PENGARUH PERUBAHAN FREKUENSI PENGUMPANAN SUBSTRAT LIMBAH BUAH MELON TERHADAP KOMPOSISI BAKTERI PADA FERMENTOR BIOHIDROGEN

ANTARINI A.A. ARSYAD, Dr. Ir. Sarto, M.Sc.; Ir. Donny Widianto, Ph.D.

2018 | Tesis | S2 Bioteknologi

Jenis, jumlah dan waktu pengumpanan substrat dalam proses fermentasi biohidrogen menggunakan inokulum campuran dapat mempengaruhi komposisi bakteri penghasil biohidrogen dan bakteri pendekomposisi substrat organik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perubahan komposisi bakteri penghasil biohidrogen pada pengaruh perubahan frekuensi pengumpanan substrat limbah organik. Substrat yang digunakan dalam penelitian ini adalah limbah buah melon dengan inokulum campuran yaitu limbah buah, kotoran sapi dan limbah tahu. Tahap produksi biohidrogen dari penelitian sebelumnya dilakukan pada fermentor jenis reaktor tangki berpengaduk volume kerja 3L dengan komposisi inokulum campuran sebanyak 300 mL, medium produksi sebanyak 1800 mL dan substrat limbah buah melon sebanyak 900 mL. Reaktor dioperasikan dengan variasi pengumpanan satu kali dan 3 kali sehari (selama satu pekan untuk satu jenis variasi). Pengambilan sampel dilakukan pada pengumpanan satu kali sehari (hari ke-5, 6 dan 7 saat pengumpanan 1 liter tiap 24 jam) dan saat pengumpanan tiga kali sehari (hari ke-12, 13 dan 14 tiap 8 jam dengan total 1 liter). Selanjutnya dihitung jumlah sel bakteri menggunakan Petroff Hausser Counting Chamber dan dianalisis komposisi bakteri dengan menggunakan metode RISA dan T-RFLP dengan pemotongan enzim MspI dan BsuRI. Hasil penelitian menunjukkan pengumpanan substrat menyebabkan perubahan terhadap komposisi bakteri penghasil biohidrogen dan bakteri pendekomposisi. Namun, bakteri yang teridentifikasi yang paling melimpah dari hasil pemotongan menggunakan enzim MspI maupun BsuRI pada semua sampel adalah Streptomyces, Bacillus dan Clostridium.

The type, amount and timing of feeding the substrate in a fermentation process using inoculum mixture biohidrogen can influence the composition biohidrogen bacteria and bacterial decomposition of organic substrates. This study aims to determine the changes in the composition of the bacteria producing the effect of changing frequency biohidrogen feeding organic waste substrate. The substrate used in this study is a waste of melon with a mixture of inoculum that fruit waste, cow dung and waste out. Biohydrogen production stage of previous research conducted in a stirred tank reactor type fermentor working volume 3L with the composition of the mixture of 300 ml inoculum, medium production by 1800 mL and substrate waste as much as 900 mL melon. The reactor was operated with a variety of feeding one and three times a day (for one week for one type of variation). Samples were taken at the feed once a day (day 5, 6 and 7 when the feed 1 liter every 24 hours) and when feeding three times a day (day 12, 13 and 14 every 8 hours for a total of 1 liter). Then calculated the number of bacterial cells using a Petroff Hausser Counting Chamber and analyzed the bacterial composition using the RISA and T-RFLP with enzyme cutting MspI and BsuRI. The results showed the feed substrate causes changes to the composition of bacteria and bacterial decomposition biohidrogen. Bacteria were identified using two different restriction enzymes (MspI and BsuRI) produce identification results are the same, but with the abundance of different bacteria. Bacteria are abundant in all samples is Streptomyces, Bacillus and Clostridium.

Kata Kunci : Biohidrogen, pengumpanan, komposisi bakteri, RISA, T-RFLP