion of each fractions. Upregulation and downregulation of gene expression phenomenon was seen in this study. Upregulation value of Foxl2 and Sry gene occurred in lower fraction was 4,56 and 2,03 times, respectively and also the downregulation value of each genes occurred in upper fraction was -1,56 and -3,89, respectively. This indicates Percoll Gradient Method using 60% and 70% concentration was no meaningful to the X and Y-bearing sperm proportions and also to Foxl2 and Sry gene expression of both fraction.

Kata Kunci : : Separasi spermatozoa, Percoll Gradient, ekspresi gen, gen Foxl2, gen Sry