Induksi Embrio Somatik pada Kultur In Vitro Anggrek Dendrobium nobile Lindl.

DZIKRINA NURUNISA, Dr. Endang Semiarti, M.S., M.Sc.

2018 | Skripsi | S1 BIOLOGI

Dendrobium nobile Lindl. merupakan jenis anggrek bernilai ekonomi tinggi karena dapat dimanfaatkan sebagai tanaman hias dan tanaman obat, sehingga anggrek ini banyak dieksploitasi dan menjadi langka. Oleh karena itu, perlu usaha untuk memperbanyak tanaman ini, salah satunya dengan mikropropagasi melalui embriogenesis somatik. Zat pengatur tumbuh 1-naphtalenacetic acid (NAA) dan thidiazuron (TDZ) mampu menginduksi embrio somatik pada beberapa spesies tumbuhan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui perubahan morfologis eksplan D.nobile setelah diinduksi dengan NAA dan TDZ tunggal maupun dalam kombinasi, serta mengetahui kemampuan NAA dan TDZ dalam menginduksi embrio somatik pada kultur in vitro D. nobile. Eksplan daun D.nobile dilukai ujung dan pangkalnya, sebagian sampel juga dilukai di bagian tengah daun, eksplan ditumbuhkan pada medium Vacin and Went (VW) dengan kombinasi NAA(0;1;1,5;2) mg/L dan TDZ (0;1;1,5;2) mg/L. Pertumbuhan kultur daun diamati setiap minggu selama 8 minggu. Hasil menunjukkan bahwa setelah induksi dengan NAA dan TDZ, pembentukan propagul inisiasi embrio somatik (ES) terdapat pada NAA:TDZ (0:1), (0:2), (1:0), (1,5:1,5), (1,5:2), dan (2:1,5) mg/L (dengan perlukaan tengah), serta VW 0, NAA:TDZ (1,5:1) dan (1,5:1,5) mg/L (tanpa perlukaan tengah), sedangkan persentase tertinggi yaitu pada perlakuan NAA tunggal atau NAA:TDZ (1:0) mg/L dengan perlukaan tengah (30%). Di sisi lain, pembentukan protocorm-like body (PLB) hanya terdapat pada perlakuan TDZ tunggal atau NAA:TDZ (0:1) mg/L dengan perlukaan tengah. Morfologi propagul inisiasi ES dicirikan dengan terbentuknya tonjolan-tonjolan kecil pada permukaan daun, sementara ES yang sudah berkembang menjadi PLB berbentuk bulat dengan permukaan tidak halus, berwarna kuning kehijauan. Struktur anatomi dari penampang lintang PLB yang bersifat embrional dicirikan dengan adanya sel-sel yang berukuran kecil, sitoplasma terpulas pekat, inti besar dan terlihat tanda pembelahan sel.

Dendrobium nobile Lindl. is a high economic valued orchid species because it can be used as an ornamental and medicinal plant, so this plant is widely exploitated and threatened to be extinct. Efforts should be conducted to reproduce or propagate this plant. Micropropagation through somatic embryogenesis is one of promising methods to propagate this orchid. Plant growth regulators (PGR) such as 1-naphtalenacetic acid (NAA) and thidiazuron (TDZ) are able to induce somatic embryos in some plant species. The objective of this research is to find out the morphological changes of the explants after being induced with NAA and TDZ alone or in combination, and to understand the ability of NAA and TDZ in inducing somatic embryo in in vitro cultures of D. nobile. The explants used were 1.5-year-old leaves with wounded tips and bases, some samples were also wounded in the center of the leaves, then the explants were grown on Vacin and Went (VW) medium with combination of (0; 1; 1,5; 2) mg/L NAA and (0; 1; 1,5; 2) mg/L TDZ. The development of the leaf cultures were analyzed every week for 8 weeks. The results showed that after induction with NAA and TDZ, somatic embryo (SE) initiation propagules were formed on NAA:TDZ (0:1), (0:2), (1:0), (1,5:1,5), (1,5:2), and (2:1,5) mg/L (with central wound), and VW 0, NAA:TDZ (1,5:1) and (1,5:1,5) mg/L (without central wound), menwhile the highest percentage was on a single NAA treatment or NAA:TDZ (1:0) mg/L with central wound (30%). On the other hand, protocorm-like body (PLB) were produced only by a single TDZ treatment or NAA:TDZ (0:1) mg/L without central wound. Morphology of SE initiation propagules were characterized as small protrusions from the leaf surface, while the developed SE becomes a round-shape PLB with rough surface, and the colour is greenish yellow. Anatomical structure of the cross section of the PLB showed that the cells consist of embryonic cells which have distinct characteristics of small size of cells, heavy-stained cytoplasm, large nuclei and visible marks of cell division.

Kata Kunci : Dendrobium nobile, Embriogenesis Somatik, NAA, PLB, TDZ