ANALISIS CEMARAN BABI PADA BAKSO DI PASARAN DENGAN METODE POLYMERASE CHAIN REACTION-RESTRICTION FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISM(PCR-RFLP) ANALYSIS OF PORCINE CONTAMINANT ON COMMERCIAL MEATBALLS BY POLYMERASE CHAIN REACTION-RESTRICTION FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISM (PCR-RFLP); METHOD

DWI HAPSARI SEPTIANINGTYAS, Tri Joko Raharjo

2011 | Skripsi | PROGRAM STUDI KIMIA

Telah dilakukan analisis cemaran babi dengan Polymerase Chain Reaction- Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) pada sampel bakso. Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan metode uji cemaran babi pada bakso berbasis uji DNA yang diharapkan dapat digunakan sebagai dasar sertifikasi halal bakso. Metode yang dikembangkan menggunakan pendekatan analisis DNA dari gen sitokrom b (cyt b) DNA mitokondria yang diamplifikasi PCR menggunakan primer spesifik, yaitu primer forward L14841 (5’-CCATCCAACATCTCAGCATGATGA AA-3’) dan primer reverse H15149 (5’-GCCCCTCAGAATGATATTTGTCCTCA– 3’) (posisi urutan 69-428 pada gen) menghasilkan fragmen DNA berukuran 359 pb. RFLP dilakukan dengan membandingkan pola pemotongan fragmen hasil PCR menggunakan enzim restriksi BseDI dan BamHI. Validasi metode dilakukan dengan melakukan uji spesifitas dan sensitivitas metode. Aplikasi metode dilakukan dengan menganalisis bakso di supermarket, pasar tradisional dan warung. Hasil amplifikasi PCR terhadap DNA hasil isolasi dari bakso menghasilkan fragmen 359 pb. RFLP terhadap DNA bakso yang mengandung babi menunjukkan adanya pemotongan fragmen hasil PCR menjadi 131 dan 228 pb dengan enzim BseDI serta 244 pb dan 115 pb dengan enzim BamHI. Sedangkan pada bakso sapi dengan enzim BseDI, hasil PCR dapat terpotong menjadi 320 pb dan 39 pb dan dengan enzim BamHI hasil PCR tidak terpotong yang menunjukkan bahwa metode mempunyai spesifitas yang baik. Analisis terhadap bakso sapi yang mengandung campuran daging babi dapat mendeteksi keberadaan cemaran babi hingga sebesar 1%. Analisis terhadap delapan sampel bakso komersial berhasil dideteksi satu sampel dari pasar tradisional yang positif terkontaminasi babi. Semua sampel yang berlabel halal tidak menunjukkan adanya kontaminasi babi

Kata Kunci : babi; bakso; analisis halal; PCR-RFLP