PENGARUH PEMBERIAN ASAM KLOROGENAT PADA MENCIT SWISS WEBSTER DENGAN MODEL FIBROSIS GINJAL: Kajian terhadap Fraksi Area Miofibroblas, Ekspresi mRNA BMP-7, dan HGF

MOHAMMAD SALMAN, Dr. dr. Dwi Cahyani Ratna Sari, M. Kes., PA(K).; dr. Junaedy Yunus, MSc., Ph.D

2018 | Tesis | MAGISTER ILMU BIOMEDIK

Latar belakang: Fibrosis ginjal adalah keadaan terakumulasinya miofibroblas pada area interstisial dari tubulus. Keadaan fibrosis ginjal dapat ditemukan pada penyakit ginjal kronis. Unilateral Ureteral Obstruction (UUO) merupakan model representatif untuk fibrosis ginjal. Pada kondisi penyakit ginjal tubuh akan melakukan kompensasi dengan menghasilkan antifibrotik berupa Bone Morphogenetic Protein-7 (BMP-7) dan Hepatocyte Growth Factor (HGF). Asam klorogenat diketahui memiliki efek renoprotektif dan antifibrotik. Tujuan: Mengkaji pengaruh asam klorogenat terhadap mencit model fibrosis ginjal yang diinduksi Unilateral Ureteral Obstruction (UUO). Metode: Penelitian ini adalah penelitian kuasi eksperimental dengan rancangan posttest only control group dengan subjek 25 ekor mencit galur Swiss Webster jantan dewasa yang dibagi dalam 5 kelompok yaitu kelompok SO (Sham Operation/kontrol), U7 (UUO hari ke-7), U14 (UUO hari ke-14), UC7 (UUO+asam klorogenat hari ke-7) dan UC14 (UUO+asam klorogenat hari ke-14). Diperiksa fraksi area miofibroblas dengan pewarnaan IHC menggunakan antibodi alfa-SMA. Ekspresi mRNA BMP-7 dan mRNA HGF diperiksa dengan RT-PCR. Data yang didapat dikuantifikasi dengan perangkat lunak ImageJ, kemudian diolah dengan SPSS. Hasil: Fraksi area miofibroblas pada kelompok UC7 lebih rendah daripada kelompok U7 (p=0,009), dan pada kelompok UC14 lebih rendah daripada kelompok U14 (p=0,009). Ekspresi mRNA BMP-7 pada kelompok UC7 lebih tinggi daripada kelompok U7 (p=0,044), dan pada kelompok UC14 lebih tinggi daripada kelompok U14 (p=0,016). Ekspresi mRNA HGF pada kelompok U7 tidak berbeda bermakna dengan kelompok UC7, ekspresi mRNA HGF pada kelompk UC14 lebih tinggi daripada kelompok U14 (p=0,004). Kesimpulan: Pemberian asam klorogenat dapat mencegah fibrosis ginjal pada mencit Swiss Webster dengan model UUO melalui jalur antifibrotik.

Background: Renal fibrosis is a condition of myofibroblasts accumulation in tubular interstitial area. Renal fibrosis can be found in chronic kidney disease. Unilateral Ureteral Obstruction is a representative model for renal fibrois. Body will compensate the condition in kidney disease by producing antifibrotic substances such as Bone Morphogenetic Protein-7 (BMP-7) and Hepatocyte Growth Factor (HGF). Chlorogenic acid is known to have renoprotecive and antifibrotic properties. Aim: To evaluate the effects of chlorogenic acids on Unilateral Ureteral Obstruction (UUO)-induced renal fibrosis mice model. Method: This study is a quasi experimental with post test only with control group design. The subjects were 25 mature male Swiss Webster mice which were divided into 5 groups, SO (Sham Operation/Control) group, U7 (day-7 UUO+ aquadest), U14 (day-14 UUO+ aquadest), UC7 (day-7 UUO + chlorogenic acid), and UC14 (day-14 UUO + chlorogenic acid). Myofribroblast fractional area was assessed using antibody alfa-SMA IHC staining. BMP-7 and HGF mRNA expressions were assessed using RT-PCR. Data, obtained from the study was quantified using ImageJ and analyzed using SPSS. Results: Myofibroblast fractional area in UC7 group was lower than myofibroblast fractional area in U7 group (p=0.009). Myofibroblast fractional area in UC14 group was lower than in U14 group (p-0.009). BMP-7 mRNA expression in UC7 group was higher than BMP-7 mRNA expression in U7 (p=0.044) and BMP-7 mRNA expression in UC14 group was higher than in U14 group (p=0.016). HGF mRNA expression in U7 was not significantly different to HGF mRNA expression in UC7. HGF mRNA expression in UC14 was higher than HF mRNA expression in U14 (p=0.004). Conclusion: Chlorogenic acid administration could prevent renal fibrosis in UUO Swiss Webster mice model through antifibrotic pathway.

Kata Kunci : Unilateral ureteral obstruction (UUO), miofibroblas alfa-SMA, asam klorogenat, Bone Morphogenetic Protein-7 (BMP-7), Hepatocyte Growth Factor (HGF), Unilateral ureteral obstruction (UUO), alfa-SMA myofibroblast, chlorogenic acid, Bone Morphogenetic Prot