DIAGNOSIS INFECTIOUS BOVINE RHINOTRACHEITIS DENGAN ENZIM-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY DAN NESTED POLYMERASE CHAIN REACTION

LUBIS, Elly Puspasari, Tri Untari

2015 | Tesis |

Infectious Bovine Rhinotracheitis merupakan salah satu penyakit strategis yang dapat mempengaruhi produktivitas dan reproduksi pada sapi dan tersebar hampir di seluruh provinsi di Indonesia. Sapi-sapi seropositif tidak selalu menunjukkan gejala klinis IBR, sehingga uji berdasarkan serologis saja dengan ELISA belum dapat disimpulkan bahwa sapi menderita IBR sehingga diperlukan pengujian dengan molekuler nPCR. Penelitian ini bertujuan untuk mendiagnosa IBR pada ternak bibit wilayah kerja Balai Besar Veteriner Wates dengan teknik ELISA dan nPCR. Sebanyak 14 sampel sapi bibit yang berasal dari Balai Besar Inseminasi Buatan Singosari Malang diambil serum dan swab hidung, serum diuji dengan ELISA sedangkan swab hidung diuji nPCR. Nested PCR digunakan untuk mengamplifikasi gen D yang berperan dalam interaksi antara virus dengan sel inang, virus dari sel ke sel, dan fusi virion envelope dengan membran plasma. Nested PCR digunakan primer ekternal (468 bp) dan internal (325 bp). Hasil uji ELISA dari 14 sampel serum, diperoleh 50 % sampel seropositif IBR dan 50% sampel seronegatif IBR. Hasil uji nPCR pada 14 sampel swab hidung diperoleh semua hasil negatif BHV-1. Kontrol sampel organ trachea dari Balai Veteriner Lampung diperoleh 66 % terdeteksi BHV-1. Kesimpulan penelitian ini adalah pada sapi seropositif dan seronegatif dengan ELISA tidak terdeteksi virus BHV-1 dengan nPCR. Sapi yang seropositif tidak selalu mengekskresikan BHV-1.

Infectious Bovine Rhinotracheitis is one of strategic diseases that can affect the productivity and reproduction of cattle and the disease spread to almost all provinces in Indonesia. The result of laboratory test on IBR antibody using ELISA showed that some cattle in the field were serologically positive for IBR but did not show any IBR clinical signs, and therefore molecular diagnostic was needed. This research aims to diagnose Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR) on calves in the working area of Disease Investigation Center (DIC) Wates using ELISA and nPCR. A total of 14 samples of bovine from Singosari National Artificial Insemination Center, Malang taked sera and nasal swabs, sera were tested by ELISA and nasal swabs were tested nPCR. Nested PCR was used to amplify gene D which plays some role in the interaction between the virus and host cell, the virus from cell to cell, and virion envelope fusion with plasma membrane. Nested PCR using external (468 bp) and internal (325 bp) primer. The result of ELISA showed that from 14 samples of bovine sera, 50% of them showed seropositive result on IBR and the remaining 50% showed seronegative result on IBR. All 14 samples of nasal swabs showed negative result for BHV -1 by using nPCR and control samples of trachea were obtained 66 % from DIC Lampung detected BHV-1. The conclusion of this reseach is seropositive and seronegative cattles undetectable BHV-1 virus using nPCR. Seropositive cattles do not always excrete the BHV-1.

Kata Kunci : Infectious Bovine Rhinotracheiti, ELISA, nPCR, gen D, BHV-1