PROFIL SENYAWA BIOAKTIF DAN SITOTOKSISITAS EKSTRAK KALUS BIJI JERUK PURUT (Citrus hystrix DC.) PASCA INDUKSI METIL JASMONAT TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D

YENI AVIDHATUL H., Woro Anindito Sri Tunjung, S.Si., M.Sc., Ph.D.; 3. Dr. rer.nat. Ari Indrianto, S.U.

2017 | Tesis | S2 Biologi

Penggunaan obat-obatan sintetik antikanker seringkali menimbulkan efek samping dan resistensi. Jeruk purut (Citrus hystrix D.C.) merupakan salah satu sumber alternatif senyawa antikanker yang potensial dan relatif aman karena mengandung komponen bioaktif. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak daun jeruk purut mengandung terpenoid dan berpotensi sebagai antikanker. Namun, kandungan senyawa bioaktif dapat berubah-ubah karena faktor lingkungan. Kultur kalus merupakan metode alternatif induksi kandungan senyawa bioaktif dengan lingkungan yang terkontrol. Penelitian sebelumnya berhasil menginduksi kalus dari eksplan biji jeruk purut dengan teknik kultur jaringan dan menghasilkan kalus yang ideal dengan tekstur yang remah/friable. Metil jasmonat dilaporkan dapat menginduksi produksi senyawa metabolit sekunder. Elisitasi dengan metil jasmonat merupakan salah satu upaya meningkatkan terpenoid dari sel kultur sehingga dapat digunakan sebagai elisitor terhadap sel kalus jeruk purut. Penelitian ini bertujuan menerapkan metode elisitasi suspensi sel Citrus hystrix DC. menggunakan elisitor metil jasmonat. Kalus diinduksi dari eksplan biji, kalus umur 40 hari dipindah dalam medium cair untuk inisiasi kultur suspensi. Subkultur dilakukan ketika usia kultur mencapai 21 hari kemudian dilakukan pengukuran kurva pertumbuhan dan kandungan sukrosa dalam medium. Kultur suspensi umur 12 hari akhir fase log dan diberi perlakuan elisitor metil jasmonat konsentrasi dan dipanen pada hari ke-8. Suspensi sel hasil perlakuan diekstrak dengan pelarut etil asetat dengan metode maserasi. Kandungan senyawa bioaktif dalam ekstrak diuji dengan GC-MS. Sitotoksisitas ekstrak diuji menggunakan metode MTT. Suspensi sel jeruk purut (Citrus hystrix DC.) tanpa perlakuan menghasilkan beberapa golongan asam lemak. Senyawa bioaktif yang diproduksi oleh suspensi sel jeruk purut pasca elisitasi metil jasmonat adalah germacrene A, Myrcene, Alpha-terpineol, Geranyl acetate, Trans-caryophyllene, Delta-guaiene dan beberapa jenis asam lemak ester. Ekstrak suspensi sel jeruk purut yang diberi perlakuan metil jasmonat tidak mempunyai nilai toksisitas terhadap sel kanker payudara, namun mampu menghambat pertumbuhan sel kanker payudara T47D.

The use of anticancer synthetic drugs often causes side effects and resistance. Kaffir lime (Citrus hystrix D.C.) is an alternative source of potential and relatively safe anticancer compounds as it contains bioactive components. Previous research has shown that the extract of kaffir lime leaves contains terpenoids and potentially as anticancer. However, the content of bioactive compounds may vary due to environmental factors. Callus culture is an alternative method of induction of bioactive compound content with a controlled environment. Previous research has succeeded in inducing callus from orange seed explants eksplan with tissue culture techniques produce the ideal callus with a crumb / friable texture. Methyl jasmonate is reported to induce the production of secondary metabolite compounds Elicitation with methyl jasmonate is one of the efforts to increase terpenoids from cultured cells so that it can be used as an elicitor of callus orange callus cells. This study aims to apply the method of elicitation of Citrus hystrix DC cell suspension. Using the methyl jasmonate elicitor. Callus induced from seed explants, callus age 40 days transferred in liquid medium for the initiation of suspension culture. Subculture is done when the age of culture reaches 21 days then measured growth curve and sucrose content in medium. Suspected cultures aged 12 days end of log phase and treated with methyl joymonic concentration elicitor and harvested on day 8. The treatment cell suspension was extracted with ethyl acetate solvent by maceration method. The content of bioactive compounds in the extract was tested with GC-MS. Potential anticancer is tested using MTT method. Suspension of lime lime cells (Citrus hystrix DC.) without treatment yields fatty acid compounds. Bioactive compounds produced by suspended cell suspension after methyl jasmonate elicitation is Germacrene A, Myrcene, Alpha-terpineol, Geranyl acetate, Trans-caryophyllene, Delta-guaiene and several types of ester fatty acids. Extracts of kaffir limon cell suspension treated with methyl jasmonate have no toxicity value to breast cancer cell, but able to inhibit the growth of breast cancer cells.

Kata Kunci : Citrus hystrix DC., komponen bioaktif, metil jasmonat, sel T47D, kultur kalus.